一、处红柚选育及其生物学特性观察初报（论文文献综述）
颜福花[1]（2018）在《处红柚与翡翠柚萜类代谢物质差异及相关基因特性分析》文中认为红肉柑橘品种因为具有较高的营养保健价值和特殊的感官吸引力,深受消费者的喜爱。处红柚（Citrus maxima cv.Chuhong）是浙江地方良种,风味浓郁,因富含类胡萝卜素,果肉呈均匀的深红色,海绵层淡红色,翡翠柚（Citrus.maxima cv.Feicui）也是浙江地方良种,果肉淡绿色,风味清淡爽口。两个品种相比较,除果肉色泽外,在果实风味、香气等方面的品质均有明显差异。它们虽不是一对突变体材料,但鉴于其相同的生境、相同的柚基因组背景及差异较大的感官品质,成为本研究阐明柑橘品质协同变化趋势的一对理想材料。首先,本研究利用HPLC、GC-MS等技术检测两种柚果实在不同生长发育时期中类胡萝卜素、初生代谢物、柠檬苦素类似物、脱落酸（ABA）和挥发性物质等品质相关代谢物质的组成和含量;其次,深入分析类胡萝卜素代谢途径上结构基因的表达情况,并进一步对类胡萝卜素合成相关基因进行克隆和序列分析;最后,对几个萜类代谢途径上相关基因的启动子进行生物信息学分析。并在详细描述处红柚果实生长发育过程中类胡萝卜素积累变化的同时,探索类胡萝卜素代谢与其它果实品质的相互调控关系,为处红柚果实红肉等品质性状的形成机理提供更多的理论依据。主要研究结果如下:1.对类胡萝卜素的分析表明,成熟期处红柚果实白皮层、囊衣和汁胞呈红色是由于番茄红素和总类胡萝卜素的大量累积所致,翡翠柚果实各组织基本不含番茄红素,且内部三层组织总类胡萝卜素含量在整个生长期都较低（≤8.02±0.72μg/g,DW）;100DPA前,处红柚和翡翠柚黄皮层均以累积叶黄素和β-胡萝卜素为主;随着果实发育,处红柚白皮层和囊衣番茄红素的含量逐步升高,到150DPA又急剧降低;而处红柚汁胞层番茄红素含量随果实发育持续升高,最高值出现在150DPA时,达426.98±35.8μg/g,DW。2.选择类胡萝卜素含量变化较大的45、75、100和150DPA四个生长发育时期,对汁胞初生代谢物质进行检测。结果表明,在20种初生代谢物质中,蔗糖是最主要的可溶性糖,在150DPA时,处红柚中蔗糖含量（92.30 mg/g,DW）占所测糖总量的61.70%,翡翠柚中占比则为57.25%（121.67 mg/g,DW）;在100DPA-150DPA期间,蔗糖、葡萄糖、果糖、D-半乳糖和半乳糖苷果糖在处红柚汁胞中含量无显着性变化,而在翡翠柚汁胞中均显着性升高,且均于150DPA时含量显着高于处红柚中。两种柚汁胞有机酸均以柠檬酸为主,且随果实发育均呈现先增高成熟期降低的变化趋势;在整个果实发育期,处红柚汁胞中柠檬酸含量是翡翠柚汁胞的5.8倍21.6倍。两种柚汁胞中检测到的5种氨基酸中,4-氨基丁酸在同期的两个柚汁胞中无显着差异,而在100DPA和150DPA,处红柚汁胞中L-天冬氨酸和天冬酰胺的含量均显着高于翡翠柚。3.在100DPA-150DPA期间,处红柚果实四层组织中柠檬苦素和诺米林素含量与翡翠柚相比均有显着差异,且囊衣和汁胞层的含量在两个柚品种间变化趋势相反;在成熟期时（150DPA）,处红柚囊衣和汁胞中柠檬苦素含量分别是翡翠柚中的2.74倍和4.91倍,而且诺米林素含量分别是翡翠柚中的3.16倍和4.62倍。4.在100DPA-150DPA时,ABA在处红柚汁胞中含量逐渐降低,150DPA时含量最低,为0.78μg/g,DW;而ABA在翡翠柚汁胞中含量逐渐升高,与处红柚变化趋势相反,于150DPA时含量达到最高,为3.15μg/g,DW,是处红柚中的4.04倍。5.在两个柚品种成熟期黄皮层中共检测到69种挥发性物质,主要为单萜类,其在处红柚和翡翠柚中分别占挥发性物质总量的99.63%和99.57%,其中d-柠檬烯是主要挥发性物质,在两种柚中分别占挥发性物质总量的96.67%和82.43%;52种物质的含量在两个柚品种中存在显着性差异;其中单萜酯类的乙酸香叶酯在两个柚品种中含量差异最大,翡翠柚中是处红柚中的19.7倍。6.对应整个生长发育时期,分析发现类胡萝卜素代谢途径11个相关结构基因在处红柚和翡翠柚果实各组织的表达存在显着差异,偏相关分析表明与处红柚果实内部三层组织中番茄红素的含量及总类胡萝卜素含量显着相关的结构基因各不相同。7.主要克隆了处红柚和翡翠柚汁胞类胡萝卜素代谢途径上11个结构基因cDNA并进行序列分析,结果表明除ZISO基因以外,其余基因在两种柚果实不同组织中均存在不同的转录本,其中DXR,PSY,CRTISO,LCYb2,LCYe和ZEP这6个基因在两个柚果实汁胞中主要转录本不同,可能对两个品种汁胞显着不同的类胡萝卜素积累模式有主要贡献。其中二柚果实四层组织PSY基因共有6种转录本,处红柚克隆到其中4种转录本,翡翠柚克隆到其中3种转录本,各转录本不仅存在单核苷酸的差异,还存在简单重复序列（AAT）的差异,然而,经分析其它红肉柚和普通柚的PSY基因序列,发现AAT重复序列与番茄红素的积累没有直接关系。8.对萜类代谢途径30个相关基因启动子区进行生物信息学分析,预测发现ATSOC1（MIKC-MADS家族）、F13F21.8（B3家族）、AIL2（AP2家族）和DOF家族的DOF1.7、DOF1.10、DOF2.2、DOF3.4、DOF4.7、DOF5.1、DOF5.6共10个转录因子均同时调控511个从MEP途径基因到下游类胡萝卜素合成或裂解基因、柠檬苦素类似物合成关键基因和其它萜类合成酶基因等,说明可能存在若干个转录因子同时调控萜类代谢途径上多个结构基因。综上所述,两个柚果实品质相关代谢物质——类胡萝卜素、糖酸、柠檬苦素类似物、ABA和挥发性物质的含量均存在显着性差异,类胡萝卜素代谢途径上结构基因不同转录本,及其在两种柚不同组织中表达丰度差异的综合效应是导致类胡萝卜素在两个不同柚品种、同品种不同组织中差异积累的直接原因,本研究没有发现类胡萝卜素代谢途径上结构基因的关键突变。本研究从类胡萝卜素及其他萜类相关代谢途径的视角分析了处红柚和翡翠柚的代谢差异,并从类胡萝卜素代谢相关结构基因不同转录本的差异表达层面分析其色泽差异形成的原因,为柑橘综合品质的提升实践提供了新的理论依据。
林旗华,林燕金,卢新坤[2]（2014）在《利用SRAP分子标记及果肉汁胞色素分析鉴定柚子新品种黄金蜜柚》文中认为本研究利用SRAP分子标记进行分析鉴定,同时结合果肉汁胞色素分析、生物学性状及物候期观察,以确定黄金蜜柚的品种类型。通过208对SRAP引物对黄金蜜柚和琯溪蜜柚进行SRAP扩增,结果显示,两品种间的谱带基本相同,但均存在黄金蜜柚和琯溪蜜柚特有的谱带,这表明了两品种间在DNA水平上存在真实的遗传差异。对10份柚类品种的SRAP遗传相似性分析表明,黄金蜜柚与琯溪蜜柚的遗传距离最为接近,达到0.98,这从分子水平上证明了其亲缘关系非常紧密,同系列的琯溪蜜柚、黄金蜜柚、红肉蜜柚和三红蜜柚4个柚类品种间的遗传相似系数均较高。另外黄金蜜柚在汁胞色素种类及含量、花柱头颜色和成熟期等方面均明显区别于琯溪蜜柚。研究结果充分表明了黄金蜜柚是一个不同于其它柚类的优特柚类新品种。
董美超,李进学,周东果,岳建强,高俊燕[3]（2013）在《柑橘品种选育研究进展》文中指出综述了柑橘引种、芽变选种、实生选种、杂交育种、组织培养育种、转基因育种和DNA分子标记辅助育种等研究成果;提出了柑橘品种选育中存在的问题,并对柑橘品种选育研究进行了展望。
阮秀春,斯金平,徐象华,蓝云龙,王品水,谢建秋[4]（2004）在《处红柚选育及其生物学特性观察初报》文中指出通过对浙江丽水市柚类资源的调查,从果实品质、结果性能、树势、抗性等方面制定了选优标准,经预选、初选、复选筛选出处红柚优良单株,并经遗传稳定性检验和生物学特性观察认为,处红柚外观漂亮、易剥、果肉红色、少籽、可食率高、酸甜可口、水分充足,成熟期早、适应性强、病虫害少、抗寒性好、座果性能好,遗传稳定性高,综合性状优良,适宜浙江丽水及生态条件类似地区推广栽培。
二、处红柚选育及其生物学特性观察初报（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、处红柚选育及其生物学特性观察初报（论文提纲范文）
（1）处红柚与翡翠柚萜类代谢物质差异及相关基因特性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 前言 |
| 1 课题的提出 |
| 2 前人研究进展 |
| 2.1 植物体内的代谢物质 |
| 2.1.1 初生代谢物质 |
| 2.1.2 次生代谢物质 |
| 2.1.3 与果实品质相关的代谢物质 |
| 2.2 植物萜类物质相关研究进展 |
| 2.2.1 植物类胡萝卜素相关研究进展 |
| 2.2.2 植物柠檬苦素类似物代谢研究 |
| 2.2.3 植物挥发性萜类物质研究 |
| 2.3 植物脱落酸(ABA)与类胡萝卜素代谢关系研究进展 |
| 3 本研究的目的与主要内容 |
| 第二章 处红柚和翡翠柚果实中代谢物质差异研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料和仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 处红柚和翡翠柚果实类胡萝卜素的提取与检测 |
| 2.2.2 处红柚和翡翠柚果实汁胞初生代谢物质提取与检测 |
| 2.2.3 处红柚和翡翠柚果实柠檬苦素及诺米林素的提取与检测 |
| 2.2.4 处红柚和翡翠柚汁胞ABA的提取与检测 |
| 2.2.5 处红柚和翡翠柚果实黄皮层挥发性物质检测 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 处红柚和翡翠柚果实发育过程中主要类胡萝卜素分析 |
| 3.1.1 黄皮层类胡萝卜素种类和含量分析 |
| 3.1.2 白皮层类胡萝卜素种类和含量分析 |
| 3.1.3 囊衣层类胡萝卜素种类和含量分析 |
| 3.1.4 汁胞中类胡萝卜素种类和含量分析 |
| 3.1.5 处红柚果实各组织中番茄红素含量与其它类胡萝卜素含量的偏相关分析 |
| 3.2 处红柚和翡翠柚果实汁胞初生代谢物质分析 |
| 3.2.1 可溶性糖含量差异 |
| 3.2.2 有机酸含量的差异 |
| 3.2.3 氨基酸及其他初生代谢产物的差异 |
| 3.3 处红柚和翡翠柚果实发育过程中类柠檬苦素含量分析 |
| 3.4 处红柚和翡翠柚汁胞内ABA含量分析 |
| 3.5 处红柚和翡翠柚果实黄皮层挥发性物质分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 柚果实初生代谢物质与萜类代谢产物的差异及其变化的协同性 |
| 4.2 类胡萝卜素在柚果实中积累的组织特异性和组织协同性 |
| 第三章 处红柚和翡翠柚果实类胡萝卜素代谢途径相关基因的表达分析 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料和仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 RNA提取及反转录 |
| 2.2.2 RT-PCR分析 |
| 2.2.3 偏相关分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 黄皮层中类胡萝卜素代谢途径结构基因的表达分析 |
| 3.2 白皮层中类胡萝卜素合成途径结构基因的表达分析 |
| 3.3 囊衣中类胡萝卜素合成途径结构基因的表达分析 |
| 3.4 汁胞中类胡萝卜素合成途径结构基因的表达分析 |
| 3.5 类胡萝卜素产物量与其结构基因表达量的偏相关分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 各组织中的类胡萝卜素独立合成 |
| 4.2 上、下游基因表达量对 β-胡萝卜素合成的影响与相关性 |
| 第四章 处红柚和翡翠柚果实类胡萝卜素代谢途径相关基因的克隆、序列分析及相关基因启动子所结合转录因子预测 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 RNA的提取和cDNA合成 |
| 2.2.2 基因的扩增和片段回收 |
| 2.2.3 基因序列比对分析 |
| 2.2.4 启动子所结合转录因子的预测 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 类胡萝卜素代谢途径上结构基因克隆和序列分析 |
| 3.2 柚萜类代谢途径相关基因启动子所结合转录因子预测 |
| 4 讨论 |
| 4.1 处红柚红肉性状的产生可能并非源于类胡萝卜素代谢途径上结构基因的关键突变 |
| 4.2 类胡萝卜素产物合成与相关结构基因表达量的复杂关系 |
| 第五章 总讨论 |
| 1 柑橘中类胡萝卜素代谢相关研究的困境及其产生的原因 |
| 1.1 类胡萝卜素是初生代谢产物也是次生代谢产物 |
| 1.2 类胡萝卜素的代谢受激素、生长发育时期和外部环境的调控 |
| 1.3 在转录水平上受很多转录因子的调控 |
| 2 未来对类胡萝卜素代谢相关研究的策略 |
| 参考文献 |
| 附录Ⅰ 黄皮层挥发性物质表 |
| 附录Ⅱ 引物序列信息 |
| 附录Ⅲ 偏相关系数表 |
| 附录Ⅳ 类胡萝卜素代谢途径结构基因不同转录本核苷酸序列比对和氨基酸序列比对 |
| 附录Ⅴ 攻博期间发表文章 |
| 致谢 |
（2）利用SRAP分子标记及果肉汁胞色素分析鉴定柚子新品种黄金蜜柚（论文提纲范文）
| 1结果与分析 |
| 1.1黄金蜜柚分子生物学鉴定 |
| 1.2黄金蜜柚与部分柚类品种的遗传相似性分析 |
| 1.2.1 SRAP引物筛选及SRAP扩增 |
| 1.2.2遗传相似性分析 |
| 1.3黄金蜜柚果肉汁胞色素成分定性定量分析 |
| 1.4黄金蜜柚的花柱头和果肉颜色鉴定 |
| 1.5黄金蜜柚物候期观测 |
| 2讨论 |
| 3材料与方法 |
| 3.1材料 |
| 3.2柚子基因组DNA提取、扩增与数据统计 |
| 3.3果肉类胡萝卜素测定方法 |
| 作者贡献 |
（3）柑橘品种选育研究进展（论文提纲范文）
| 1 引种及品种改良 |
| 2 芽变选种和实生选种 |
| 3 杂交育种 |
| 4 细胞组织培养与体细胞杂交育种 |
| 5 转基因育种 |
| 6 DNA分子标记辅助育种 |
| 7 问题及展望 |
（4）处红柚选育及其生物学特性观察初报（论文提纲范文）
| 1 研究方法 |
| 1.1 选优标准与方法 |
| 1.1.1 果品选优标准 |
| 1.1.2 母树选优标准 |
| 1.1.3 选优方法: |
| 1.2 遗传稳定性 |
| 1.3 生物学特性研究 |
| 1.3.1 物候期观测 |
| 1.3.2 结果性状观测 |
| 1.3.3 适生区域研究 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 选优结果 |
| 2.1.1 处红柚形态特征 |
| 2.1.2 结果性状 |
| 2.2 遗传稳定性 |
| 2.3 生物学特性 |
| 2.3.1 生长发育特点 |
| 2.3.2 物候期 |
| 2.3.3 对环境条件的要求 |
| 3 小结 |
| 3.1 处红柚特征明显,综合经济性状良好 |
| 3.2 处红柚遗传稳定性高,适应性强 |
四、处红柚选育及其生物学特性观察初报（论文参考文献）
- [1]处红柚与翡翠柚萜类代谢物质差异及相关基因特性分析[D]. 颜福花. 华中农业大学, 2018
- [2]利用SRAP分子标记及果肉汁胞色素分析鉴定柚子新品种黄金蜜柚[J]. 林旗华,林燕金,卢新坤. 分子植物育种, 2014(06)
- [3]柑橘品种选育研究进展[J]. 董美超,李进学,周东果,岳建强,高俊燕. 中国果树, 2013(06)
- [4]处红柚选育及其生物学特性观察初报[J]. 阮秀春,斯金平,徐象华,蓝云龙,王品水,谢建秋. 浙江林业科技, 2004(06)