一、脑垂体Mallory染色的体会（论文文献综述）
黄艳霞[1]（2021）在《九味楮实颗粒对雌性中枢性性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴影响的实验研究》文中研究表明目的:应用N-甲基-DL-天冬氨酸（NMA）构建SD雌性大鼠中枢性性早熟（CPP）模型,观察九味楮实颗粒对CPP大鼠体质量、垂体分泌的卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）水平及下丘脑GnRHmRNA及KISS-1表达水平的影响,探讨该方治疗性早熟作用机制,并为进一步申请院内制剂奠定基础.方法:选用SD清洁级未孕成年大鼠,2雌1雄一合笼喂养,交配成功后选出5d内出生的雌仔鼠,点数,分为6笼,每笼8只,由亲母喂养,22日龄断奶,并与母鼠分笼,适应性喂养4天后,选用SPF级体质量在（46.49±8.00）g的26日龄SD雌鼠48只,完全随机分为6组:对照组、性早熟模型组、注射用戈那瑞林组、九味楮实颗粒高剂量组、九味楮实颗粒中剂量组、九味楮实颗粒低剂量组,每组8只,除对照组外,其余五组均采用NMA方法建立中枢性性早熟动物模型,对照组及模型组给予生理盐水1.0 mL/只灌胃,九味楮实颗粒高、中、低剂量组分别予69.48、34.74、17.37 g/kg灌胃,西药组予注射用戈那瑞林100μg/kg肌肉注射,每间隔2d测一次体质量,分别用ELISA（酶联免疫吸附测定法）检测血清FSH、LH、E2水平,用实时荧光定量PCR的方法检测各组大鼠下丘脑KISS-1、GnRHmRNA表达水平。结果:1.阴门开启时间比较:与对照组比较,模型组阴门开启时间明显提前,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,中药组及西药组阴门开启时间均延迟,差异有统计学意义（P<0.05）;2.体质量的变化:与对照组比较,各组在生后26d、29d、32d体质量差异无统计学意义（P>0.05）;出生后35d、38d,对照组及模型组的体质量明显高于中药高剂量组,差异有统计学意义（P<0.05）;3.脏器系数:与对照组比较,模型组子宫系数差异具有统计学意义（P<0.05）;西药组、中药中剂量组子宫系数均大于模型组,差异具有统计学意义（P<0.05）;各组间下丘脑系数、卵巢系数及乳腺系数差异均无统计学意义（P>0.05）;4.性激素水平:与模型组比较,对照组、西药组、九味楮实颗粒高、中剂量组LH、FSH、E2水平比较差异均有统计学意义（P<0.05）,说明九味楮实颗粒可降低CPP大鼠血清LH、FSH、E2的水平;九味楮实颗粒低剂量组与高、中剂量组血清LH、FSH、E2水平比较差异有统计学意义（P<0.05）,说明九味楮实颗调节CPP大鼠性激素LH、FSH、E2水平存在量效关系;5.子宫壁内膜厚度及卵巢黄体数:模型组子宫内膜厚度为（444.17±62.75）μm,较模型组（229.39±90.56）μm显着增加（P<0.05）,中药高、中剂量组子宫壁内膜厚度较模型组显着降低（P<0.05）;模型组卵巢黄体个数较对照组明显增多（P<0.05）;中药高、中剂量组及西药组的卵巢黄体个数较模型组显着减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;6.各组下丘脑GnRHmRNA、KISS-1相对表达量:各组造模组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量均高于对照组（P<0.05）;九味楮实颗粒高中低剂量组及戈那瑞林组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量均低于模型组（P<0.05）;九味楮实颗粒中、低剂量组组间GnRHmRNA、KISS-1相对表达量两两比较存在差异,有统计学意义（P<0.05）;九味楮实颗粒高、中、低剂量组与西药组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论:九味楮实颗粒可抑制NMA诱发雌鼠中枢性性早熟的发生,能降低CPP大鼠的血清LH、FSH、E2的水平,减少子宫壁内膜厚度及卵巢黄体生成个数,降低CPP大鼠下丘脑KISS-1及GnRHmRNA的表达水平,九味楮实颗粒可能通过调节下丘脑-垂体-性腺轴起到抑制中枢性性早熟的作用。
唐琪[2]（2021）在《生长激素释放激素（GHRH）受体激动剂MR409对糖尿病肾病的保护效应》文中进行了进一步梳理目的糖尿病患者长期血糖失控可引发多种并发症,其中近1/3糖尿病最终发展为糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）。DN是糖尿病最常见和最严重的并发症,并且目前是全球范围内终末期肾脏疾病的主要原因。目前对DN的治疗缺乏有效的方法,特别是终末期糖尿病肾病主要依赖透析治疗来延缓生命。生长激素释放激素（growth hormone-releasing hormone,GHRH）主要是由下丘脑分泌的一种神经多肽,通过促进脑垂体合成和释放生长激素,对机体生长发育具有重要的调节作用。但近年来发现除脑垂体和中枢神经系统外,机体中许多组织细胞也可表达生长激素释放激素受体（growth hormone-releasing hormone receptor,GHRHR）。MR409是人工合成的一种GHRH类似物,也是GHRHR激动剂,具有促进细胞增殖、抑制细胞凋亡和氧自由基的产生等作用。已有研究报道MR409的治疗对急性心肌梗死和糖尿病视网膜病变能提供保护效应。本研究旨在探讨MR409对DB/DB小鼠糖尿病肾病的保护效应。方法选取SPF级雄性10周龄DB/DB小鼠和野生型（wild type,WT）小鼠,WT小鼠设为对照组,将DB/DB小鼠随机分为模型组（DB/DB组）和治疗组（MR409组）,每组各10只小鼠。适应性饲养2周后,治疗组隔天皮下给予MR409（15μg/只）,对照组和模型给予等量溶剂对照,治疗8周后处死。治疗期间监测小鼠体重、血糖的变化,治疗结束后收集尿液和血清进行生化指标检测。HE染色比较各组小鼠肾脏病理结构变化,PAS染色用于评价肾脏组织中肾小球的损伤,Masson染色和天狼星红染色用于评价肾脏组织纤维化,DHE染色用于检测肾脏中活性氧的含量。Western blot检测GHRHR、肾脏纤维化分子纤连蛋白Fibronectin和TGFβ1、NADPH氧化酶亚基p22phoxh和gp91phox、Klotho、PPARγ、pe NOS蛋白表达水平。结果与对照组相比,DB/DB小鼠尿蛋白与肌酐比值增加（P<0.01）,血清中总胆固醇（total cholesterol,TC）和甘油三酯（triglyceride,TG）含量明显增加（P<0.01）,MR409治疗后DB/DB小鼠尿蛋白与肌酐比值、TC和TG含量降低（P<0.05）。模型组与治疗组小鼠血糖则无明显变化。与对照组相比,DB/DB小鼠GHRHR降低（P<0.01）,MR409治疗后GHRHR蛋白表达显着上调（P<0.01）。DB/DB小鼠肾脏出现明显的肾脏纤维化和肾小球硬化（P<0.01）,经MR409治疗后肾间质纤维化及肾小球硬化面积显着减少（P<0.01）,Fibronectin（P<0.01）、TGFβ1蛋白表达下调（P<0.05）。DB/DB小鼠肾脏中活性氧含量显着增加（P<0.01）,MR409治疗后活性氧含量降低（P<0.01）,同时,NADPH氧化酶亚基p22phox、gp91phox（P<0.05）蛋白表达下调。与对照组相比,模型组小鼠Klotho和PPARγ蛋白表达明显下调（P<0.01）,pe NOS表达上调（P<0.05）,经MR409治疗Klotho（P<0.01）和PPARγ（P<0.05）蛋白表达上调,且增加pe NOS的表达（P<0.05）。结论1.DB/DB小鼠肾脏中GHRHR表达下调,GHRHR激动剂MR409治疗后上调;2.GHRHR激动剂MR409治疗能降低DB/DB小鼠肾脏中的氧化应激,减少肾脏纤维化,改善肾脏功能,最终缓解糖尿病肾病;3.GHRHR激动剂MR409能上调Klotho和PPARγ表达,并增加pe NOS表达。
赵英淇[3]（2020）在《Fas和TNF-α通路在皮质酮和CRH诱导小鼠输卵管上皮细胞凋亡过程中的作用研究》文中研究说明本实验室前期研究证明,在胚胎着床前对母鼠施加束缚应激,促进应激相关激素CRH和皮质酮（CORT）大量分泌,诱导输卵管上皮细胞凋亡,并且发现Fas和TNF-α系统参与该过程。体外实验进一步证明,CRH和CORT通过Fas信号通路引起输卵管上皮细胞凋亡,但是TNF-α系统是否参与其中尚不清楚。本实验中,我们利用体外培养小鼠输卵管上皮细胞模型,添加CRH和CORT进一步探究其影响输卵管上皮细胞凋亡的具体信号通路。结果发现,体外培养输卵管上皮细胞添加CRH(浓度为2×10-6M)和CORT(浓度为1×10-5M)后,与对照组相比健康细胞比例显着下降、细胞凋亡比例显着升高（健康细胞:89.6%vs 64.8%vs 64.8%,早期凋亡:9.4%vs 29.5%vs 29.9%）（p<0.05）、Bcl-2/Bax的比值显着下降（p<0.05）,说明添加CRH和CORT促进输卵管上皮细胞凋亡。与对照组相比,体外培养输卵管上皮细胞过程中添加CRH导致TNF-α和Fas L的表达显着升高;而添加CORT培养后,Fas L的表达显着升高,但TNF-α的表达显着下降。转染si RNA敲低输卵管上皮细胞中TNF-α和Fas L的表达水平,再添加激素培养输卵管上皮细胞发现,敲低Fas L后体外添加CRH和CORT培养的输卵管上皮细胞Bcl-2/Bax的比值显着升高（p<0.05）;而在敲低TNF-α后,虽然体外添加CRH培养的输卵管上皮细胞中Bcl-2/Bax的比值显着升高（p<0.05）,但添加CORT组的Bcl-2/Bax的比值显着降低。并且在敲低Fas L和TNF-α后,添加CRH体外培养输卵管上皮细胞,其与对照组相比健康细胞的比例显着升高,凋亡细胞的比例显着下降（健康细胞:63.2%vs 70.7%vs70.1%,早期凋亡:31.7%vs 26.4%vs 27.4%）,同样在敲低Fas L后添加CORT体外培养输卵管上皮细胞,与对照组相比健康细胞的比例显着升高,凋亡细胞的比例显着下降（健康细胞:62.6%vs 71.1%,早期凋亡:33.3%vs 27.7%）,但是在敲低TNF-α后添加CORT体外培养输卵管上皮细胞,健康细胞和早期凋亡细胞的比例与对照组相比差异不显着（健康细胞:62.6%vs 63.0%,早期凋亡:33.3%vs 31.0%）。从Fas L基因突变和TNF-α基因敲除小鼠获取输卵管上皮细胞后,体外培养过程添加CRH和CORT发现,与野生型小鼠细胞相比,在添加CRH后两种基因突变细胞的凋亡情况都有所缓解（健康细胞:66.9%vs 81.8%vs 81.1%,早期凋亡:24.2%vs 16.4%vs16.8%）;而在添加CORT时只有Fas L基因突变的小鼠细胞凋亡有所缓解,TNF-α基因敲除小鼠细胞凋亡并不缓解（健康细胞:64.3%vs 80.6%vs 64.1%,早期凋亡:30.1%vs 16.8%vs 30.7%）。综上所述,本实验证明,CRH诱导输卵管上皮细胞的凋亡过程涉及Fas和TNF-α两个系统,而CORT诱导输卵管上皮细胞的凋亡过程通过Fas通路但不涉及TNF-α系统。
杨海燕[4]（2020）在《低水平血清泌乳素与PCOS患者代谢紊乱和IVF-ET结局的关系及相关机制研究》文中研究指明第一章低水平血清泌乳素与多囊卵巢综合征不孕患者代谢紊乱的相关性研究研究背景:泌乳素（prolactin,PRL）除了在调节乳房发育和泌乳方面起良好作用外,已有其他300多种独立功能得到证实。研究表明PRL在机体代谢中起重要的调控作用,但是处于正常生理范围内和超出正常生理范围时血清PRL和代谢风险的关系是不一样的。超出生理范围的高PRL血症患者的PRL水平越高,越容易出现胰岛素抵抗、肥胖、动脉粥样硬化及骨质疏松等代谢问题;但是当血清PRL处于正常生理范围之内时,它和代谢风险的关系则会变得相反,PRL水平越低,发展成代谢综合征和2型糖尿病等不良代谢结局的可能性反而越大。也就是说血清PRL水平过高或过低都会引起代谢紊乱,但是处于正常生理范围内的低水平血清PRL和代谢紊乱的关系往往容易被忽视。多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）是育龄期妇女最常见的内分泌代谢紊乱性疾病,与胰岛素抵抗、糖耐量异常、高血脂、高血压和心血管疾病等的发生密切相关,发病机制至今还不清楚。由于血清PRL在机体代谢中起重要的调控作用,PRL和PCOS患者代谢紊乱的相关性值得进一步研究和探讨。PCOS患者常常伴发高PRL血症,高PRL血症与PCOS代谢紊乱的相关研究已经很多,在临床上也已经备受关注,但是血清PRL处于正常生理范围内的那部分PCOS患者的PRL水平与代谢的关系却从未被关注。当处于正常生理范围之内时,PCOS患者的血清PRL水平与正常人群相比究竟如何及其与代谢紊乱究竟存在怎样的关系不得而知,至今也未见报道。本研究首次对这些问题进行探讨,以血清PRL水平处于正常生理范围内的大样本的PCOS不孕患者作为研究对象来分析这些患者的血清PRL水平和正常人群的差异及其与代谢紊乱的相关性,从而为今后研究PRL的代谢调控机制和PCOS的发病机制提供理论依据。研究目的:回顾性分析PCOS不孕患者的血清PRL水平及其与代谢紊乱的相关性。研究方法:以2007年1月至2018年8月在温州医科大学附属第一医院生殖医学中心第一次行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET）治疗并且血清PRL水平在正常生理范围内的2052例PCOS不孕患者作为研究对象,以同期9696例血清PRL水平也在正常生理范围内的输卵管性不孕患者作为对照,回顾性分析这11748例不孕患者的血清PRL、血压、体重指数（body mass index,BMI）、基础内分泌激素、空腹血脂、空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）、肝功能及甲状腺激素等指标的水平;再对其中792例有完整腰围、臀围、空腹胰岛素（fasting insulin,FINS）资料的PCOS不孕患者的腰围、臀围、FINS、稳态模式评估法测定胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR）及HOMA-β细胞功能指数（HOMA-β）等指标进行回顾性分析。研究结果:1、对2052例PCOS不孕患者的回顾性分析发现,控制BMI的影响后,不同年龄段的PCOS不孕患者的血清PRL水平均明显低于对照组（P<0.05）。再以血清PRL四分位数为标准分组后比较各项指标发现,PCOS不孕患者的血清PRL水平越低,促黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、LH/卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）、血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine ainotransferase,ALT）、γ-谷氨酰转移酶（glutamyltransferase,γ-GGT）、血清游离三碘甲腺原氨酸（free triiodothyronine,FT3）及 FT3/血清游离甲状腺素（free thyroxine,FT4）越高,FPG、血清促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone,TSH）及FT4越低（P<0.05）。纠正年龄和BMI影响后的多元线性回归分析发现血清PRL与FPG、TSH及FT4正相关,与LH及LH/FSH负相关（P<0.05）。2、对792例PCOS不孕患者的回顾性分析则发现,血清PRL水平越低,PCOS不孕患者的腰围、臀围、FINS、HOMA-IR及HOMA-β则越高（P<0.05）。纠正年龄和BMI影响后的多元线性回归分析发现血清PRL与FINS、HOMA-IR及HOMA-β 负相关（P<0.05）。结论:当处于正常生理范围之内时,PCOS不孕患者的血清PRL水平要明显低于正常人群。而低水平血清PRL可能是增加PCOS不孕患者代谢风险的一个重要因素,也是预测胰岛素抵抗和β细胞功能障碍的良好指标。第二章 低水平血清泌乳素与多囊卵巢综合征不孕患者体外受精-胚胎移植治疗结局的相关性研究研究背景:内分泌及代谢紊乱与流产、死胎等不良孕产史密切相关。研究表明糖、脂等代谢的异常不仅能改变血清生化组分,还会在卵泡液这一微环境层面产生负面影响,最终降低临床妊娠率。泌乳素（PRL）在机体代谢调控中起重要作用,超出正常生理范围的高PRL血症以及正常生理范围内低水平血清PRL都会对代谢产生不良影响,那么过高或过低的血清PRL是否也可能因此对妊娠结局产生不良影响?是否也可能因此影响体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的治疗结局?到目前为止这些问题从未被关注,也未见相关研究报道。高PRL血症可通过下丘脑-垂体-卵巢轴影响卵泡发育和黄体功能从而对妊娠结局产生不良影响,已在临床上受到足够的重视和有效的治疗,而正常生理范围内低水平血清PRL与妊娠及IVF-ET治疗结局的相关性往往容易被忽视,更值得关注和进一步的研究探讨。我们的前期临床研究已经证实多囊卵巢综合征（PCOS）不孕患者的血清PRL水平低于正常人群,并与代谢紊乱密切相关。本研究首次对正常生理范围内低水平血清PRL和PCOS不孕患者及输卵管性不孕患者这两类比较有代表性的不孕人群的IVF-ET治疗结局的可能关系做初步探讨,希望为今后探索有效的改善妊娠结局的治疗方案提供理论依据。研究目的:回顾性分析正常生理范围内低水平血清PRL对PCOS不孕患者及输卵管性不孕患者IVF-ET治疗结局的影响。研究方法:以2007年1月至2018年8月在温州医科大学附属第一医院生殖医学中心第一次行IVF-ET治疗并均行新鲜胚胎移植、血清PRL水平均在正常生理范围内的1414例PCOS不孕患者和7430例输卵管性不孕患者作为研究对象,回顾性分析血清PRL水平与这些不孕患者IVF-ET治疗结局的关系。研究结果:1、以血清PRL中位数为标准对1414例PCOS不孕患者分组后比较各项指标发现,血清PRL水平越低的患者血清LH、促性腺激素（gonadotropin,Gn）使用总量和使用天数越大,人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hCG）注射日血E2水平越低,差异均有显着性（P<0.05）。而获卵数、卵子成熟率、临床妊娠率、胚胎种植率及活产率随着血清PRL水平的降低呈现出下降的趋势,流产率则呈现出升高的趋势,但是差异均没有达到显着性。当以活产率作为最终的观察指标,在纠正年龄和BMI等多个影响因素后发现PCOS不孕患者的活产率与T负相关,与优质胚胎数正相关,获卵数在7-15个之间的不孕患者活产率最为理想（P<0.05）。而血清PRL水平虽然与活产率呈现出负相关的趋势,但是差异没有达到显着性。2、以血清PRL中位数为标准对7430例输卵管性不孕患者分组后比较各项指标发现,血清PRL水平越低的患者血清睾酮（testosterone,T）、窦卵泡计数（antral follicle count,AFC）、hCG 注射日血雌二醇（estradiol,E2）、获卵数、卵子成熟率、优质胚胎数、临床妊娠率、胚胎种植率及活产率越低,血清LH、Gn使用总量及流产率则越高,差异均有显着性（P<0.05）。当以活产率作为最终的观察指标,在纠正年龄和BMI等多个影响因素后发现,输卵管性不孕患者的活产率与年龄及T负相关,与AFC及优质胚胎数正相关（P<0.05）。而血清PRL水平虽然与活产率呈现出负相关的趋势,但是差异没有达到显着性。结论:正常生理范围内低水平血清PRL在一定程度上影响了 PCOS不孕患者和输卵管性不孕患者的超促排卵反应性和实验室结果,并和活产率呈现出负相关趋势,但是还没有足够的证据表明低血清PRL是活产率的独立影响因素。低血清PRL与IVF-ET治疗结局的关系还需要进一步研究证实。第三章泌乳素及其受体介导JAK2/STAT5通路对脂肪代谢的影响及机制研究研究背景:泌乳素（PRL）通过和受体结合启动相应的细胞内信号传导通路对目标基因产生作用,从而实现它众多的生物学功能。研究表明PRL与代谢密切相关,但是由于PRL受体的的多样性以及不同类型的受体具有不同的调控机制等原因导致PRL和受体结合后启动的信号通路及调控方式极其复杂。PRL及其受体具体通过什么途径来调控代谢到目前为止都还不清楚。酪氨酸激酶（Janus kinase,JAK）/转录激活因子（signal transducer and activators of transcription,STAT）通路是PRL第一个确定的信号转导通路,也是其他众多细胞因子和生长因子信号传导的共同途径,广泛参与细胞增殖、分化及凋亡等重要生物学过程,并在能量代谢中起重要调控作用。PRL的代谢调控机制至今还不清楚,JAK/STAT通路又和代谢密切相关,所以PRL及其受体介导的JAK/STAT信号通路对代谢的调控作用成为我们关注的重点。既往研究发现PRL能够激活JAK2/STAT5通路调节乳腺上皮细胞乳糖、乳脂和乳蛋白的合成及分泌,但是相关研究比较零星,并主要集中在乳腺发育和乳腺癌研究方面。此外,关于PRL调控乳脂等相关基因转录作用的研究一直集中在乳腺上皮细胞上,对脂肪细胞代谢的研究却几乎未被关注。脂肪组织在机体内分泌和代谢中起重要作用,选择脂肪细胞进行PRL及其受体介导JAK2/STAT5信号通路调节代谢相关机制的研究可能更有意义。另外,在PRL/PRLR介导的JAK2/STAT5信号传导通路中会产生一种剂-效关系特性,而在不同的物种、组织和细胞中PRL通过JAK2/STAT5通路产生正常效应所需要的浓度都不一样,但是具体什么物种、什么组织和什么细胞产生正常效应需要多少PRL浓度都还不清楚,仅有的几项零星的研究也均在摸索过程中,值得进一步研究探讨。此外,JAK/STAT信号通路的异常激活在某些疾病的发生过程中可能存在关键的调控作用,比如肿瘤和白血病。过高或过低的血清PRL都会引起PCOS患者代谢紊乱,它们是否有可能通过JAK2/STAT5通路的异常激活在PCOS的发生发展中起作用也还不清楚,相关研究未见报道。胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）是PCOS代谢异常的基本特征和病理生理过程的中心环节,本研究利用成熟脂肪细胞建立IR模型,首次尝试用不同浓度RPL及PRLR过表达处理IR模型细胞来观察JAK2/STAT5信号通路的变化以及对脂代谢的影响,仅希望能对RPL与脂代谢的关系及相关机制做一个简单粗略的探讨,为将来更好的探索PRL的代谢调控机制和PCOS的发病机制以及代谢相关性疾病的有效临床治疗方案指明一个研究的方向。研究目的:探讨PRL及其受体介导JAK2/STAT5通路对脂肪代谢的影响及作用机制。研究方法:通过油酸诱导分化,将SW872前脂肪细胞诱导成成熟脂肪细胞,并利用油红0进行鉴定,然后通过油酸孵育建立IR模型。分别用高、中、低浓度的PRL干预IR模型细胞,Western blot检测干预24h和48h后PRLR、JAK2、p-JAK2、STAT5及p-STAT5蛋白的表达情况,甘油三酯（troglyceride,TG）试剂盒检测细胞内TG的含量。再构建PRLR过表达载体,将载体及空载转染至成熟脂肪细胞中,Western blot验证转染效率。随后油酸孵育 24 小时进入 IR 状态。Western blot 检测 PRLR、JAK2、p-JAK2、STAT5 及p-STAT5蛋白的表达,TG试剂盒检测细胞内TG的含量。研究结果:油红0染色结果显示高浓度和中浓度PRL干预组的脂质含量明显高于IR模型组（P<0.05）。PRL干预24h和48h后细胞中的TG含量与模型组相比显着增加,且随着PRL浓度的增加,TG含量也随之增加（P<0.05）。Western blot结果显示,在PRL干预24h和48h时,与对照组相比,IR模型组中PRLR、p-JAK2和p-STAT5表达量显着降低;与模型组相比,高浓度PRL干预组中PRLR、p-JAK2和p-STAT5表达量显着增加（P<0.05）。过表达PRLR显着增加IR模型中TG含量（P<0.05）。Western blot结果显示,与对照组相比,IR模型组中PRLR、JAK2、p-JAK2、STAT5和p-STAT5表达水平显着降低;与模型组相比,PRLR过表达组中PRLR、JAK2、p-JAK2、STAT5和p-STAT5表达水平显着增加（P<0.05）。研究结论:PRL及其受体与脂肪代谢有关。JAK2/STAT5信号通路在脂肪代谢中起重要的调控作用。PRL干预及PRLR过表达可以通过JAK2/STAT5通路的异常激活增加脂肪细胞中TG的沉积,影响脂肪代谢。但是PRL在脂肪细胞中产生正常效应所需要的浓度以及PRL及其受体介导的JAK2/STAT5通路的异常激活与PCOS发生发展的相关性都还需要更深入的研究来探讨。
李美虹[5]（2020）在《miR-149-3p在垂体腺瘤细胞中的作用》文中进行了进一步梳理垂体腺瘤是常见的颅内肿瘤,大部分垂体腺瘤无法转移,所以它被认为是一种良性肿瘤,但是这些良性肿瘤可能具有高度侵袭性,并且可能由于局部结构的浸润或激素分泌过多诱发的综合征导致死亡。大量的研究已经表明microRNAs这类小分子非编码RNA虽然不能直接编码蛋白质,但它们在生命体的生长过程中发挥了重要作用,microRNAs对于脑垂体腺瘤细胞的调控也有相关报道。在本课题中我们主要证明了 microRNA-149-3p（miR-149*）对垂体腺瘤的发展有促进作用。通过细胞活力和凋亡检测实验表明,miR-149*促进GH3细胞增殖并抑制TNF-α诱导的细胞凋亡。进一步的研究表明miR-149*可以通过激活AMPK信号通路促进细胞增殖,同时,miR-149*诱导了 LC3-Ⅰ到LC3-Ⅱ的转化以及p62的积累,表明miR-149*通过阻断自噬流诱导了自噬体的积累。用3-methyladenine（3-MA）抑制自噬后,miR-149*对GH3细胞的促增殖作用和抑制凋亡的作用明显减弱,表明miR-149*对细胞的促增殖和抑凋亡作用在某种程度上取决于其诱导自噬的开始。进一步的机理研究揭示,miR-149*靶向抑制GH3细胞中的PPP2R5A的表达,从而调控细胞增殖、自噬和凋亡。此外,miR-149*在裸鼠异种移植模型中促进了 GH3细胞的肿瘤发生。这些数据表明miR-149*作为促癌基因,可在体内和体外促进大鼠垂体腺瘤细胞GH3的生长,这也可能为有效治疗垂体腺瘤提供潜在靶点。
吕艳敏[6]（2020）在《海藻玉壶汤特定剂量条件下的反药组合加减抗甲状腺肿的作用及机制》文中提出研究背景:海藻与甘草属于十八反反药组合之一,明代陈实功所着《外科正宗》中的海藻玉壶汤中就含有海藻与甘草这对反药,却是临床常用的经典名方,常用于治疗甲状腺肿大、胆囊息肉等。然而反药组合配伍使用涉及到临床用药的安全性以及合理性问题,是关系到国计民生的社会问题。到目前为止,关于反药组合能否配伍使用,虽然有着越来越多的科研人员的重视和参与,并且取得了一定成果,但依然颇具争议。课题组前期开展的国家973计划课题从方药结合的角度对含海藻甘草反药组合的海藻玉壶汤进行研究,分别从海藻甘草反药组合在复方中的不同配伍比例、甘草的不同炮制品种、海藻甘草同一配伍比例下的不同给药剂量等方面展开实验来研究反药组合在复方中应用的特点及规律。后续开展的国家自然科学基金资助项目研究者依据2015版《中华人民共和国药典·一部》（以下简称《中国药典》）中规定的甘草、海藻的使用剂量,分为《中国药典》底限、高限、高限的两倍三个剂量组,从量-毒-效的角度研究海藻不同品种以及海藻甘草不同配伍剂量是否是影响海藻与甘草配伍反与不反的因素,结果显示各配伍剂量组对纠正甲状腺肿大大鼠甲状腺功能各项指标及甲状腺组织形态的效果有差异,筛选出了“效”相对明显的条件:即海藻品种选用海蒿子,甘草使用生甘草,海藻、甘草的剂量选用《中国药典》高限剂量的两倍;在此条件下模型大鼠的心肝肾各项指标与空白组比较没有明显差异,未发现明显毒性。但关于其起效的物质基础以及起效的作用机制方面,仍需进一步探讨。研究目的:本实验基于课题组前期研究成果,进一步探讨在海藻、甘草剂量为《中国药典》高限剂量的两倍（即海藻24g、甘草20g）条件下,海藻与甘草在海藻玉壶汤中的加减应用,从物质基础,下丘脑-垂体-甲状腺轴的调节作用,甲状腺细胞凋亡等方面进行研究,试图揭示其抗甲状腺肿大的机制,以期为完善海藻与甘草反药组合的配伍实质及指导临床应用提供实验依据。研究方法:1物质基础:选择海藻玉壶汤所含中药材的共有成分以及结合文献报道中提到的反药组合对其溶出含量影响较大的成分:橙皮苷（醋青皮、陈皮共有成分）;阿魏酸（川芎、当归、独活共有成分）;连翘苷;甘草苷、甘草酸（文献报道中提到的反药组合对其溶出含量影响较大的成分）。使用高效液相色谱法作为检测方法,对海藻玉壶汤全方组（以下简称HYD）、海藻玉壶汤减甘草组（以下简称HYD-G）、海藻玉壶汤减海藻组（以下简称HYD-H）、海藻玉壶汤减海藻甘草组（以下简称HYD-GH）、海藻甘草组（以下简称GH）、甘草组（以下简称GC）间相同活性成分溶出含量进行比较。2机制探究:选用健康成年Wistar大鼠,雌雄各半,体重200±20g,分为空白组、模型组、阳性药组（优甲乐）、HYD组、HYD-H组、HYD-G组、HYD-GH组。通过甲状腺病理组织形态方面的变化及检测血液生化指标重点检测甲状腺功能、初步分析成模及药物的起效情况,再通过电镜下观察其微观结构的形态变化以及TUNEL检测凋亡指数后进一步通过蛋白、基因的检测来探究海藻玉壶汤中海藻甘草反药组合加减应用抗甲状腺肿大的作用机制。研究结果:1海藻玉壶汤中海藻甘草反药组合加减对方中主要活性成分溶出含量的影响比较各组中活性成分溶出含量得出:甘草苷、甘草酸在各组中的溶出含量由高到低为HYD-H>HYD>GC>GH;连翘苷、橙皮苷、阿魏酸在各组中溶出含量由高到低为:HYD-H>HYD-GH>HYD-G>HYD。2海藻玉壶汤中反药组合加减对甲状腺肿大模型大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响比较各组大鼠甲状腺系数,光镜下观察大鼠甲状腺组织形态改变,并统计甲状腺组织切片的细胞核数、滤泡面积发现各拆方组间甲状腺组织病理形态改善情况:HYD>HYD-GH>HYD-H>HYD-G。检测甲状腺激素水平三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）发现海藻玉壶汤及其拆方组均表现出对甲状腺肿大模型大鼠甲状腺激素水平的回调作用,其回调情况从高到低分别为:HYD、HYD-G、HYD-H、HYD-GH;检测甲状腺激素的合成指标并与模型组比较发现HYD组、HYD-G组甲状腺球蛋白（Tg）含量升高,HYD及其各拆方组甲状腺过氧化物酶（TPO）、促甲状腺激素受体（TSHR）水平均降低;检测甲状腺激素的转运指标并与模型组比较发现HYD及其各拆方组甲状腺素结合球蛋白（TBG）、白蛋白（ALB）水平均升高;检测甲状腺激素的调控指标并与模型组比较发现HYD组及其各拆方组促甲状腺激素释放激素（TRH）、促甲状腺激素（TSH）水平均降低,有统计学差异。3海藻玉壶汤中反药组合加减对甲状腺肿大大鼠细胞凋亡及其凋亡通路的影响电镜观察各组细胞微观结构发现,与模型组相比HYD组表现出细胞全面皱缩,细胞核固缩或崩解而弥散在胞浆内,染色质浓缩并边缘化;胞质内粗面内质网减少,线粒体数量减少体积减小,溶酶体数量增多,可见典型的自噬囊泡等凋亡特征,拆方组虽有典型的凋亡特征性变化但凋亡程度不及HYD组。通过TUNEL法检测甲状腺细胞凋亡情况计算凋亡指数发现,与模型组相比,HYD组甲状腺组织凋亡细胞数明显增加,HYD-G组、HYD-GH组未见明显变化,HYD-H组凋亡细胞数明显减少。检测甲状腺组织中Caspase-8、Caspase-9蛋白发现,与空白组相比模型组Caspase-8、Caspase-9水平无明显变化;与模型组比较,给药各组Caspase-8、Caspase-9水平无明显差异。检测Fas、Bcl-2 mRNA发现,与空白组比较模型组Fas、Bcl-2 mRNA表达水平无明显变化;经HYD组及其拆方各组给药治疗后,与模型组比较Fas、Bcl-2 mRNA含量无明显变化。研究结论:1海藻与甘草这对反药组合单独配伍时,表现出引起甘草中甘草苷、甘草酸的溶出含量降低的结果。二者在复方中配伍应用时,甘草苷、甘草酸的溶出含量与甘草组基本持平。而与复方全方组相比,去掉海藻甘草反药组合的拆方组表现出引起甘草苷、甘草酸、连翘苷、橙皮苷、阿魏酸溶出含量升高的结果,可为海藻玉壶汤临床应用及反药组合能否配伍应用研究提供参考。2海藻玉壶汤对甲状腺肿大模型大鼠甲状腺激素水平和组织形态均有改善作用。复方各组比较甲状腺组织病理形态,其改善情况为HYD>HYD-GH>HYD-H>HYD-G;复方各组比较甲状腺激素相关指标水平,其恢复情况为HYD>HYD-G>HYD-H>HYD-GH。在改善甲状腺肿大方面,海藻玉壶汤中反药组合同用的效果优于去反药组合的效果。改善甲状腺肿大的机制与调节甲状腺激素的合成、转运,调控下丘脑-垂体-甲状腺轴有关。3通过电镜微观观察甲状腺细胞及TUNEL法检测甲状腺凋亡指数发现海藻玉壶汤能够促进甲状腺肿大模型大鼠甲状腺细胞的凋亡,全方组促进凋亡的水平强于拆方组。通过分子生物学实验研究发现,本实验中海藻玉壶汤及其拆方促进甲状腺肿大细胞凋亡与Caspase-8、Caspase-9蛋白以及Fas、Bcl-2基因表达无显着相关性,没有统计学差异。
杨凯[7]（2020）在《曾庆琪教授辨治男性不育症的学术思想及润精汤治疗少弱精子症的临床和实验研究》文中研究指明目的本文首先对曾庆琪教授治疗男性不育症的学术思想和临证经验进行分析总结;在前期理论的基础上采用单盲、随机、阳性对照药物的临床研究方法初步探讨润精汤对特发性少弱精子症患者的临床有效性和安全性;然后在运用奥硝唑诱导建立的少弱精子症SD雄性大鼠模型的基础上,通过观察润精汤对少弱精子症模型大鼠精液质量、性激素水平、大鼠睾丸组织病理形态变化、睾丸组织细胞凋亡、睾丸波形蛋白表达和ERK信号通路表达的变化,初步探讨润精汤治疗少弱精子症的作用靶点和作用机制,为润精汤治疗特发性少弱精子症的临床应用提供科学依据。方法1.经验总结:对曾庆琪教授治疗男性不育症的学术思想和临证经验进行分析总结,从病因病机、辨病论治、诊断治法、方药配伍、优生助孕和预防调护等方面进行了详细论述。2.临床研究:采用单盲、随机、阳性对照药物的临床研究方法,将符合诊断标准和纳入标准的72例特发性少弱精子症患者随机分为试验组（润精汤）和对照组（还少胶囊）,每组36例,分别治疗3个月,记录两组患者治疗前后的精液质量（精液量、精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率、精子总活动力）、性激素水平、中医症状评分、安全性指标和不良反应情况,评价润精汤的临床有效性和安全性。3.实验研究:将32只SD雄性大鼠采用单纯随机抽样方法分成四组,每组8只,分别为空白组、模型组、低剂量组和高剂量组。空白组予以生理盐水灌胃;模型组予以奥硝唑ORN（400mg/kg·d）灌胃;低剂量组予以润精汤（14g/kg）+奥硝唑ORN（400mg/kg·d）灌胃;高剂量组予以润精汤（56g/kg）+奥硝唑ORN（400mg/kg·d）灌胃,疗程四周。实验结束后,检测大鼠血清性激素指标（FSH、LH和T）、大鼠精液质量（精子浓度、精子前向运动百分率、精子总活动力和精子畸形率）,采用Western Blot和免疫组织化学法测定大鼠睾丸波形蛋白表达和睾丸ERK信号通路表达,采用TUNEL法检测大鼠睾丸组织细胞凋亡情况。结果1.临床研究:①试验组（润精汤）和对照组（还少胶囊）均能提高精液质量（精液量、精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率、精子总活动力）、调节性激素水平和改善中医临床症状,从而提高患者配偶妊娠率和临床有效率,且试验组（润精汤）改善更为明显。②润精汤未见明显毒副作用及不良反应。2.实验研究:①精液质量:模型组大鼠精子浓度、精子总活动力、精子前向运动百分率低于空白组（P<0.05）,精子畸形率高于空白组（P<0.05）;低剂量组、高剂量组的精子总活动力高于模型组（P<0.05）,精子畸形率低于模型组（P<0.05）;低剂量组的浓度和精子前向运动百分率轻度高于模型组（P>0.05）;高剂量组的浓度和精子前向运动百分率高于模型组（P<0.05）。②性激素:各组黄体生成素（LH）无明显变化（P>0.05）;模型组卵泡刺激素（FSH）高于空白组（P<0.05）,低剂量组和高剂量组低于模型组（P<0.05）;模型组睾酮（T）低于空白组（P<0.05）,低剂量组和高剂量组高于模型组（P<0.05）。③睾丸组织病理形态变化:空白组大鼠睾丸组织中各曲细精管生精上皮形态规则、排列整齐和结构完整,生精小管管腔内可见各级分裂活跃、形态规则、排列整齐和结构完整的生精细胞和大量形态正常且成熟的精子。模型组大鼠睾丸组织中各曲细精管生精上皮形态紊乱、排列不整齐和结构松散,生精小管管腔内各级生精细胞排列紊乱,且大量减少,甚至脱落,精子和生精细胞数量明显减少,且形态明显异常,生精上皮部分变性可见大量空泡。低剂量组大鼠睾丸组织中各曲细精管生精上皮形态的规则性、排列的整齐性和结构的完整性较模型组有所改善,生精小管管腔内正常生精细胞数和形态正常且成熟的精子数较模型组也有所增加,脱落生精细胞数量有所减少。高剂量组大鼠睾丸组织病理形态结构较低剂量组进一步有所改善,接近于空白组。④睾丸组织细胞凋亡的变化:模型组生精小管管腔内可见大量生殖细胞凋亡,大鼠睾丸组织凋亡阳性细胞率明显高于空白组（P<0.01）。低剂量组和高剂量组生精小管管腔内可少量生殖细胞凋亡,低剂量组大鼠睾丸组织凋亡阳性细胞率明显低于模型组（P<0.05）,高剂量组大鼠睾丸组织凋亡阳性细胞率明显低于模型组（P<0.01）。⑤睾丸组织波形蛋白表达的变化:空白组睾丸组织波形蛋白主要分布于睾丸支持细胞的核周围,并且从基底区域向近腔小室延伸。模型组睾丸组织波形蛋白信号和分布范围与空白组比较明显减弱,波形蛋白表达量明显降低（P<0.001）。低剂量组和高剂量组的睾丸组织波形蛋白的主要分布从睾丸支持细胞的核周围区域向内腔延伸,并且波形蛋白在两组间分布也趋于正常,波形蛋白表达量明显高于模型组（P<0.01）。⑥睾丸组织ERK信号通路的变化:模型组大鼠睾丸组织p-ERK蛋白表达量明显高于空白组（P<0.001）;低剂量组和高剂量组大鼠的睾丸组织p-ERK蛋白表达量明显低于模型组（P<0.001）。结论1.润精汤是曾庆琪教授基于“精室理论”,根据精室的功能特点,总结出“通补并用”为核心的治疗法则,创制而成的治疗少弱精子症的经验方,药物组成有菟丝子、黄精、山药、枸杞、仙灵脾、水蛭、刺五加、红景天、陈皮、川牛膝,诸药具有“肝脾肾三脏兼顾、气血阴阳平调、补而不腻、通而不损”的特点,全方以补肾健脾为主,兼有补血养肝、活血通络、行气利湿的作用,本方治法较单补肾填精法或补肾活血法更为全面,更加符合当今大多数男性不育症的临床实际情况,尤其是对江南地区的患者更为适宜。2.润精汤和还少胶囊均能提高精液质量（精液量、精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率、精子总活动力）、调节性激素水平和改善中医临床症状,从而提高患者配偶妊娠率和临床有效率,且润精汤改善更为明显。所以说润精汤是安全和有效的,且未见明显不良反应,有一定的临床推广价值。3.润精汤可以改善奥硝唑诱导的少弱精子症大鼠的精液质量、血清性激素和睾丸组织病理形态学变化,初步猜测可能与润精汤调控下丘脑-垂体-睾丸性腺轴,调节生殖内分泌激素的水平,改善睾丸微循环和精子生成的局部微环境有关;此外润精汤可上调睾丸波形蛋白的表达和下降p-ERK的表达,提高生殖细胞结构的稳定性和抑制大鼠生殖细胞的凋亡,促进生殖细胞增殖等,其作用机理可能与抗氧化应激有关。
汪莹[8]（2019）在《无功能型垂体腺瘤的miRNA表达及“垂宁方”对其内源性差异miRNA作用机制的探索》文中认为目的1、利用泌乳素型垂体腺瘤（Prolactin-type pituitary adenoma,PRL型垂体腺瘤）、生长激素型垂体腺瘤（Growth hormone type pituitary adenoma,GH型）发现的内源性差异mi RNA（mi R-26b、mi R-138、mi R-206、mi R-let-7e）作为检测基因,对比无功能型垂体腺瘤（nonfunctional pituitary adenomas,NFPAs）受试者与健康人对照组相关的mi RNA表达水平,探究无功能型垂体腺瘤与PRL型腺瘤、GH型腺瘤4个差异性mi RNA表达的异同。2、对比无功能型垂体瘤受试者“垂宁方”治疗前和治疗后mi RNA表达的变化水平,结合临床疗效评价指标,探索“垂宁方”治疗无功能型垂体腺瘤可能的作用机制。方法临床选择10名尚未中医药治疗且拟长期服用“垂宁方”1年的无功能型垂体腺瘤受试者入组本课题作为研究对象,同时取10名健康人作为对照。抽取外周血,对课题组前期获得的4个差异性mi RNA（mi R-26b、mi R-138、mi R-206、mi R-let-7e）通过qrt PCR技术进行检测,并做记录和存档。对比治疗前和治疗后受试者的mi RNA的表达水平,以及对此受试者治疗前后与健康人相关mi RNA的表达水平;通过统计分析,探索内源性mi RNA表达的差异和意义。结果1、治疗前无功能型垂体腺瘤受试者外周血清中,mi R-26b、mi R-138、mi R-206、mi R-let-7e的表达与健康人有显着区别（P<0.05）。2、无功能型垂体腺瘤受试者经“垂宁方”治疗1年后,按照中医证候积分评价,10例受试者中有效6例,显效4例;根据西医疗效评价标准,有效7例,显效3例。受试者mi R-138、mi R-let-7e的表达明显上调,其中mi R-138与健康人表达水平无明显差异（P>0.05）。结论1、mi R-26b、mi R-138、mi R-206、mi R-let-7e参与了无功能型垂体腺瘤的发生发展,与PRL型、GH型有相似的差异性mi RNA表达,为进一步探索各类型垂体腺瘤的肿瘤标志物提供一定依据。2、中药“垂宁方”治疗无功能型垂体腺瘤效果显着,对差异性mi RNA表达有一定的调节作用,mi R-138、mi R-let-7e明显上调,其中,受试者治疗后mi R-138水平趋近于健康人水平,这为进一步探索“垂宁方”对各类型垂体腺瘤内源性差异mi RNA调节的作用机制提供了一定思路,为中医药有效治疗无功能型垂体腺瘤提供实验室依据。
黄顺楷[9]（2019）在《弓背青鳉雌、雄激素受体基因对雌激素响应及雌二醇处理转录组分析》文中进行了进一步梳理环境雌激素（Environmental estrogens,EEs）是一种具有雌激素效应,在生物体内模拟雌激素,并通过相应受体介导而对生物体基因转录造成影响的一类化合物。雌激素受体（Estrogen receptor）与雄激素受体（Andorgen receptor）是核受体超家族的成员,介导性激素信号传导,参与性腺发育、成熟等生理过程。弓背青鳉（Oryzias curvinotus）作为湛江本地红树林主要种,具有繁殖力强、世代周期短、广盐性等特点,具有开发为模式生物的潜力。本研究对弓背青鳉进行了RT-qPCR的内参基因筛选;初步探究了弓背青鳉雌、雄激素受体基因表达特征与功能。同时为了评估EEs给生物体带来的潜在危害风险,筛选出合适的EEs监测生物标志物,本研究对雌二醇（E2）处理24 h弓背青鳉仔鱼进行转录组测序,并筛选出显着上调基因,评估其对雌激素处理的响应特性及对双酚A处理的敏感程度。主要结果如下:1、对弓背青鳉进行RT-qPCR内参基因的筛选,通过RefFinder预测,结合geNorm、NormFinder和Bestkeeper分析,结果显示使用eef1β和rps4x两个管家基因作为不同组织、不同胚胎发育阶段和不同EEs处理的RT-qPCR内参基因,可以获得更加准确的目的基因定量水平。通过克隆获得弓背青鳉雌激素受体基因er共有三种亚型,雄激素受体基因ar共有两种亚型,在6种组织（眼、肌肉、脑、肝脏、性腺和鳃）中,三种er均主要在肝脏和性腺有高表达;两种ar在各组织中均有分布,其中arα在眼睛、肝和性腺高表达;arβ则仅在性腺高表达。在10个胚胎发育阶段（1细胞期、卵裂期、囊胚期、原肠胚、16肌节期、发眼期、脊索空泡化完成期、心脏完成期、脾发育期和出膜期）中,er和ar具有不同的表达特征。2、弓背青鳉仔鱼er和ar分别对不同EEs处理有不同的响应表达特征,各浓度（2μg/L、20μg/L和200μg/L）E2能上调erα和erβ1表达,erβ2则表达下调;中低浓度E2诱导arα上调,高浓度则使其下调,各浓度E2均使arβ下调。各浓度（50 ng/L、500 ng/L、5μg/L、50μg/L）双酚A均能使erα表达上调,而erβ2只在较高浓度（500 ng/L、5μg/L、50μg/L）上调,各浓度双酚A均使erβ2表达下调;此外,arα在较高浓度（50 ng/L、500 ng/L、5μg/L、50μg/L）表达上调,arβ仅在5μg/L浓度上调。3、通过对E2处理弓背青鳉仔鱼转录组分析,发现2μg/L的E2会对弓背青鳉仔鱼的氨基糖代谢、心肌功能、光转导、转录后剪接以及肾素-血管紧张素系统造成影响。通过选取E2诱导显着上调的差异基因卵黄蛋白原（vtg）和卵壳前体蛋白（chg）,并评估其对EEs的响应敏感度,结果显示,不同浓度（2μg/L、20μg/L和200μg/L）下雌二醇能诱导vtg和chg上调,然而两者对不同浓度（50 ng/L、500ng/L、5μg/L、50μg/L）双酚A响应有差异,在50 ng/L双酚A处理下chgHm显着上调,而chgH和chgL则在各浓度双酚A影响下表达下调;vtg1仅在500 ng/L浓度下上调,vtg2则在较高浓度（500 ng/L、5μg/L、50μg/L）上表达下调。chgHm相对chgH、chgL、vtg1和vtg2更适合作为EEs的环境监测生物标准物。研究结果,为阐明弓背青鳉雌、雄激素受体的功能与相关分子机制奠定了基础。同时为评估环境雌激素的潜在毒性风险,开发本地红树林EEs环境生物标志物提供可参考数据。
郜然然[10]（2019）在《补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制》文中研究表明实验一补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的实验研究目的:观察补肾养血活血中药复方新加苁蓉菟丝子丸（XJCRTSZW）经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的药物疗效。方法:1、从购进的100只健康雌性SD大鼠中筛选出动情周期正常的56只大鼠作为受试动物,随机抽取8只为正常对照组予蒸馏水灌胃,其余48只按照预实验结果,予雷公藤甲素（triptolide,TP）400μg/kg.d的剂量连续灌胃60d构建卵泡发育障碍模型。2、造模后大鼠随机分为6组,每组8只:Triptolide模型组、西药戊酸雌二醇+醋酸甲羟孕酮（EV+DMPA）组、XJCRTSZW低剂量组、XJCRTSZW高剂量组,抑制剂（NVP-BEZ235）组,XJCRTSZW高剂量+抑制剂（NVP-BEZ235）组。西药对照组给予戊酸雌二醇和醋酸甲羟孕酮序贯治疗;中药低、高剂量组分别给予新加苁蓉菟丝子丸低、高剂量浸膏治疗;抑制剂组予NVP-BEZ235灌胃;XJCRTSZW高剂量+抑制剂（NVP-BEZ235）组给予高剂量中药及NVP-BEZ235灌胃;正常对照组和TP模型组给予等量的蒸馏水灌胃。所有动物均灌胃2周,灌胃期间行阴道脱落细胞涂片检查观察大鼠动情周期变化。3、灌胃结束后采血,ELISA法检测血清E2、P、FSH、LH、AMH、ET水平,硝酸还原酶法检测NO水平并计算ET/NO比值;采血后处死大鼠,摘取双侧卵巢组织,称取卵巢湿重,计算卵巢指数;卵巢切片HE染色,光学显微镜下计数初级、次级卵泡、窦状卵泡、闭锁卵泡及黄体的数目,并测量窦状卵泡颗粒细胞层厚度;采用WB法检测卵巢组织中p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的蛋白含量。结果:1、新加苁蓉菟丝子丸对大鼠血清性激素的影响:与正常对照组相比,TP模型组大鼠血清中E2、P、AMH含量显着下降,FSH、LH含量显着增加（p<0.01）;而和模型组相比,XJCRTSZW给药后可增加E2、P、AMH含量,降低FSH、LH含量（p<0.01）,且XJCRTSZW高剂量组和西药组效果相当（p>0.05）,而使用通路抑制剂NVP-BEZ235后,XJCRTSZW高剂量组升高E2、P、AMH及降低FSH、LH的能力消失（p<0.01）。2、新加苁蓉菟丝子丸对大鼠血清中ET、NO及ET/NO的影响:与正常对照组相比,TP模型组大鼠血清中ET含量上升,NO含量下降,ET/NO比值显着升高（p<0.01）;而和TP模型组相比,XJCRTSZW给药后可增加NO含量,降低ET含量以及ET/NO比值（p<0.01）,且XJCRTSZW高剂量组与西药组效果相当（p>0.05）。而使用PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂NVP-BEZ235后,大鼠卵巢中NO含量所下降,ET含量及ET/NO值有所升高,但无统计学意义（p>0.05）,XJCRTSZW高剂量组对卵巢的保护能力出现了一定程度的消失。3、新加苁蓉菟丝子丸对大鼠卵巢湿重、卵巢指数的影响:与正常对照组相比,TP模型组大鼠卵巢湿重和卵巢指数显着下降（p<0.01）;而和TP模型组相比,XJCRTSZW给药后可一定程度上增加大鼠卵巢湿重和卵巢指数（p<0.01）,且XJCRTSZW高剂量组和西药组效果相当（p>0.05）。而使用PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂NVP-BEZ235后,XJCRTSZW高剂量组提升卵巢湿重和卵巢指数的能力消失（p<0.01）。4、新加苁蓉菟丝子丸对大鼠卵泡发育、黄体数及窦状卵泡颗粒细胞层厚度的影响:与正常对照组相比,TP模型组大鼠次级卵泡及窦状卵泡数量减少,黄体数和窦状卵泡颗粒细胞层的厚度降低（p<0.01）,闭锁卵泡数量上升（p<0.01）,而对初级卵泡数目无明显影响（p>0.05）;与TP模型组相比,XJCRTSZW给药后可一定程度上增加大鼠次级卵泡和窦状卵泡数,增加黄体数和窦状卵泡颗粒细胞层的厚度（p<0.01）,减少闭锁卵泡数（p<0.01）,且XJCRTSZW高剂量组和西药组效果相当（p>0.05）。而使用PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂NVP-BEZ235后,XJCRTSZW高剂量组的对卵泡发育的保护能力消失（p<0.01）。5、新加苁蓉菟丝子丸对大鼠卵巢组织中p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的影响:与正常对照组相比,TP模型组大鼠卵巢组织中p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的蛋白水平显着下降（p<0.05或p<0.01）,XJCRTSZW高剂量组可不同程度改善TP造模后对上述分子的影响（p<0.05或p<0.01）,而使用通路抑制剂NVP-BEZ235后,XJCRTSZW高剂量组上调上述分子的能力消失（p<0.05或p<0.01）。结论:雷公藤甲素400μg/kg.d连续灌胃60天,可成功构建大鼠卵泡发育障碍的在体动物模型,其分子机制可能是雷公藤甲素通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路中的关键蛋白p-PI3K、p-AKT、p-mTOR而对该通路进行了抑制。补肾养血活血中药复方新加苁蓉菟丝子丸可通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路改善大鼠的性激素水平,增加大鼠的卵巢湿重和卵巢指数,恢复大鼠的各级卵泡数、黄体数及生长卵泡的颗粒细胞层厚度,改善大鼠的“血瘀”状态,保护大鼠的卵泡发育,修复TP所致的卵巢损伤。实验二补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控卵巢颗粒细胞凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制目的:探讨补肾养血活血中药复方新加苁蓉菟丝子丸经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控大鼠卵巢颗粒细胞（GCs）凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制。方法:1、将体外培养的原代大鼠卵巢GCs分为9组:正常对照组、TP模型组、西药FSH组、XJCRTSZW低高剂量组、自噬诱导剂组、XJCRTSZW高剂量+自噬诱导剂组、凋亡诱导剂组、XJCRTSZW高剂量+凋亡诱导剂组。正常对照组给予蒸馏水灌胃的大鼠血清,其余8组先加TP诱导12h后,模型组给予蒸馏水灌胃的大鼠血清,西药FSH组加入含FSH大鼠血清,中药低、高剂量组分别加入相应剂量的大鼠含药血清,自噬、凋亡诱导剂组分别加入蒸馏水灌胃的大鼠血清及自噬、凋亡诱导剂,XJCRTSZW高剂量+自噬诱导剂组加入XJCRTSZW高剂量血清和自噬诱导剂RAPA,XJCRTSZW高剂量+凋亡诱导剂组加入XJCRTSZW高剂量血清和凋亡诱导剂CPT。2、上述药物及相应大鼠血清孵育48小时后做如下检测。CCK8法检测细胞活力,流式细胞术检测各组GCs的凋亡率,ELISA法检测细胞培养上清中E2、P和AMH水平,mRFP-GFP-LC3腺病毒转染后激光共聚焦显微镜下观察自噬流并计数自噬小体、自噬溶酶体数目,透射电子显微镜下观察各组GCs中的自噬小体及自噬溶酶体形成,WB及RT-qPCR法检测Caspase-3、Cleaved Casepase-3、LC3-II、LC3-I、Beclin-1、p62、LAMP2、Cathepsin-D及PI3K/AKT/mTOR信号通路轴相关分子的蛋白表达及mRNA水平,并计算LC3-II/LC3-I的比值。结果:1、新加苁蓉菟丝子丸对颗粒细胞增殖、凋亡的影响:（1）细胞活力检测:TP造模后,卵巢GCs的细胞活力显着下降（p<0.01）,说明TP对GCs的增殖存在明显抑制。XJCRTSZW高剂量血清组可显着提升GCs活力（p<0.05）。而加用CPT处理细胞后,XJCRTSZW高剂量血清组保护细胞活力的能力出现了明显消失（p<0.05或p<0.01）。说明XJCRTSZW正是通过抑制GCs的凋亡提升了细胞活力,促进了细胞增殖。（2）WB:TP造模后,凋亡相关分子Cleaved Caspase-3（CC3）蛋白表达显着上调（p<0.01）,但对Casepase-3无明显影响,XJCRTSZW高剂量组可明显改善TP造模后对CC3的影响（p<0.01）,而使用CPT后,XJCRTSZW高剂量组下调CC3蛋白表达的能力消失,说明中药通过下调凋亡因子CC3保护了GCs的增殖。（3）流式细胞术:TP造模后GCs凋亡率高达39.54%（仅次于加用了凋亡诱导剂的CPT组）,TP造模后,凋亡率显着上升（p<0.01）。XJCRTSZW高、低剂量组干预后,大鼠GCs凋亡率显着下降（p<0.01）,且XJCRTSZW高剂量组下降最为明显（凋亡率12.67%）,与西药FSH组效果无差异（p>0.05）。加用凋亡诱导剂CPT后,XJCRTSZW高剂量血清组降低细胞凋亡率、抑制细胞凋亡的能力消失（p<0.01）。2、新加苁蓉菟丝子丸对颗粒细胞自噬流的影响:（1）WB法和RT-qPCR法:TP造模后,自噬流相关分子LC3Ⅱ、Beclin1、LAMP2、Cathepsin-D的蛋白表达及mRNA水平显着上调,LC3-II/LC3-I比值上升（p<0.05或p<0.01）,p62的蛋白表达及mRNA水平显着下调（p<0.01）;XJCRTSZW高剂量组可显着下调LC3Ⅱ、Beclin1、LAMP2、Cathepsin-D的蛋白表达及mRNA水平（p<0.05或p<0.01）,上调p62的蛋白表达及mRNA水平（p<0.01）。而使用自噬诱导剂RAPA后,XJCRTSZW高剂量组保护GCs的能力消失。（2）电镜:和正常对照组相比,TP模型组大鼠卵巢GCs中自噬小体以及自噬溶酶体数量增加;和TP模型组相比,XJCRTSZW血清组大鼠卵巢颗粒细胞中自噬小体以及自噬溶酶体数量减少;而加用RAPA处理细胞后,XJCRTSZW高剂量组抑制自噬小体以及自噬溶酶体产生的能力下降。（3）mRFP-GFP-LC3腺病毒转染:TP造模后,大鼠卵巢GCs中自噬小体（黄色斑点）以及自噬溶酶体（红色斑点）数量显着增加（p<0.01）;和TP模型组相比,XJCRTSZW高、低剂量组大鼠卵巢颗粒细胞中自噬小体以及自噬溶酶体数量显着减少（p<0.01）,且XJCRTSZW高剂量组与西药FSH组无差异（p>0.05）。在加用自噬诱导剂RAPA处理细胞后,XJCRTSZW高剂量组抑制自噬小体以及自噬溶酶体产生的能力显着下降（p<0.01）。3、新加苁蓉菟丝子丸对大鼠卵巢颗粒细胞上清中E2、P、AMH分泌的影响:与正常对照组相比,TP模型组大鼠卵巢颗粒细胞上清中E2、P和AMH的含量显着下降（p<0.01）;和模型组相比,XJCRTSZW高剂量组大鼠卵巢GCs上清中E2、P和AMH的含量显着升高（p<0.01或p<0.05）,且XJCRTSZW高剂量组与FSH组效果相当（p>0.05）;在加用RAPA和CPT处理细胞后,XJCRTSZW高剂量组对E2、P、AMH含量的上调作用出现了一定程度的消失,但无统计学意义（p>0.05）。4、新加苁蓉菟丝子丸对大鼠卵巢颗粒细胞PI3K/AKT/mTOR信号通路轴相关分子的影响:通过WB检测我们发现,TP造模后,PI3K/AKT/mTOR通路轴相关蛋白PI3K、AKT、mTOR的磷酸化水平显着下降（p<0.05或p<0.01）;XJCRTSZW高剂量组可明显改善TP造模后对上述分子的影响（p<0.05或p<0.01）;而使用RAPA及CPT后,XJCRTSZW高剂量组的治疗能力消失（p<0.05或p<0.01）。结论:雷公藤甲素可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路一方面增加GCs凋亡率、上调凋亡相关分子Cleaved Caspase-3促进了GCs凋亡,另一方面增加GCs自噬小体和自噬溶酶体的数量,上调自噬相关因子LC3Ⅱ、Beclin1、LAMP2、Cathepsin-D并下调p62激活了GCs自噬流,从而损伤了大鼠卵巢GCs,抑制了卵泡发育。补肾养血活血中药复方新加苁蓉菟丝子丸可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路一方面降低GCs凋亡率、下调凋亡相关分子Cleaved Caspase-3抑制了GCs凋亡,另一方面减少GCs自噬小体和自噬溶酶体的数量,下调自噬相关因子LC3Ⅱ、Beclin1、LAMP2、Cathepsin-D并上调p62抑制了GCs自噬流的过度活化,从而修复了TP所致的大鼠卵巢GCs损伤,保护了大鼠卵泡发育,为卵泡发育障碍类疾病提供了防治新靶点,为雷公藤导致的卵巢损伤提供了新的可能的修复方案。
二、脑垂体Mallory染色的体会（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、脑垂体Mallory染色的体会（论文提纲范文）
（1）九味楮实颗粒对雌性中枢性性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.中医对性早熟疾病的认识 |
| 1.1 病名的探讨 |
| 1.2 病因病机的探讨 |
| 1.3 证型探讨 |
| 1.4 治法探讨 |
| 2.西医对性早熟的认识 |
| 2.1 性早熟的定义及分类 |
| 2.2 性早熟的影响因素 |
| 2.3 性早熟发病机制探讨 |
| 2.4 治疗现状及预防措施 |
| 2.5 性早熟与肥胖的研究 |
| 3.中枢性性早熟模型研究 |
| 3.1 促性腺激素类药诱导性早熟 |
| 3.2 神经递质类药诱导性早熟 |
| 3.3 环境内分泌干扰物诱导性早熟 |
| 3.4 光照诱导性早熟 |
| 4.九味楮实颗粒的相关研究 |
| 4.1 九味楮实颗粒的来源 |
| 4.2 九味楮实颗粒的提取及成形工艺 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验药物 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 仪器 |
| 1.4 试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 构建模型 |
| 2.2 给药 |
| 2.3 阴道细胞涂片染色 |
| 2.4 停止给药时间及处死时间 |
| 2.5 测体质量 |
| 2.6 子宫、卵巢病理切片及脏器系数 |
| 2.7 采用ELISA检测LH、FSH、E2 的水平 |
| 2.8 荧光定量PCR检测下丘脑KISS-1、Gn RHm RNA |
| 2.9 统计学方法 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 各组大鼠阴道口开放情况 |
| 3.2 两种阴道细胞涂片染色比较 |
| 3.2.1 美兰染色法 |
| 3.2.2 瑞氏染色法 |
| 3.3 体质量的变化 |
| 3.4 脏器系数比较 |
| 3.5 子宫壁内膜厚度及卵巢黄体数 |
| 3.6 乳腺病理切片 |
| 3.7 各组LH、FSH、E2 水平比较 |
| 3.8 各组下丘脑KISS-1、Gn RHm RNA相对表达水平 |
| 4.讨论 |
| 4.1 实验动物品种的选择及雌性CPP动物模型的建立 |
| 4.2 阳性对照药物的选择 |
| 4.3 结果分析 |
| 4.4 中医药治疗性早熟机制研究 |
| 4.5 小结 |
| 4.6 不足与展望 |
| 第三部分 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 综述:性早熟治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间公开发表的论文 |
| 致谢 |
（2）生长激素释放激素（GHRH）受体激动剂MR409对糖尿病肾病的保护效应（论文提纲范文）
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、文献综述 生长激素释放激素(GHRH)类似物及其在心血管和代谢性疾病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 二、在校期间科研成绩 |
| 三、致谢 |
| 四、个人简介 |
（3）Fas和TNF-α通路在皮质酮和CRH诱导小鼠输卵管上皮细胞凋亡过程中的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 应激 |
| 1.1.1 应激对雌性生殖系统的影响 |
| 1.1.2 应激相关激素 |
| 1.2 细胞凋亡 |
| 1.2.1 细胞凋亡的形态学 |
| 1.2.2 细胞凋亡的机制 |
| 1.2.3 细胞凋亡的途径 |
| 1.3 Fas/FasL系统 |
| 1.3.1 Fas/FasL分布 |
| 1.3.2 Fas/FasL系统诱导凋亡的机制 |
| 1.4 TNF-α/TNFR系统 |
| 1.4.1 TNF-α和 TNF受体超家族 |
| 1.4.2 TNF-α的蛋白结构 |
| 1.4.3 TNF-α的受体 |
| 1.4.4 TNF-α细胞信号 |
| 1.5 实验的目的及意义 |
| 2 材料方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 主要试剂及其配制 |
| 2.1.2 主要仪器设备 |
| 2.1.3 实验动物的饲养 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 小鼠输卵管上皮细胞的培养 |
| 2.2.2 输卵管上皮细胞中TNF-α的检测 |
| 2.2.3 输卵管上皮细胞中FasL的检测 |
| 2.2.4 输卵管上皮细胞siRNA转染 |
| 2.2.5 TNF-αsiRNA序列筛选 |
| 2.2.6 FasL siRNA序列筛选 |
| 2.2.7 PCR反应 |
| 2.2.8 流式细胞仪检测OECs凋亡 |
| 2.2.9 流式细胞仪检测siRNA转然后OECs凋亡 |
| 2.2.10 流式细胞仪检测C57及转基因小鼠OECs凋亡 |
| 2.3 数据统计 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 添加应激相关激素对体外培养OECs凋亡的影响 |
| 3.1.1 体外培养过程中添加CRH对 OECs凋亡相关基因表达的影响 |
| 3.1.2 体外培养过程中添加CORT对 OECs凋亡相关基因表达的影响 |
| 3.1.3 体外添加应激相关激素CRH和 Cort对 OECs凋亡比例的影响 |
| 3.2 体外培养OECs添加应激相关激素对TNF-α/FasL表达的影响 |
| 3.2.1 体外培养OECs添加CRH对 FasL表达的影响 |
| 3.2.2 体外培养OECs添加皮质酮对FasL表达的影响 |
| 3.2.3 体外培养OECs添加CRH对 TNF-α表达的影响 |
| 3.2.4 体外培养OECs添加皮质酮对TNF-α表达的影响 |
| 3.3 siRNA转染后添加应激相关激素对体外培养OECs凋亡情况的影响 |
| 3.3.1 siRNA序列的筛选 |
| 3.3.2 输卵管上皮细胞siRNA干涉FasL后添加CRH体外培养的凋亡情况 |
| 3.3.3 输卵管上皮细胞siRNA干涉FasL后添加皮质酮体外培养凋亡情况 |
| 3.3.4 输卵管上皮细胞siRNA干涉TNF-α后添加CRH体外培养凋亡情况 |
| 3.3.5 输卵管上皮细胞siRNA干涉TNF-α后添加皮质酮体外培养凋亡情况 |
| 3.3.6 输卵管上皮细胞siRNA干涉FasL和 TNF-α后添加CRH对凋亡比例的影响 |
| 3.3.7 输卵管上皮细胞siRNA干涉FasL和 TNF-α后添加Cort对凋亡比例的影响 |
| 3.4 使用基因敲除小鼠添加应激相关激素体外培养OECs的凋亡情况 |
| 3.4.1 体外添加应激相关激素CRH对基因敲除小鼠OECs凋亡比例的影响 |
| 3.4.2 体外添加应激相关激素Cort对基因敲除小鼠OECs凋亡比例的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 本实验使用的体外培养OECs模型的科学性 |
| 4.2 OECs细胞凋亡的诱因 |
| 4.3 CRH和Cort诱导OECs凋亡的死亡受体信号通路 |
| 4.4 OECs凋亡过程中死亡受体信号通路作用的验证 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
（4）低水平血清泌乳素与PCOS患者代谢紊乱和IVF-ET结局的关系及相关机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 第一章 低水平血清泌乳素与多囊卵巢综合征不孕患者代谢紊乱的相关性研究 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 结论 |
| 第二章 低水平血清泌乳素与多囊卵巢综合征不孕患者体外受精-胚胎移植治疗结局的相关性研究 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第三章 泌乳素及其受体介导的JAK2/STAT5通路对脂肪代谢的影响及机制研究 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.2 实验材料和方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 综述 泌乳素及其与代谢的关系 |
| 附录、附图表 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文目录 |
| 学位论文评阅及答辩情况 |
| English Paper 1 |
| English Paper 2 |
（5）miR-149-3p在垂体腺瘤细胞中的作用（论文提纲范文）
| 学位论文数据集 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 1. 绪论 |
| 1.1 MicroRNAs的概述 |
| 1.1.1 MicroRNAs的简介 |
| 1.1.2 MicroRNAs与癌症 |
| 1.1.3 miR-149与癌症 |
| 1.2 垂体腺瘤简介 |
| 1.3 AMPK信号通路 |
| 1.4 自噬与凋亡 |
| 1.5 PPP2R5A基因介绍 |
| 2. 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验细胞 |
| 2.1.3 实验材料 |
| 2.1.4 实验所需试剂的配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞传代及种板 |
| 2.2.2 细胞转染实验 |
| 2.2.3 RTCA细胞增殖实验 |
| 2.2.4 MTT法细胞增殖实验 |
| 2.2.5 细胞凋亡实验 |
| 2.2.6 提取RNA |
| 2.2.7 RNA逆转录 |
| 2.2.8 荧光定量PCR实验 |
| 2.2.9 提取总蛋白 |
| 2.2.10 蛋白浓度测定及蛋白样品配置 |
| 2.2.11 Western blot |
| 2.2.12 荧光素酶报告基因实验 |
| 2.2.13 质粒大提 |
| 2.2.14 MDC染色实验 |
| 2.2.15 PtfLC3双荧光实验 |
| 2.2.16 裸鼠皮下种植实验 |
| 3. 实验结果与讨论 |
| 3.1 miR-149~*促进大鼠脑垂体瘤细胞GH3的增殖 |
| 3.1.1 miR-149~*诱导GH3细胞增殖 |
| 3.1.2 miR-149~*促进增殖相关基因的表达 |
| 3.2 miR-149~*抑制大鼠脑垂体瘤GH3细胞的凋亡 |
| 3.2.1 miR-149~*抑制GH3细胞的凋亡 |
| 3.2.2 miR-149~*调控凋亡相关基因的表达 |
| 3.2.3 miR-149~*抑制凋亡相关蛋白的表达 |
| 3.3 miR-149~*通过AMPK信号通路促进大鼠脑垂体瘤GH3细胞的增殖 |
| 3.3.1 miR-149~*诱导AMPK的磷酸化 |
| 3.3.2 阻断AMPK信号通路减弱了miR-149~*的促增殖作用 |
| 3.4 miR-149~*影响GH3细胞的自噬流 |
| 3.4.1 miR-149~*促进GH3细胞中自噬体的积累 |
| 3.4.2 miR-149~*诱导自噬相关蛋白的表达 |
| 3.4.3 miR-149~*抑制了GH3细胞中自噬流 |
| 3.4.4 抑制自噬部分减弱了miR-149~*对GH3细胞增殖的影响 |
| 3.4.5 抑制自噬部分减弱了miR-149~*对GH3细胞凋亡的影响 |
| 3.5 miR-149~*的靶点为PPP2R5A |
| 3.5.1 miR-149~*靶向PPP2R5A的3'-UTR区 |
| 3.5.2 miR-149~*抑制PPP2R5A蛋白的表达 |
| 3.5.3 PPP2R5A过表达消除了miR-149~*的生物学功能 |
| 3.6 miR-149~*在体内促进GH3细胞的肿瘤形成 |
| 3.6.1 miR-149~*在体内促进了由GH3细胞诱导的皮下肿瘤形成 |
| 3.6.2 miR-149~*调控成瘤小鼠皮下肿瘤中癌症基因的表达 |
| 4. 结论与展望 |
| 4.1 创新点 |
| 4.2 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者与导师简介 |
| 附件 |
（6）海藻玉壶汤特定剂量条件下的反药组合加减抗甲状腺肿的作用及机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 海藻反甘草的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 海藻玉壶汤中化学成分及药理作用研究概况 |
| 参考文献 |
| 综述三 海藻玉壶汤治疗甲状腺肿大的实验研究进展 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一节 海藻甘草反药组合加减应用对海藻玉壶汤中5种活性成分溶出含量的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二节 海藻玉壶汤中海藻甘草反药组合加减对甲状腺肿大大鼠甲状腺形态的影响 |
| 实验一 甲状腺肿大大鼠模型的复制 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二 海藻玉壶汤中海藻甘草反药组合加减对甲状腺肿大大鼠体征、甲状腺系数的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三 海藻玉壶汤中海藻甘草反药组合加减对甲状腺肿大大鼠甲状腺组织病理形态的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三节 基于下丘脑-垂体-甲状腺轴探讨海藻玉壶汤中海藻甘草反药组合加减对甲状腺肿大模型大鼠的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第四节 基于凋亡信号通路探讨海藻玉壶汤中海藻甘草反药组合加减对甲状腺肿大模型大鼠细胞凋亡的影响 |
| 实验一 电镜下观察甲状腺肿大模型大鼠细胞凋亡 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二 TUNEL染色法计算凋亡指数 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三 海藻玉壶汤中海藻甘草反药组合加减对大鼠甲状腺Caspase8、Caspase9蛋白表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验四 海藻玉壶汤中海藻甘草反药组合加减对大鼠甲状腺Fas、Bc1-2 mRNA表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 在校期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（7）曾庆琪教授辨治男性不育症的学术思想及润精汤治疗少弱精子症的临床和实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 中医药治疗少弱精子症的研究进展 |
| 1 病因病机 |
| 2 辨证施治 |
| 2.1 名家经验 |
| 2.2 辨精论治 |
| 3 临床研究 |
| 3.1 专病专方 |
| 3.2 中成药 |
| 3.3 针灸及物理治疗 |
| 3.4 中西医结合治疗 |
| 3.5 综合治疗 |
| 4 实验研究 |
| 4.1 降低生殖细胞凋亡 |
| 4.2 改变Catsper通道 |
| 4.3 抗氧化应激损伤 |
| 4.4 调节生殖性腺轴,改善生殖内分泌功能 |
| 4.5 改善睾丸微循环 |
| 4.6 改善附属性腺的分泌功能 |
| 5 结语 |
| 参考文献 |
| 第二部分 曾庆琪教授辨治男性不育症学术思想 |
| 1 病因病机 |
| 2 辨病论治 |
| 2.1 特发性不育症 |
| 2.2 精液不液化 |
| 2.3 感染性不育症 |
| 2.4 免疫性不育 |
| 2.5 精索静脉曲张性不育症 |
| 2.6 其他原因引起不育症 |
| 3 用药规律 |
| 3.1 用药特点 |
| 3.2 常用效验对药、角药 |
| 4 预防调护 |
| 4.1 三步四法、助孕有道 |
| 4.2 生活指导、综合治疗 |
| 5 结语 |
| 参考文献 |
| 第三部分 润精汤治疗特发性少弱精子症的临床研究 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 临床来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 脱落标准 |
| 1.6 剔除标准 |
| 1.7 终止标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 试验方法 |
| 2.2 给药方案 |
| 2.3 治疗方法 |
| 2.4 注意事项 |
| 2.5 观察指标 |
| 2.6 疗效评价 |
| 2.7 统计学方法 |
| 2.8 设计路线图 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 一般资料分析 |
| 3.2 精液参数比较 |
| 3.3 血清性激素水平比较 |
| 3.4 中医症状评分比较 |
| 3.5 临床疗效比较 |
| 3.6 安全性观察 |
| 3.7 不良反应比较 |
| 4 讨论 |
| 4.1 润精汤组方思路 |
| 4.2 润精汤单味药的分析和现代药理研究 |
| 4.3 还少胶囊作为阳性对照药物的选择依据 |
| 4.4 润精汤对特发性少弱精子症的临床疗效探讨 |
| 5 结语 |
| 参考文献 |
| 第四部分 润精汤对奥硝唑诱导的少弱精子症大鼠的实验研究 |
| 1 前言 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验药物 |
| 2.3 实验试剂 |
| 2.4 主要试剂的配制 |
| 2.5 实验仪器及耗材 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 分组与给药 |
| 3.2 实验取材 |
| 3.3 实验内容 |
| 3.4 统计方法 |
| 3.5 技术路线图 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 精液参数比较 |
| 4.2 血清性激素水平比较 |
| 4.3 睾丸组织病理形态比较 |
| 4.4 睾丸组织细胞凋亡比较 |
| 4.5 睾丸组织波形蛋白表达比较 |
| 4.6 睾丸组织ERK信号通路比较 |
| 5 讨论 |
| 5.1 奥硝唑诱导少弱精子症模型的建立 |
| 5.2 润精汤改善奥硝唑诱导的生精障碍型SD雄性大鼠生精功能的作用机制 |
| 6 结语 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 附录 |
| 附录1 润精汤治疗特发性少弱精子症临床观察表 |
| 附录2 润精汤治疗特发性少弱精子症中医症状评分表 |
| 附录3 润精汤治疗特发性少弱精子症患者知情同意书 |
| 附录4 常用英文缩略表 |
| 攻读博士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（8）无功能型垂体腺瘤的miRNA表达及“垂宁方”对其内源性差异miRNA作用机制的探索（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 对无功能型垂体腺瘤差异性miRNA表达的探索 |
| 1、研究对象 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.2.1 西医诊断标准 |
| 1.2.2 中医学诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除、终止和脱落标准 |
| 2、研究方法 |
| 2.1 试验分组 |
| 2.2 治疗方案 |
| 2.3 差异性miRNA表达的获取 |
| 2.4 研究内容 |
| 2.5 观察指标 |
| 2.6 安全性指标 |
| 2.7 伦理审查 |
| 2.8 统计分析 |
| 2.9 技术路线图 |
| 3、研究结果 |
| 3.1 一般资料分析: |
| 3.2 治疗前无功能型垂体腺瘤受试者与健康人miRNA△CT水平对比 |
| 4、分析与讨论 |
| 4.1 垂体瘤发病机制的研究进展 |
| 4.2 miRNA的研究进展 |
| 4.3 miRNA与肿瘤 |
| 4.4 miRNA与垂体瘤 |
| 4.5 4个差异性miRNA的相关研究进展:miR-26b、miR-138、miR-206、miR-let-7 家族 |
| 4.5.1 miR-26b的研究进展 |
| 4.5.2 miR-138的研究进展 |
| 4.5.3 miR-206的研究进展 |
| 4.5.4 miR-let-7 家族的研究进展 |
| 第二部分 “垂宁方”对其内源性差异miRNA作用机制的探索 |
| 1、研究对象 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.2.1 西医诊断标准 |
| 1.2.2 中医学诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除、终止和脱落标准 |
| 2、研究方法 |
| 2.1 试验分组 |
| 2.2 治疗方案 |
| 2.3 差异性miRNA表达的获取 |
| 2.4 研究内容 |
| 2.5 观察指标 |
| 2.6 西医疗效评价标准 |
| 2.7 中医疗效评价标准 |
| 2.8 安全性指标 |
| 2.9 伦理审查 |
| 2.10 统计分析 |
| 2.11 技术路线图 |
| 3、研究结果 |
| 3.1 一般资料分析 |
| 3.2 无功能型垂体腺瘤受试者治疗前后miRNA△CT水平对比 |
| 3.3 治疗后无功能型垂体腺瘤受试者与健康人miRNA△CT水平对比 |
| 3.4 临床疗效评价 |
| 4、讨论与分析 |
| 4.1 垂体瘤的中医概述 |
| 4.2 垂体瘤的中医药治疗进展 |
| 4.3 “垂宁方”与无功能型垂体腺瘤 |
| 4.4 “垂宁方”与miRNA调节 |
| 4.5 临床医案两则 |
| 创新点 |
| 结论与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1、文献综述 垂体瘤的中西医治疗进展 |
| 参考文献 |
| 2、研究生期间发表文章 |
| 3、CRF |
（9）弓背青鳉雌、雄激素受体基因对雌激素响应及雌二醇处理转录组分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 环境雌激素研究现状 |
| 1.1.1 环境雌激素的研究概述 |
| 1.1.2 双酚A的研究概述 |
| 1.1.3 环境雌激素生物标记物 |
| 1.2 雌激素ER和雄激素受体AR的研究进展 |
| 1.2.1 核受体的概述 |
| 1.2.2 雌激素受体和雄激素受体的概述 |
| 1.3 实时荧光定量RT-qPCR内参基因筛选 |
| 1.4 弓背青鳉(Oryzias curvinotus)的研究进展 |
| 1.5 选题目的与意义 |
| 2 弓背青鳉RT-qPCR内参基因筛选 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料与试剂 |
| 2.1.2 总RNA提取和第一链cDNA合成 |
| 2.1.3 引物设计及扩增 |
| 2.1.4 RT-qPCR及统计分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 管家基因引物检验及cDNA和DNA扩增产物比较 |
| 2.2.2 管家基因标准曲线绘制 |
| 2.2.3 管家基因表达稳定性分析 |
| 2.3 讨论 |
| 3 弓背青鳉雌、雄激素受体基因的克隆及表达分析 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料与试剂 |
| 3.1.2 总RNA提取和第一链cDNA合成 |
| 3.1.3 序列克隆及生物信息学分析 |
| 3.1.4 RT-qPCR表达分析 |
| 3.1.5 组织切片原位杂交 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 序列分析 |
| 3.2.2 核受体超家族基因编码氨基酸系统进化分析 |
| 3.2.3 er、ar定量引物标准曲线绘制 |
| 3.2.4 组织与胚胎发育的表达特性分析 |
| 3.2.5 环境雌激素对弓背青鳉仔鱼er和 ar表达影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 序列特征及系统进化树分析 |
| 3.3.2 表达特征分析 |
| 3.3.3 环境雌激素处理影响 |
| 4 弓背青鳉幼鱼E_2处理转录组分析 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 测序文库构建、数据分析及验证 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 转录本长度分析 |
| 4.2.2 基因的功能注释 |
| 4.2.3 功能基因GO分类 |
| 4.2.4 功能基因KEGG分类 |
| 4.2.5 差异基因比较及筛选 |
| 4.2.6 差异表达基因KEGG分类 |
| 4.2.7 RT-qPCR验证结果 |
| 4.2.8 弓背青鳉仔鱼chg、vtg对环境雌激素处理响应 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 转录组测序分析 |
| 4.3.2 功能注释分析 |
| 4.3.3 E_2对vtg、chg表达影响及环境雌激素分子标记物筛选 |
| 5 结论 |
| 6 研究展望 |
| 参考文献 |
| 附录Ⅰ |
| 附录Ⅱ |
| 附录Ⅲ |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（10）补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.卵泡发育障碍类疾病的研究进展 |
| 1.1 西医认识及研究进展 |
| 1.2 中医认识及研究进展 |
| 2.卵泡发育障碍相关分子机制研究进展 |
| 2.1 细胞凋亡、自噬与卵泡发育、闭锁相关性研究 |
| 2.2 中医药经PI3K/AKT/mTOR通路调控细胞凋亡与自噬 |
| 3.导师对卵巢功能低下与卵泡发育障碍类疾病的认识 |
| 3.1 病因病机 |
| 3.2 诊治经验 |
| 第二部分 实验研究 |
| 本课题研究基础及创新性 |
| 1.课题基础 |
| 2.课题创新点 |
| 实验一 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的实验研究 |
| 1.技术路线 |
| 2.实验材料 |
| 2.1 实验动物及实验条件 |
| 2.2 主要药物、试剂及仪器 |
| 3.实验方法 |
| 3.1 实验模型的构建 |
| 3.2 实验分组情况及给药方法 |
| 3.3 检测指标与方法 |
| 4.统计分析 |
| 5.实验结果 |
| 5.1 XJCRTSZW对大鼠一般情况的影响 |
| 5.2 XJCRTSZW对大鼠血清中性激素的影响 |
| 5.3 XJCRTSZW对大鼠血清中ET、NO及ET/NO的影响 |
| 5.4 XJCRTSZW对大鼠卵巢湿重、卵巢指数及卵巢组织的影响 |
| 5.5 XJCRTSZW对大鼠卵巢组织p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的影响 |
| 6.讨论 |
| 6.1 补肾养血活血法对于卵泡发育障碍类疾病的干预 |
| 6.2 雷公藤甲素造模 |
| 6.3 阳性药物的选择 |
| 6.4 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路促卵泡发育修复卵巢损伤的结果分析 |
| 7.结论 |
| 实验二 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控颗粒细胞凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制 |
| 1.技术路线 |
| 2.实验材料 |
| 2.1 实验动物及实验条件 |
| 2.2 主要药物、试剂及仪器 |
| 3.实验方法 |
| 3.1 大鼠含药血清制备 |
| 3.2 大鼠原代颗粒细胞的提取与培养 |
| 3.3 体外培养大鼠卵巢颗粒细胞鉴定 |
| 3.4 含药血清培养颗粒细胞分组、TP诱导及其他受试药物的添加 |
| 3.5 检测指标与方法 |
| 4.统计分析 |
| 5.实验结果 |
| 5.1 体外培养大鼠卵巢颗粒细胞形态学观察 |
| 5.2 大鼠卵巢颗粒细胞的鉴定 |
| 5.3 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞活力的影响 |
| 5.4 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率的影响 |
| 5.5 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞上清中性激素分泌的影响 |
| 5.6 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞自噬流的影响 |
| 5.7 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞自噬小体、自噬溶酶体形成的影响 |
| 5.8 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及自噬流相关因子蛋白表达水平的影响 |
| 5.9 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞中凋亡及自噬流相关因子的mRNA相对表达量的影响 |
| 5.10 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达的的影响 |
| 5.11 XJCRTSZW对大鼠卵巢颗粒细胞PI3K/AKT/mTOR信号通路轴相关分子mRNA相对表达量的影响 |
| 6.讨论 |
| 6.1 颗粒细胞被选为研究对象的原因 |
| 6.2 阳性对照药的选择 |
| 6.3 自噬诱导剂与凋亡诱导剂的选择 |
| 6.4 自噬流的检测 |
| 6.5 补肾中药通过细胞信号转导通路调节卵泡发育 |
| 6.6 调控细胞凋亡与自噬是中医药发挥药理作用的重要分子机制 |
| 6.7 补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控颗粒细胞凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制 |
| 7.结论 |
| 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附件 |
| 附件一 综述 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 附件二 在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
四、脑垂体Mallory染色的体会（论文参考文献）
- [1]九味楮实颗粒对雌性中枢性性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴影响的实验研究[D]. 黄艳霞. 湖北中医药大学, 2021(09)
- [2]生长激素释放激素（GHRH）受体激动剂MR409对糖尿病肾病的保护效应[D]. 唐琪. 沈阳医学院, 2021(09)
- [3]Fas和TNF-α通路在皮质酮和CRH诱导小鼠输卵管上皮细胞凋亡过程中的作用研究[D]. 赵英淇. 山东农业大学, 2020(02)
- [4]低水平血清泌乳素与PCOS患者代谢紊乱和IVF-ET结局的关系及相关机制研究[D]. 杨海燕. 山东大学, 2020(04)
- [5]miR-149-3p在垂体腺瘤细胞中的作用[D]. 李美虹. 北京化工大学, 2020(02)
- [6]海藻玉壶汤特定剂量条件下的反药组合加减抗甲状腺肿的作用及机制[D]. 吕艳敏. 北京中医药大学, 2020
- [7]曾庆琪教授辨治男性不育症的学术思想及润精汤治疗少弱精子症的临床和实验研究[D]. 杨凯. 南京中医药大学, 2020
- [8]无功能型垂体腺瘤的miRNA表达及“垂宁方”对其内源性差异miRNA作用机制的探索[D]. 汪莹. 上海中医药大学, 2019(03)
- [9]弓背青鳉雌、雄激素受体基因对雌激素响应及雌二醇处理转录组分析[D]. 黄顺楷. 广东海洋大学, 2019(07)
- [10]补肾养血活血法经PI3K/AKT/mTOR信号通路调控凋亡及自噬流促卵泡发育的分子机制[D]. 郜然然. 成都中医药大学, 2019(04)