一、鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗免疫持续期的研究（论文文献综述）
田丽娜[1]（2021）在《高致病性禽流感疫苗免疫程序优化及临床应用》文中提出禽流感（Avian influenza,AI）,尤其是高致病性禽流感是由禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）感染所引发的一种高度接触性烈性传染病。禽流感在世界范围内广泛传播,不仅能够感染鸡、鸭、鹅、雁等禽类,而且能够感染猪、马以及人类,甚至造成感染者死亡,控制禽流感已经成为人类公共卫生事业的一个共同的艰巨任务。目前世界各国防控高致病性禽流感有两种不同的策略,一种是以扑杀为主,严格控制疫苗的使用或完全不支持疫苗免疫;另一种观点是采取疫苗免疫和扑杀相结合的策略,我国采取的是疫苗免疫结合扑杀的策略。自2004年使用H5亚型高致病性禽流感疫苗进行强制免疫后,我国的禽流感疫情得到很好的控制。但是,2013年以来H7N9亚型禽流感的发生给我国养禽业发展和人类健康带来极大的危害,尤其是2016年底H7N9亚型禽流感变异为高致病性,给养殖场造成了巨大的损失。重组禽流感（H5+H7）二价灭活疫苗的研制和应用,对防控我国H5、H7亚型禽流感的发生和流行发挥了重要作用。然而,由于养殖场疫苗选择不当、免疫程序制定不合理等因素,禽流感仍时有发生。针对这些问题,本研究在现地禽流感流行病学调查基础上,选择重组禽流感（H5+H7）二价灭活疫苗、禽流感-新城疫重组二联活疫苗为候选疫苗,开展了禽流感疫苗现地免疫效果评价、免疫程序优化和应用的研究。主要研究内容和结果如下:（1）在禽流感的病原学调查中,对2015-2017年东北三省10个养殖场、重点散养户和部分活禽交易市场采集到的鸡喉腔和泄殖腔棉拭子以及疑似禽流感鸡组织脏器进行病原检测。2216份样品H5亚型荧光定量RT-PCR检测均为阴性,3041份样品H7亚型检出2份阳性样本,2661份样品H9亚型检出12份阳性样本。对检测到的2株H7亚型AIV阳性样本序列测定及分析发现,这2株H7亚型AIV的HA基因裂解位点具有-ARTAR*G-序列,具有NST/NVT/NSS/NGS等潜在糖基化位点;NA基因与达菲耐药相关位点和内部基因中PB2、NS、M和PA等基因的毒力和耐药性相关基因序列均未发生突变,其结果符合高致病性AIV特征。（2）现地禽流感疫苗免疫程序调查和抗体水平监测显示,本实验监测的10家养殖场只使用了灭活疫苗免疫,开产前进行4次免疫,分别是15、45、70和110日龄左右,开产后每隔3个月灭活疫苗免疫1次。禽流感抗体水平监测表明,H5、H7和H9亚型禽流感抗体检测合格率分别为90.31%-97.72%,90.97%-96.48%和81.51%-97.88%,均达到《动物疫病免疫监测方案》要求的免疫合格率。结合国家禽流感的监测数据,在免疫次数较多且免疫抗体合格率较高的情况下,各亚型禽流感仍然有零星散发,说明现地生产中的免疫仍然存在漏洞。（3）禽流感免疫评价指标的对比分析,根据10个养殖场禽流感免疫抗体监测的数据,对比分析了鸡群禽流感免疫状况的抗体水平、离散度和界差率（Q）之间的关系。根据国家禽流感免疫标准,免疫抗体大于4log2时判定为合格,群体抗体合格率大于70%时为群体免疫合格,离散度<20%判定为合格。这两项指标虽然能够在一定程度上反映鸡群的免疫水平,但存在一定的误差,而界差率（Q）对于指导现地生产更有意义。当Q≥50%时,禽群健康状态相对稳定,对蛋鸡而言,当Q≥100%时,不仅鸡群健康状态稳定,且对产蛋影响相比较小,即使由于某种因素导致的产蛋下降,其恢复也较快;而当Q<50%时,禽群健康状态极不稳定,提示应及时进行相应疫苗免疫。界差率的评价指标与其他指标相比能比较全面的反映鸡群免疫水平及在该免疫水平下鸡群整体健康状态,对适时掌握鸡群禽流感免疫状态和免疫时机意义重大。（4）禽流感疫苗免疫程序优化,主要包括疫苗免疫次数、首免日龄和疫苗联合应用的优化。结果表明,在免疫次数方面,灭活疫苗在蛋鸡开产前免疫3次效果最优;在首免日龄方面,禽流感-新城疫重组二联活疫苗在7、10和14日龄差异不明显,但结合新城疫的免疫程序,禽流感-新城疫重组二联活疫苗的最佳免疫日龄是7日龄,重组AIV（H5+H7）二价灭活疫苗的最优首免日龄是10日龄;联合免疫实验中,发现前期的免疫中,先使用禽流感-新城疫重组二联活疫苗再使用灭活疫苗的免疫效果优于先用灭活疫苗再用禽流感-新城疫重组二联活疫苗加强免疫,产蛋期分别使用禽流感-新城疫重组二联活疫苗和灭活疫苗加强免疫,抗体水平差异不大,但产蛋期合理使用禽流感-新城疫重组二联活疫苗可以减轻疫苗免疫对鸡群产蛋率的影响。（5）将优化后的禽流感疫苗免疫程序应用于临床,普遍采用灭活疫苗在10日龄首免,40日龄二免,110日龄第三次免疫后监测结果表明,蛋鸡开产前3次免疫能获得较高的抗体水平。蛋鸡开产后无论使用灭活疫苗免疫还是禽流感-新城疫重组二联活疫苗免疫均能起到有效的加强免疫效果,抗体合格率为100%,抗体离散度<20%,界差率≥100%,鸡群健康状态稳定,生产性能良好,但禽流感-新城疫重组二联活疫苗免疫对产蛋率的影响小于灭活疫苗,推荐产蛋高峰时使用禽流感-新城疫重组二联活疫苗免疫。总之,本文通过禽流感的流行病学调查、免疫程序调查和抗体水平监测,发现了疫苗现地使用中存在的问题。采用鸡群体禽流感免疫评价指标的对比分析、疫苗质量的检测、现地疫苗免疫效果评价等优化了禽流感疫苗的免疫程序,应用后取得了很好的效果。这将为养殖场制定科学合理的禽流感疫苗免疫程序,确保疫苗在现地中的免疫效果提供科学的指导。
包媛玲[2]（2021）在《B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗制备及免疫效力评价》文中指出禽偏肺病毒病是由禽偏肺病毒（Avian metapneumovirus,aMPV）引起的鸡或火鸡的一种急性上呼吸道病,该病在世界范围内广泛流行。血清学调查结果显示,我国部分鸡群的aMPV血清阳性率高达100%,病原学检测结果显示,我国鸡群中的流行毒株以B亚型aMPV为主。aMPV单一感染时,死亡率不高,但易造成其他病原的继发感染。若出现其他细菌或病毒的继发感染,死亡率可高达25%～40%。aMPV感染能够造成肉鸡的肿头综合征以及蛋鸡产蛋量和蛋品质的下降,造成巨大的经济损失,严重影响家禽养殖业的健康发展。国外主要通过疫苗免疫来防控禽偏肺病毒病,而我国目前还没有用于该病防控的疫苗。本研究以实验室前期从我国鸡群分离的aMPV/B LN16株为基础,研制了B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗,并对其安全性和免疫保护效力进行了系统评估。我们将B亚型aMPV LN16株在Vero细胞上连续传代至15代,并对不同代次的病毒进行了半数组织培养感染量测定、纯净性检验及免疫原性比较。根据免疫效力实验结果,我们以B亚型aMPV LN16株11代毒（LN16-I株）作为免疫原,通过灭活条件及乳化工艺的筛选,研制了B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗。单剂量、单剂量重复及大剂量免疫实验结果显示,该灭活疫苗具有良好的安全性,免疫后无不良反应且注射部位无炎症反应。SPF鸡免疫实验结果表明,该疫苗能够诱导机体产生高滴度的抗体,促进PBMC中B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖以及脾脏IL-4和IFN-γ细胞因子的分泌,同时对B亚型aMPV强毒攻击提供80.0%以上的免疫保护,并显着降低鼻腔拭子中的病毒载量,避免强毒攻击后鼻甲的病理损伤。攻毒保护实验结果表明,该灭活疫苗3周龄单次免疫的保护率为77.8%;3周龄首免,6周龄加强免疫的保护率为100.0%。因此,我们将免疫程序设定为3周龄初次免疫,6周龄加强免疫。最小免疫剂量实验结果表明,该灭活疫苗以不低于0.25 m L/只的剂量免疫SPF鸡,加强免疫3周后可提供87.5%以上的免疫保护,因此将最小免疫剂量定为0.25 m L/只,为保证临床免疫保护效果,推荐免疫剂量为0.50 m L/只。免疫持续期实验结果表明,该灭活疫苗加强免疫后2、3、4、5、6个月攻毒,保护率分别为100.0%、90.0%、100.0%、90.0%和88.9%,初步确定该疫苗的免疫持续期为6个月。此外,该灭活疫苗对大日龄（17周龄）SPF鸡能够提供100.0%的保护。进一步评价了该灭活疫苗对商品蛋鸡和商品肉鸡的免疫保护效果。致病性实验结果表明,B亚型aMPV LN16强毒株对商品蛋鸡及商品肉鸡具有显着的致病性:商品蛋鸡及商品肉鸡在感染后出现流鼻涕以及鼻痂等症状,发病率分别为92.3%及100.0%;鼻腔拭子、鼻甲、喉头、气管以及哈德氏腺中可检测到病毒;感染后9 d可造成商品蛋鸡和商品肉鸡的鼻甲、气管及肺脏出现不同程度的病理损伤。该灭活疫苗加强免疫后,能够诱导商品蛋鸡及商品肉鸡产生高滴度的血清抗体。加强免疫后3周用B亚型aMPV LN16强毒攻击,该疫苗能够显着降低鼻腔拭子中的病毒载量并减轻强毒攻击后呼吸器官的病理损伤,免疫组商品蛋鸡及商品肉鸡的保护率分别为100.0%及88.9%。本研究研制了禽偏肺病毒（B亚型）灭活疫苗,并证实其具有良好的安全性及免疫原性,该疫苗能对SPF鸡、商品蛋鸡及商品肉鸡提供良好的免疫保护。这些研究结果为我国禽偏肺病毒病的有效防控提供了技术支撑。
项瑞[3]（2021）在《鸡新城疫、禽流感、传染性法氏囊病毒重组蛋白的免疫保护效果研究》文中研究指明新城疫、禽流感以及鸡传染性法氏囊病是具有高度传染性的疾病,对多种家禽和野生鸟类均有不同程度的影响,对商品鸡和散养鸡农户都造成了巨大的损失。使用疫苗是控制这些疾病的最主要方法。目前临床上主要使用新流法灭活疫苗进行免疫防控,根据临床调查发生,疫苗免疫,存在免疫效率低,需反复接种等问题。本实验利用实验室已制备鉴定的新城疫重组蛋白（HN、NP、M、F）;禽流感重组蛋白（HA、NA、M1）。同时构建传染性法氏囊VP2蛋白的表达载体p RSFduet1-sumo-VP2（BC6/85）并在大肠杆菌系统中表达,为验证重组蛋白的免疫保护效果,首先分别使用新城疫、禽流感和VP2重组蛋白进行预实验,验证其免疫原性。根据试验结果再制备三联抗原液,检测鸡群免疫后的血清抗体水平。在免疫后第四周,使用新城疫SZ株、传染性法氏囊BC6/85株分别攻毒两组鸡群,本论文的主要研究结果如下。1.传染性法氏囊VP2蛋白的表达及检验将扩增的VP2基因克隆至p RSFduet1-sumo载体,获得p RSFduet1-sumo-VP2重组质粒。经过测序鉴定后,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达VP2蛋白。并利用亲和层析镍柱纯化VP2蛋白,最后切割sumo标签。将重组蛋白产物经SDS-PAGE分析,获得目的蛋白条带。经Western-blotting进一步鉴定,VP2蛋白与IBDV阳性血清具有较好的反应性。经双向琼脂扩散实验测得VP2蛋白的AGP效价为1:64。经血凝试验测得NDV重组蛋白的血凝效价为26,AIV重组蛋白产生的血凝效价为29。2.重组蛋白的免疫原性实验先将表达的VP2蛋白与本实验室保存的新城疫、禽流感重组蛋白分别与白油佐剂进行乳化制备抗原液,分别免疫30日龄SPF鸡。再将三种蛋白共同乳化制备抗原液,共同免疫鸡群。在免疫后第14天、21天、28天进行采血分离血清,利用血凝抑制实验和双向琼脂扩散实验测定抗体效价。结果表明:免疫新城疫重组蛋白的鸡群HI效价为3.4log2;免疫禽流感重组蛋白的鸡群HI效价为7.9log2;VP2蛋白免疫组在第4周抗体达到高峰,最高AGP效价为1:128。免疫4周后,100%的鸡群获得有效免疫。三联抗原液免疫实验中,80%的鸡群产生对新城疫的抗体;90%鸡群产生对禽流感的抗体;100%的鸡群产生对传染性法氏囊的抗体。3.新城疫及传染性法氏囊的攻毒实验三联重组蛋白免疫鸡群后28天分别皮下注射新城疫SZ株20μL(含105.0EID50);传染性法氏囊BC6/85株0.2 m L（病毒含量大于100BID-法氏囊感染剂量）进行攻毒实验。结果表明:NDV重组蛋白保护率为90%,IBDV VP2保护率为70%。小结:本研究成功表达了传染性法氏囊VP2蛋白,同时制备了新城疫（基因Ⅶ型）、禽流感（H9亚型）、传染性法氏囊（BC6/85株）三联抗原液,动物试验表明其具有良好免疫保护效果,为后续新流法基因工程亚单位疫苗的研发提供了材料和数据支撑。
孟令宅,庞洪泽,赵卓,赵款,袁万哲[4]（2021）在《新城疫疫苗研究现状》文中认为新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起的禽类的一种急性烈性传染病,严重危害养禽业的发展。在疫苗接种免疫压力下,NDV演化出不同的基因型,且各基因型毒株之间不能较好地提供交叉保护,导致临床上多见非典型新城疫与高抗体家禽发生NDV感染。目前,疫苗免疫仍是预防该病的重要措施,随着其病原学与分子生物学技术的发展,研究者研发了不同类型的ND疫苗。论文就新城疫病毒的病原分子特征、传统疫苗及新型基因工程疫苗的研究现状及发展前景进行综述,旨在为我国新城疫的防控及新城疫疫苗的研发提供一定的参考。
冯二凯,程悦宁,易立,王振军,罗国良,郭利,任飞,尹茉莉,陈立志,程世鹏[5]（2021）在《水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗（CDV3-CL株，悬浮培养）保存期试验》文中进行了进一步梳理为了探讨不同保存条件和保存期对新研制犬瘟热疫苗病毒滴度和免疫效力的影响,将3批疫苗分别置于2～8℃和-20℃保存,并随机取样进行质量、安全和免疫效力检验。结果表明:疫苗在2～8℃条件下保存6个月TCID50没有明显变化,9～12个月内下降0.3～0.5滴度;-20℃保存12个月没有显着变化,15个月内下降0.1滴度左右;疫苗能诱导产生高免疫保护水平的抗体,确定疫苗保存期2～8℃和-20℃分别为6个月和12个月;保存期内的疫苗的物理性状、无菌、支原体、外源病毒等检验均符合《中国兽药典》的要求。
邓智昕,欧建安[6]（2020）在《副鸡嗜血杆菌A、B型攻毒用菌液制备方法的研究》文中研究表明通过对副鸡嗜血杆菌A型、B型攻毒用菌液的活菌计数及预攻毒效果的比较,得出使用A型菌液攻毒,菌液制备的较佳条件是:菌种接种于鸡肉汤琼脂板,5%二氧化碳,37℃培养48小时后,挑取典型菌落,接种鸡肉汤培养基,摇菌8小时后,按兽药典方法要求进行攻毒。使用B型菌液攻毒,菌液制备的较佳条件是:菌种接种于鸡肉汤琼脂板,5%二氧化碳,37℃培养16小时后,挑取典型菌落,接种鸡肉汤培养基,摇菌6小时后,按兽药典方法要求进行攻毒。
凌云志,程小果,何福庆,王常伟,陈申秒[7]（2016）在《鸡传染性鼻炎疫苗防控研究进展》文中提出鸡传染性鼻炎是由副鸡禽杆菌（Apg）引起的一种鸡急性上呼吸道传染病,该病主要造成育成鸡生长不良和产蛋鸡产蛋明显下降,并可使肉鸡淘汰率明显升高,造成很大的经济损失。论文从副鸡禽杆菌的主要毒力因子、血清分型和疫苗研究三个方面对鸡传染性鼻炎最新研究进展进行综述,并介绍了疫苗使用效果和研发趋势,对当前鸡传染性鼻炎的防控前景进行了分析。
龚玉梅,张培君,朱文革,贺云霞,王宏俊,张瑜,邵庆红[8]（2015）在《鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联灭活疫苗的研究》文中研究指明利用Page A型、B型、C型副鸡禽杆菌和新城疫病毒La Sota株,研制鸡传染性鼻炎（三价）和新城疫二联油乳剂灭活疫苗。用3个批次疫苗进行单剂量（0.5mL/次）3次接种和大剂量（2.0mL）单次接种的安全性试验、SPF鸡的免疫效力试验、商品鸡的免疫持续期试验和疫苗的保存期试验。结果表明,3批疫苗对试验鸡安全无副作用;免疫接种SPF鸡只30d后对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%,用20μL/只疫苗免疫接种SPF鸡21d后新城疫的平均HI抗体>24;商品鸡42日龄首免,110日龄二免,二免后9个月对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,对新城疫病毒强毒100%保护;用4℃8℃保存12个月和15个月的3批疫苗进行了SPF鸡的近期免疫效力试验,结果对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,用20μL/只疫苗免疫SPF鸡,免疫接种后21d新城疫病毒的平均HI抗体>24,对新城疫病毒强毒的攻毒保护率>70%。说明研制的疫苗安全有效。
沈旭[9]（2013）在《副鸡嗜血杆菌HB株的分离、鉴定及其高密度发酵的研究》文中研究表明副鸡嗜血杆菌病是由副鸡嗜血杆菌（Haemophilus paragallinarum, Hpg）感染引起的疾病，又被称为鸡传染性鼻炎。该病是危害养鸡业重要的细菌病之一，能够给养鸡业带来巨大的经济损失。本研究分离鉴定1株副鸡嗜血杆菌；优化了副鸡嗜血杆菌培养基配方；并运用该配方进行高密度发酵工艺研究并应用于生产。为我国的副鸡嗜血杆菌病疫苗生产打下了基础，其主要研究内容如下。1.副鸡嗜血杆菌HB株分离鉴定及其血凝素基因遗传进化分析从湖北荆门某养鸡场采集鸡鼻窦深部黏液，分离到1株细菌。对其进行细菌培养特性、革兰氏染色镜检、生化试验、药敏试验、血清型分析、回归试验、攻毒保护试验等常规性鉴定，同时进行聚合酶链反应（PCR）、PCR产物测序，并将测序结果与已知副鸡嗜血杆菌基因组序列进行比对分析。生化试验结果为硝酸盐还原，葡萄糖、氧化酶、蔗糖、生长需要烟酰胺腺嘌呤二核苷酸阳性，海藻糖、硫化氢、过氧化物酶阴性。湖北（HB）株与已知发表副鸡嗜血杆菌基因序列同源性在98%～100%之间。因此鉴定该分离株为副鸡嗜血杆菌。从该分离株中PCR扩增副鸡嗜血杆菌血凝素基因，并将扩增到的PCR产物测序，将测序结果与已报道副鸡嗜血杆菌血凝素基因进行遗传进化比对分析。结果显示扩增到的血凝素基因片段大小为1038bp。遗传进化分析表明湖北（HB）分离株与Tianjin、Sd-1同源性最近，同源性达100%；与hagA、SA-3、E-3C、0083、HP8、221最低，同源性在96.0%～96.1%之间。2.副鸡嗜血杆菌HB株摇瓶培养优化实验副鸡嗜血杆菌由于自身特点，在正常培养过程中，往往体现出增值能力不强，最终浓度不高的情况。由于添加营养物质丰富，培养后期较其他产品更容易出现污染的现象。目前，鸡传染性鼻炎疫苗培养基效果并不是非常理想，增菌效果并不能较好的达到生产要求。此次研究中，优化出各个单因素的最佳配比量，为规模化生产提供较为优质的培养基配方，并得到以下结论：由生长曲线可以得出，本菌在培养4h左右OD值迅速增大，生长活跃进入对数增长期；在14h左右达到培养的峰值阶段；在18～20h左右OD值开始逐渐下降。对添加不同动物血清，添加不同含量血清，添加不同浓度葡萄糖，添加不同含量的辅酶4个方面进行培养比较可以得出：添加鸡血清5%（V/V），葡萄糖添加量1g/L，0.1%辅酶水溶液添加量1%（V/V），培养的菌液吸光度OD值最高，稳定期持续时间较长。3.副鸡嗜血杆菌HB株大规模高密度发酵培养工艺优化及应用高品质的鸡传染性鼻炎疫苗对于此病的预防尤为关键。细菌的液体发酵是目前比较好的规模化培养细菌的模式。但是国内对于副鸡嗜血杆菌发酵工艺的研究较少，本试验旨在对本菌的高密度发酵关键工艺指标进行探索，进而对实际生产工作提供较好的参考。分别以10L和200L发酵罐采用分批发酵方式培养副鸡嗜血杆菌HB株。通过对接种量、培养温度和pH值三个发酵参数的分组实验，最后得到以下结论，副鸡嗜血杆菌HB株在试验二优化培养基基础上，控制接种量5%（V/V）、培养温度37.5℃、pH值为7.2，培养的菌体活菌计数及吸光度OD值最高，应用至200L中试发酵罐，取得了菌体密度OD值及活菌数目分别为15.4、3.18x109CFU/ml的较理想的结果。对规模化高密度发酵副鸡嗜血杆菌提供有益的参考。
颜世君,白朝勇[10]（2012）在《主要禽用灭活疫苗种类及其应用》文中研究说明禽用灭活苗是当代养禽业中最常用的疫苗,但在实际应用时,往往因使用不当造成免疫失败等结果,给养禽业造成巨大损失。以禽流感、新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎、传染性鼻炎的代表性灭活疫苗为例,介绍了各类常用灭活疫苗的特征、免疫剂量、免疫方法,并给出参考免疫程序,供禽养殖户借鉴参考。
二、鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗免疫持续期的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗免疫持续期的研究（论文提纲范文）
（1）高致病性禽流感疫苗免疫程序优化及临床应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 禽流感概述 |
| 1.1.1 病原学 |
| 1.1.2 禽流感分类 |
| 1.1.3 禽流感的发生与传播 |
| 1.2 禽流感的流行病学特点 |
| 1.2.1 传染源 |
| 1.2.2 传播途径 |
| 1.2.3 易感动物 |
| 1.2.4 时间分布 |
| 1.2.5 地区分布 |
| 1.3 禽流感的危害 |
| 1.4 禽流感的综合防控 |
| 1.5 禽流感疫苗 |
| 1.5.1 禽流感疫苗的分类 |
| 1.5.2 禽流感疫苗的选择和使用 |
| 1.5.3 我国禽流感疫苗的研究及应用情况 |
| 1.6 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 主要生物制剂和化学试剂 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 禽流感的流行病学调查 |
| 2.2.2 高致病性禽流感病毒基因序列分析 |
| 2.2.3 鸡群体禽流感免疫评价指标 |
| 2.2.4 禽流感疫苗的质量检验 |
| 2.2.5 禽流感疫苗免疫程序的优化 |
| 2.2.6 禽流感疫苗免疫程序优化后的应用 |
| 2.2.7 数据统计与分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 禽流感的流行病学调查 |
| 3.1.1 禽流感的临床症状及病理变化 |
| 3.1.2 禽流感病原学检测 |
| 3.1.3 现地免疫情况分析 |
| 3.2 高致病性AIV的基因序列分析 |
| 3.2.1 高致病性AIV的检测 |
| 3.2.2 H7亚型AIV表面基因的扩增 |
| 3.2.3 H7亚型禽流感病毒的HA基因序列测定及其分析 |
| 3.2.4 H7亚型禽流感病毒的NA基因序列测定及其分析 |
| 3.2.5 H7亚型禽流感病毒内部基因序列测定及分析 |
| 3.3 鸡群体禽流感免疫评价指标 |
| 3.3.1 禽流感免疫抗体与鸡群健康状态相关性 |
| 3.3.2 健康鸡群免疫抗体水平与界差率(Q)之间的换算 |
| 3.3.3 界差率(Q)与抗体合格率、离散度比较分析 |
| 3.4 禽流感疫苗质量检验 |
| 3.4.1 禽流感灭活疫苗质量的实验室检验及现地免疫效果跟踪 |
| 3.4.2 重组活疫苗质量的实验室检验及现地免疫效果跟踪 |
| 3.5 禽流感疫苗免疫程序的优化 |
| 3.5.1 禽流感灭活疫苗免疫次数的优化 |
| 3.5.2 两种不同禽流感疫苗首免日龄的优化 |
| 3.5.3 两种疫苗联合使用免疫程序优化 |
| 3.5.4 不同禽流感疫苗加强免疫的效果评价 |
| 3.6 禽流感疫苗优化免疫程序后的应用 |
| 4 讨论 |
| 4.1 禽流感流行情况调查 |
| 4.1.1 禽流感的临床症状及病理变化 |
| 4.1.2 禽流感病原学监测 |
| 4.1.3 禽流感病毒基因序列的分析 |
| 4.2 禽流感疫苗现地免疫情况分析 |
| 4.3 不同禽流感疫苗的质量检测 |
| 4.4 不同禽流感疫苗的免疫效果评价 |
| 4.5 禽流感疫苗免疫程序的优化和应用 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 缩略语表 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
（2）B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗制备及免疫效力评价（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 主要符号对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 禽偏肺病毒概述 |
| 1.1.1 aMPV的病毒学特征 |
| 1.1.2 aMPV的基因组及编码蛋白 |
| 1.1.3 aMPV的分类 |
| 1.1.4 aMPV的致病性 |
| 1.2 禽偏肺病毒病的流行病学 |
| 1.2.1 aMPV的传播途径 |
| 1.2.2 国内外禽偏肺病毒病的流行情况 |
| 1.3 禽偏肺病毒病的防治 |
| 1.3.1 灭活疫苗研究进展 |
| 1.3.2 弱毒活疫苗研究进展 |
| 1.3.3 基因工程疫苗研究进展 |
| 1.3.4 禽偏肺病毒病的治疗 |
| 1.4 本研究的目的与意义 |
| 第二章 B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗的研制 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 病毒及实验动物 |
| 2.1.2 细胞、引物及探针 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 实验仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 病毒的传代培养、冻干与鉴定 |
| 2.2.2 灭活条件的选择 |
| 2.2.3 乳化工艺的选择 |
| 2.2.4 灭活疫苗安全性实验 |
| 2.2.5 灭活疫苗免疫效力实验 |
| 2.2.6 灭活疫苗最小免疫日龄实验 |
| 2.2.7 灭活疫苗最小免疫剂量实验 |
| 2.2.8 灭活疫苗免疫持续期实验 |
| 2.2.9 灭活疫苗对大日龄SPF鸡免疫保护效果的评价 |
| 2.2.10 血清ELISA抗体水平的测定 |
| 2.2.11 血清中和抗体水平的测定 |
| 2.2.12 PBMC淋巴细胞增殖活性的检测 |
| 2.2.13 脾脏细胞因子的检测 |
| 2.2.14 鼻腔拭子中病毒拷贝数的检测 |
| 2.2.15 病理组织学观察 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 病毒的传代培养及鉴定 |
| 2.3.2 灭活条件的确定 |
| 2.3.3 乳化工艺的确定 |
| 2.3.4 灭活疫苗的安全性 |
| 2.3.5 灭活疫苗的免疫保护效果 |
| 2.3.6 灭活疫苗的最小免疫日龄 |
| 2.3.7 灭活疫苗的最小免疫剂量 |
| 2.3.8 灭活疫苗的免疫持续期 |
| 2.3.9 灭活疫苗对大日龄SPF鸡的免疫保护效果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 灭活疫苗对商品蛋鸡及商品肉鸡免疫保护效果评价 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 细胞、病毒及实验动物 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 B亚型aMPV强毒株对商品蛋鸡和商品肉鸡的致病性 |
| 3.2.2 灭活疫苗对商品蛋鸡和商品肉鸡的免疫保护效果 |
| 3.2.3 鼻腔拭子及组织中的病毒检测 |
| 3.2.4 病理组织学观察 |
| 3.2.5 血清ELISA抗体水平检测 |
| 3.2.6 血清中和抗体水平检测 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 B亚型aMPV LN16强毒株对商品蛋鸡的致病性 |
| 3.3.2 B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗对商品蛋鸡的免疫保护效果 |
| 3.3.3 B亚型aMPV LN16强毒株对商品肉鸡的致病性 |
| 3.3.4 B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗对商品肉鸡的免疫保护效果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（3）鸡新城疫、禽流感、传染性法氏囊病毒重组蛋白的免疫保护效果研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 鸡新城疫及其疫苗研究进展 |
| 1.1.1 新城疫概述 |
| 1.1.2 新城疫在我国的流行现状 |
| 1.1.3 新城疫疫苗研究进展 |
| 1.1.3.1 传统疫苗 |
| 1.1.3.2 载体疫苗 |
| 1.1.3.3 利用Toll样受体配体作为佐剂的疫苗 |
| 1.1.3.4 病毒样颗粒疫苗 |
| 1.1.4 新城疫防控措施 |
| 1.2 禽流感及其疫苗研究进展 |
| 1.2.1 禽流感概述 |
| 1.2.2 H9 亚型禽流感在我国流行现状 |
| 1.2.3 H9 亚型禽流感疫苗研究进展 |
| 1.2.4 禽流感防控措施 |
| 1.3 鸡传染性法氏囊病及其疫苗研究进展 |
| 1.3.1 鸡传染性法氏囊病概述 |
| 1.3.2 传染性法氏囊病流行现状 |
| 1.3.3 传染性法氏囊病毒蛋白结构和功能相关研究 |
| 1.3.4 鸡传染性法氏囊病疫苗研究进展 |
| 1.3.5 鸡传染性法氏囊病防控措施 |
| 1.4 本研究目的及意义 |
| 第二章 传染性法氏囊VP2 蛋白的制备及检验 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 毒株 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 |
| 2.1.2.1 主要试剂 |
| 2.1.2.2 主要溶液的配制 |
| 2.1.2.3 主要仪器 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 传染性法氏囊VP2 蛋白的制备 |
| 2.2.2 传染性法氏囊VP2 蛋白的纯化 |
| 2.2.3 VP2 蛋白的SDS-PAGE分析 |
| 2.2.4 重组蛋白的Western Blot分析 |
| 2.2.5 传染性法氏囊VP2 蛋白的滴度测定 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 VP2 片段的PCR扩增结果 |
| 2.3.2 VP2 片段PCR扩增产物回收结果 |
| 2.3.3 克隆质粒的菌液PCR鉴定结果 |
| 2.3.4 VP2 蛋白的SDS-PAGE分析结果 |
| 2.3.5 VP2 蛋白的Western Blot鉴定结果 |
| 2.3.6 VP2 蛋白滴度测定结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 免疫保护效果研究 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 新城疫及禽流感重组蛋白的滴度测定 |
| 3.2.2 抗原液的制备及检验 |
| 3.2.2.1 单抗原液的制备 |
| 3.2.2.2 三联抗原液的制备 |
| 3.2.2.3 抗原液的检验 |
| 3.2.3 单个抗原的免疫保护效果研究 |
| 3.2.3.1 新城疫及禽流感的抗体检测 |
| 3.2.3.2 传染性法氏囊的抗体检测 |
| 3.2.4 三联抗原液的免疫保护效果研究 |
| 3.2.4.1 新城疫及禽流感的抗体检测 |
| 3.2.4.3 传染性法氏囊抗体检测 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 新城疫、禽流感重组蛋白血凝效价测定结果 |
| 3.3.2 单个抗原的免疫保护效果研究结果 |
| 3.3.2.1 新城疫及禽流感的抗体检测结果 |
| 3.3.2.2 新城疫的攻毒试验结果 |
| 3.3.2.3 传染性法氏囊的抗体检测与攻毒试验结果 |
| 3.3.3 多抗原液的免疫保护效果研究结果 |
| 3.3.3.1 新城疫及禽流感的抗体检测结果 |
| 3.3.3.2 新城疫的攻毒试验结果 |
| 3.3.3.3 传染性法氏囊的抗体检测与攻毒试验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）新城疫疫苗研究现状（论文提纲范文）
| 1 病原分子特征 |
| 2 传统疫苗 |
| 2.1 灭活疫苗 |
| 2.2 弱毒疫苗 |
| 3 基因工程疫苗 |
| 3.1 亚单位疫苗 |
| 3.2 重组活载体疫苗 |
| 3.3 新城疫病毒载体疫苗 |
| 3.4 病毒样颗粒疫苗 |
| 3.5 核酸疫苗 |
| 4 展望 |
（5）水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗（CDV3-CL株，悬浮培养）保存期试验（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 试验用疫苗 |
| 1.1.2 细胞 |
| 1.1.3 参照血清 |
| 1.1.4 检验用强毒 |
| 1.1.5 试验动物 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 疫苗保存 |
| 1.2.2 物理性状、无菌检验、支原体检验和外源病毒检验 |
| 1.2.3 10倍剂量免疫安全性检验 |
| 1.2.4 病毒含量测定 |
| 1.2.5 疫苗免疫效力检验 |
| 2 结果 |
| 2.1 保存期内疫苗物理性状、无菌检验、支原体检验和外源病毒检验 |
| 2.2 不同保存条件下疫苗的安全性试验 |
| 2.3 2～8℃不同保存时间疫苗病毒含量 |
| 2.4-20℃不同保存时间疫苗病毒含量 |
| 2.5 疫苗免疫效力检验与攻毒 |
| 3 讨论 |
（6）副鸡嗜血杆菌A、B型攻毒用菌液制备方法的研究（论文提纲范文）
| 1 试验目的 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 动物及菌株 |
| 1.1.2培养基 |
| 1.1.3器具 |
| 2.2 方法 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 攻毒用菌液纯粹检验结果 |
| 3.2 攻毒用菌液不同培养时间活菌计数 |
| 3.3 不同菌液预攻毒情况 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
（7）鸡传染性鼻炎疫苗防控研究进展（论文提纲范文）
| 1 副鸡禽杆菌的主要毒力因子 |
| 2 副鸡禽杆菌的血清型与致病力的相关性 |
| 3 鸡传染性鼻炎疫苗研究进展 |
| 4 鸡传染性鼻炎防控技术发展前景 |
（8）鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联灭活疫苗的研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 安全性试验 |
| 2.2 效力试验 |
| 2.3 试验鸡(罗曼蛋鸡)二免持续期试验 |
| 2.4 疫苗保存期试验 |
| 3 讨论 |
（9）副鸡嗜血杆菌HB株的分离、鉴定及其高密度发酵的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写对照 |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 副鸡嗜血杆菌病研究进展 |
| 1 病原方面的研究 |
| 2 流行病学 |
| 3 临床症状 |
| 4 病理变化 |
| 5 诊断 |
| 6 综合防制 |
| 第二章 高密度发酵工艺研究进展 |
| 1 营养物质 |
| 2 接种量 |
| 3 温度 |
| 4 pH 值 |
| 5 溶解氧 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第一章 副鸡嗜血杆菌 HB 株分离鉴定及其血凝素基因遗传进化分析 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二章 副鸡嗜血杆菌 HB 株摇瓶培养优化实验 |
| 1 材料 |
| 2 试验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 副鸡嗜血杆菌 HB 株的液体高密度发酵工艺研究 |
| 1 材料 |
| 2 试验方法 |
| 3 实验结果及分析 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 后记与致谢 |
四、鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗免疫持续期的研究（论文参考文献）
- [1]高致病性禽流感疫苗免疫程序优化及临床应用[D]. 田丽娜. 东北农业大学, 2021
- [2]B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗制备及免疫效力评价[D]. 包媛玲. 中国农业科学院, 2021
- [3]鸡新城疫、禽流感、传染性法氏囊病毒重组蛋白的免疫保护效果研究[D]. 项瑞. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [4]新城疫疫苗研究现状[J]. 孟令宅,庞洪泽,赵卓,赵款,袁万哲. 动物医学进展, 2021(02)
- [5]水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗（CDV3-CL株，悬浮培养）保存期试验[J]. 冯二凯,程悦宁,易立,王振军,罗国良,郭利,任飞,尹茉莉,陈立志,程世鹏. 经济动物学报, 2021(01)
- [6]副鸡嗜血杆菌A、B型攻毒用菌液制备方法的研究[J]. 邓智昕,欧建安. 广东畜牧兽医科技, 2020(01)
- [7]鸡传染性鼻炎疫苗防控研究进展[J]. 凌云志,程小果,何福庆,王常伟,陈申秒. 动物医学进展, 2016(08)
- [8]鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联灭活疫苗的研究[J]. 龚玉梅,张培君,朱文革,贺云霞,王宏俊,张瑜,邵庆红. 动物医学进展, 2015(01)
- [9]副鸡嗜血杆菌HB株的分离、鉴定及其高密度发酵的研究[D]. 沈旭. 吉林大学, 2013(04)
- [10]主要禽用灭活疫苗种类及其应用[J]. 颜世君,白朝勇. 中国兽药杂志, 2012(S1)