一、血小板血栓形成过程中脂蛋白(a)作用的实验研究（论文文献综述）
张瑞[1]（2020）在《艾灸及艾烟调节Rho/ROCK信号通路干预ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的机制研究》文中指出动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）是多种心脑血管疾病的主要病理基础,是一种以粥样斑块为显着特征的慢性病理过程,属中医学“痰”、“瘀”的范畴。艾灸疗法以其温阳通脉,活血化瘀的特性在防治AS方面具有独特的优势。现代研究证明,艾灸可以通过改善脂质代谢、炎症反应、氧化应激、血小板活化以及内皮细胞功能多个途径,起到多靶点治疗AS的作用。艾烟是艾灸起效的重要因素之一,课题组前期研究也证明了艾烟在抗AS中的作用。Rho/ROCK信号通路在人体内广泛分布,该通路的异常激活可以活化血小板,损伤内皮功能,促使巨噬细胞泡沫化,抑制胆固醇逆向转运途径,加重炎症反应和氧化应激,与AS的各项发病机制均有深入的联系,也是近年来抗AS治疗中新的靶点和焦点。课题组前期研究发现,艾灸对胆固醇逆向转运途径及炎症反应展现出确切的改善作用。因此,开展艾灸干预Rho/ROCK信号通路的研究,一方面是对课题组前期成果的进一步深化;另一方面,对于揭示艾灸防治AS的机制,有着较大的意义。基于上述基础,我们提出假说,艾灸及艾烟可能通过调节Rho/ROCK信号通路,发挥调节脂质代谢及胆固醇逆向转运途径、缓解炎症反应的作用,来实现防治AS的作用。目的:观察艾灸及艾烟对ApoE-/-小鼠脂质代谢、胸主动脉病理等AS常规指标的作用,通过对比阳性药物辛伐他汀以验证艾灸及艾烟抗AS的效应。以Rho/ROCK信号通路作为切入点,通过对比ROCK抑制剂法舒地尔探讨艾灸及艾烟改善AS的可能作用机制。方法:在前两章实验中,将60只8周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为4组:模型组、艾灸组、艾烟组和辛伐他汀组各15只,以高脂饲料喂养。15只8周龄雄性C57BL/6非转基因小鼠作为空白对照组,以普通饲料喂养。空白组和模型组小鼠均采用固定器固定,每日抓取固定20 min;艾灸组采用固定器固定小鼠,在膻中穴施灸20min;艾烟组采用固定器固定小鼠后,将固定器放入5-15mg/m3的艾烟环境中20 min;辛伐他汀组小鼠每日每只按2.8 mg/kg的剂量给药,各组每周均干预6天。连续干预14周后取材,采用生化法检测血清中TG、TC、LDL-C、HDL-C脂代谢相关指标含量,ELISA法检测血清ApoA1、ox-LDL等脂蛋白水平;HE染色和油红“O”染色从横向和纵向观察胸主动脉的斑块病理变化及结构改变。在后两章实验中,药物组选用法舒地尔,其余小鼠品系、饲养、分组、干预情况与前两章一致。免疫组化法、Western blot法和RT-PCR法检测胸主动脉Rho、ROCK2、PPARγ、LXRα和ABCA1的阳性面积比、蛋白表达水平和mRNA表达量;ELISA法检测TGF-β1、IL-6、IL-10和IL-17等炎症因子水平。结果:1.血脂及脂蛋白模型组小鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C和ox-LDL含量显着高于空白组（P<0.01）,ApoA1含量显着低于空白组（P<0.01）;艾灸组小鼠血清中TC含量与模型组相比显着降低（P<0.01）,TG、LDL-C和ox-LDL含量下降（P<0.05）,HDL-C含量显着升高（P<0.01）,ApoA1含量上升（P<0.05）;艾烟组小鼠血清中TC、LDL-C和ox-LDL含量与模型组相比显着降低（P<0.01）,TG含量下降但无统计学差异（P>0.05）,HDL-C含量上升（P<0.05）,ApoA1含量显着升高（P<0.01）;辛伐他汀组小鼠血清中TC、TG、LDL-C含量与模型组相比显着降低（P<0.01）,ox-LDL含量下降但无统计学差异（P>0.05）,HDL-C含量上升但无统计学差异（P>0.05）,ApoA1含量明显升高（P<0.01）。2.胸主动脉病理观察HE和油红“O”染色结果显示,模型组动脉粥样斑块病变最为严重,主动脉管腔狭窄,斑块内可见泡沫细胞、炎性细胞浸润以及胆固醇结晶,血管中膜向内膜增生。艾灸组和辛伐他汀组病理改善显着,动脉粥样斑块与模型组相比面积较小,炎性细胞浸润较少,血管中膜平滑肌增生程度较轻,两组组间差异不明显。艾烟组小鼠主动脉管腔狭窄,可见动脉粥样斑块,斑块内可见泡沫细胞和炎性细胞浸润,程度较模型组轻,血管内膜结构破坏,血管中膜增生。3.Rho/ROCK信号通路免疫组化结果显示,模型组小鼠主动脉Rho、ROCK2表达和阳性面积与空白组相比增加,差异有显着统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,艾灸组、艾烟组和法舒地尔组Rho、ROCK2表达和阳性面积减少,差异有显着统计学意义（P<0.01）。Western blot结果显示,模型组小鼠主动脉Rho、ROCK2蛋白表达量较空白组升高,差异有显着统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,艾灸组、艾烟组和法舒地尔组小鼠主动脉Rho、ROCK2蛋白表达量降低,差异有显着统计学意义（P<0.01）。RT-PCR结果显示,模型组小鼠主动脉Rho、ROCK2的mRNA表达较空白组升高,差异有显着统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,艾灸组、艾烟组和法舒地尔组小鼠主动脉Rho、ROCK2的mRNA表达降低,差异有显着统计学意义（P<0.01）。4.胆固醇逆向转运及炎症因子免疫组化结果显示,模型组小鼠主动脉PPARγ表达和阳性面积与空白组相比减少（P<0.05）、LXRα显着减少（P<0.01）,ABCA1减少但无统计学差异（P>0.05）;与模型组相比,艾灸组、艾烟组和法舒地尔组PPARγ、LXRα表达和阳性面积显着增加（P<0.01）,ABCA1增加但无统计学差异（P>0.05）。Western blot结果显示,模型组小鼠主动脉PPARy和LXRα蛋白含量较空白组明显降低（P<0.01）,ABCA1蛋白表达量较空白组明显升高（P<0.01）;与模型组相比,艾灸组、艾烟组和法舒地尔组小鼠主动脉PPARγ和LXRα蛋白表达量显着升高（P<0.01）,艾灸组、艾烟组和法舒地尔组小鼠主动脉LXRα蛋白表达量显着升高（P<0.01）。艾灸组和法舒地尔组小鼠主动脉ABCA1蛋白表达量显着降低（P<0.01）,而艾烟组无统计学差异（P>0.05）。RT-PCR结果显示,模型组小鼠主动脉PPARγ、LXRα、ABCA1的mRNA表达量较空白组明显降低（P<0.01）;与模型组相比,艾灸组、艾烟组和法舒地尔组小鼠主动脉PPARy、LXRα、ABCA1 的 mRNA 表达量显着升高（P<0.01）。模型组小鼠血清TGF-β1含量低于空白组（P<0.05）,IL-10含量显着低于空白组（P<0.01）,IL-6、IL-17含量显着高于空白组（P<0.01,P<0.05）;艾灸组小鼠血清中TGF-β1和IL-10含量与模型组相比显着升高（P<0.01）,IL-6和IL-17含量与模型组相比下降（P<0.05）;艾烟组小鼠血清中TGF-β1和IL-10含量与模型组相比上升（P<0.05）,IL-6含量与模型组相比显着降低（P<0.01）,IL-17含量下降但无统计学差异（P>0.05）;法舒地尔组小鼠血清中TGF-β1和IL-10含量与模型组相比显着升高（P<0.01）,IL-6含量与模型组相比下降（P<0.05）,IL-17含量与模型组相比显着降低（P<0.01）。结论:1.艾灸及艾烟均可通过调节脂代谢紊乱、改善主动脉动脉粥样病理状况,从而减缓AS发生发展。2.艾灸及艾烟可下调Rho/ROCK信号通路相关指标的蛋白和mRNA表达。3.艾灸及艾烟可上调胆固醇逆转运途径相关指标,可双向调节炎症因子水平,以减缓AS病理进程。4.艾灸及艾烟调节胆固醇逆向转运途径和炎症反应的作用机制,可能与其调控Rho/ROCK信号通路有关。
杨洁[2]（2020）在《单纯收缩期高血压并脑梗死的中医证候特征及其lncRNA差异表达谱研究》文中研究指明目的:以单纯收缩期高血压并脑梗死患者为研究对象,初步总结其中医证候分布规律;基于临床研究结果,筛选相关证型人群的血浆特征lnc RNA表达谱,构建lnc RNAs-m RNAs共表达网络,探讨lnc RNA在单纯收缩期高血压并脑梗死相关证型中的潜在作用和可能作用机制。方法:1.临床研究收集并分析149例单纯收缩期高血压并脑梗死患者的临床资料,对四诊资料等运用量表进行全面采集,通过聚类分析和对应分析的方法,总结中医证候特征,并分析各证型血糖、血脂、尿酸、同型半胱氨酸等因素的相关性。2.实验研究根据前期临床研究结果,使用高通量测序技术检测单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者与对照组单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者血浆lnc RNAs、m RNAs的表达水平,筛选差异表达lnc RNA和m RNA。通过生物信息学预测分析差异表达的lnc RNAs靶向调控的m RNAs。对筛选出的部分lnc RNA,扩大样本量,纳入前期符合临床研究的60名受试者,进行q T-PCR验证。结果:1.临床研究发现单纯收缩期高血压并脑梗死的中医证候分布:149例单纯收缩期高血压并脑梗死患者中医证候分布情况为肾虚血瘀证最多,占比42.95%,其次为肝肾阴虚证、肝火亢盛证、痰热腑实证、风痰阻络证,分别占比23.49%,18.79%,7.38%,7.38%。各证型之间的年龄分布没有统计学差异。各证型在不同性别间的分布结果显示肝肾阴虚与痰热腑实在男女占比有统计学差异（卡方值=7.6215 P=0.005）,肝肾阴虚女性占比高,痰热腑实男性占比高。血清尿酸单因素方差分析P=0.05,LSD检验方法两两比较后,t分组结果显示肝肾阴虚证与风痰阻络证有差异,风痰阻络证血清尿酸水平高于肝肾阴虚证血清尿酸水平。各证型的BMI、低密度脂蛋白均升高,但无统计学意义。血糖在肝肾阴虚证中提示升高,同型半胱氨酸在痰热腑实证和风痰阻络证中升高,但各证型间无明显统计学意义。2.实验研究使用高通量测序技术和生物信息学分析方法,发现单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者与对照组单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者血浆存在2768个差异lnc RNAs（946个上调,1822个下调）,747个差异m RNAs（228个上调,519个下调）。对高通量测序筛选的差异表达lnc RNA和m RNA（FC值在2倍以上且P<0.05）进行聚类分析,和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者相比,单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者血浆lnc RNAs和m RNAs表达谱存在明显差异。3.Lnc RNA可以在转录水平调控靶基因的表达,采用生物信息学分析预测差异表达lnc RNA的靶m RNA。交集基因进行GO和KEGG富集分析,结果显示交集基因主要与血小板活化聚集、ECM受体相互作用、细胞粘附分子、黏着斑等相关。瘀血是单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者的主要致病因素,结合富集分析结果和疾病致病因素的病理表现,提示脑梗死与凝血异常、血小板聚集和细胞粘附密切相关。4.结合差异表达lncRNA-m RNA共表达网络、差异表达lnc RNA和m RNA富集分析结果,筛选与单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证相关的特定lnc RNA和m RNA。q T-PCR结果显示,可能存在调控关系的lnc RNA和m RNA为:ENST00000565493（上调）、ENST00000606054（上调）、ENST00000590604（上调）、ENST00000566942（上调）、NONHSAT217189.1（下调）和CD226（上调）;ENST00000565493（上调）、NONHSAT138949.2（上调）、ENST00000369385（下调）、ENST00000540082（下调）和PARVB（上调）。5.同型半胱氨酸和血清肌酐在单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证（实验组）和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证（对照组）间存在显着性差异,提示同型半胱氨酸和血清肌酐与脑梗死相关。回归分析结果表明,血清尿酸和脂蛋白（α）与差异特定lnc RNA和m RNA存在线性关系。结论:1.单纯收缩期高血压并脑梗死可分为肾虚血瘀证、肝肾阴虚证、肝火亢盛证、痰热腑实证、风痰阻络证5个基本证候,其中肾虚血瘀证是主要证候。结合理化指标分析,风、热、痰、瘀是致病因素,其中瘀是单纯收缩期高血压并脑梗死的最关键病理因素。同时应用聚类分析能够使数据更加客观,有利于中医证候的分类研究。2.单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证之间有较明显的转录组表达谱差异。GO富集分析和KEEG富集分析提示,单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证差异表达的lnc RNA和m RNA主要与凝血调节、血小板活化聚集、焦点粘连、细胞粘附分子结合等信号通路相关。筛选到的5个上调lnc RNA和3个下调lnc RNA可能通过调控CD226和PARVB的表达,参与血小板聚集和细胞粘附信号通路,影响单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证的发生发展。为单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证的分子和病理机制提供了一定的理论依据。
姚琴[3]（2020）在《不同处理方式艾燃烧生成物调控ApoE-/-小鼠的血管内皮功能和机制研究》文中研究说明背景:艾燃烧生成物（Moxa Combustion Products,MCP）的效用是艾灸的作用机理之一,MCP是指在艾绒燃烧过程生成的产物,艾烟是其最主要的部分。MCP中含有一定量的颗粒物（Particulate Matter,PM）,研究显示艾灸诊室PM10平均质量浓度为3.54mg/m3,超过医院候诊室卫生标准（GB9671-1996）中规定的最高限值（0.15 mg/m3）;尤其是MCP的颗粒物中存在一定比例PM2.5,引发关注和担忧;而目前MCP中的颗粒物是否是艾灸疗效的关键因素未有研究。近年来,医疗市场也出现了以艾叶精油穴位涂抹、艾绒穴位热熨、艾烟滤过等艾烟的处理和替代方法甚至医疗设备。针对此,我们根据艾绒燃烧过程的不同阶段,提取各阶段的MCP产物,探索艾灸的关键起效环节,并研究艾烟中的颗粒物是否是艾灸疗效的关键因素。动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）是心脑血管疾病的主要病理基础。内皮功能障碍（Endothelial Cell Dysfunction,ECD）是AS发病的始动环节,也是影响AS疾病进展的关键因素。一氧化氮（Nitric Oxide,NO）是ECD过程中最重要的血管活性物质,NO的合成受活化的内皮型一氧化氮合酶（Endothelial Nitric Oxide Synthase,eNOS）调控。研究显示,艾灸和艾烟可调节NO/ET-1平衡、PGI2/TXA2平衡,纠正血液流变的异常,改善内皮细胞功能,以减轻AS病变程度。因此,开展以eNOS活化调控AS的研究对于探寻中医艾灸治疗机理很有必要。课题组前期开展了艾灸和艾烟干预载脂蛋白E基因敲除（ApolipoproteinEknockout,ApoE-/-）小鼠的研究,显示出可通过良性调节脂质代谢、减轻炎症反应及内皮损伤等效应防治AS。目的:观察不同处理方式MCP（艾烟、滤过艾烟、艾绒挥发物及艾叶精油）对AS的作用,从eNOS活化相关信号通路观察其对血管内皮功能的影响,探索艾灸干预AS的起效环节及作用机制,并探讨MCP中的颗粒物是否艾灸起效的关键成分。方法:将60只雄性8周龄ApoE-/-小鼠随机均分为5组:艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组、艾叶精油组、模型组,12只同龄雄性C57BL/6小鼠作为正常对照。正常组、模型组小鼠常规抓取、固定;艾烟组小鼠暴露于2%浓度（以染毒柜遮光率度量）艾烟环境,每次约燃烧1.5 g艾绒;滤过艾烟组小鼠暴露于1.5 g艾绒点燃滤过后的艾烟环境;艾绒挥发组小鼠暴露于1.5g艾绒在150℃加热条件下的挥发物环境;艾叶精油组小鼠置暴露在3.75μL艾叶精油（1.5 g艾绒所含挥发油含量折合）加入16 mL蒸馏水雾化形成的环境中。所有干预均在染毒柜中进行,20 min/日,6日/周,连续干预14周。生化法检测血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C、NO的含量;Elisa法测定血浆ox-LDL、ApoA-I、ET-1、PGI2、TXA2、VEGF、vWF的含量;HE染色、油红“O”染色观察主动脉根、胸主动脉病理改变;Western blot法检测主动脉组织中AMPK、PI3K、AKT和eNOS 蛋白的表达及磷酸化蛋白 p-AMPK、p-PI3K、p-AKT、p-eNOS-Thr495、p-eNOS-Ser1177蛋白表达情况;RT-PCR法检测主动脉Ampk-mRNA、Pi3k-mRNA、Akt-mRNA和eNos-mRNA表达情况。结果:1.脂质代谢水平模型组小鼠血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C、ox-LDL含量均显着高于正常组（P<0.01或P<0.05）,血浆APOA-I含量与正常组无显着差异（P>0.05）。艾烟组小鼠血浆TC、TG、LDL-C、ox-LDL含量显着低于模型组（P<0.01或P<0.05）,HDL-C含量显着高于模型组（P<0.01）,ApoA-I含量与模型组无显着差异（P>0.05）。滤过艾烟组小鼠血浆TC、TG、LDL-C含量显着低于模型组（P<0.01或P<0.05）,HDL-C含量显着高于模型组（P<0.01）,ApoA-I、ox-LDL含量与模型组无显着差异（P>0.05）。艾绒挥发组小鼠血浆TC含量显着低于模型组（P<0.01）,TG、HDL-C、LDL-C、ApoA-I、ox-LDL含量与模型组无显着差异（P>0.05）。艾叶精油组小鼠血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C、ox-LDL、ApoA-I含量与模型组无显着差异（P>0.05）。MCP各组组间比较,艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组、艾叶精油组对降低血浆TC水平效果依次下降,组间比较均有统计学差异。除TC外,艾烟组与滤过艾烟组对于调节其他各项血脂水平方面无显着性差异;艾烟组、滤过艾烟组对于降低血浆TG、HDL-C水平显着优于艾叶精油组;艾烟组对于降低血浆LDL-C水平显着优于艾绒挥发组、艾叶精油组;艾烟组对于降低血浆ox-LDL水平显着优于艾叶精油组。2.主动脉病理正常组小鼠未见明显异常;模型组小鼠可见明显的AS病理改变（AS斑块形成）;艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组较模型组明显改善（AS斑块程度减轻）,艾叶精油组较模型组未见明显改善（AS斑块形成）。3.血管内皮功能模型组小鼠血浆NO、NO/ET-1、PGI2水平显着低于正常组（P<0.01或P<0.05）,血浆ET-1、TXA2、TXA2/PGI2（T/P）水平显着高于正常组（P<0.01或P<0.05）,血浆VEGF、vWF与正常组无显着差异（P>0.05）。艾烟组小鼠血浆NO、PGI2、NO/ET-1水平显着高于模型组（P<0.01）,血浆ET-1含量、T/P显着低于模型组（P<0.01）,TXA2、VEGF、vWF含量与模型组无显着差异（P>0.05）。滤过艾烟组小鼠血浆NO、NO/ET-1水平显着高于模型组（P<0.05）,ET-1含量、T/P显着低于模型组（P<0.01）,TXA2、PGI2、VEGF、vWF含量与模型组无显着差异（P>0.05）。艾绒挥发组小鼠血浆NO、NO/ET-1水平显着高于模型组（P<0.05）,小鼠血浆ET-1含量、T/P显着低于模型组（P<0.01,P<0.05）,TXA2、PGI2、VEGF、vWF含量与模型组无显着差异（P>0.05）。艾叶精油组小鼠血浆PGI2含量显着高于模型组（P<0.05）,血浆T/P 比值显着低于模型组（P<0.01）,血浆NO、ET-1、NO/ET-1、TXA2、VEGF、vWF与模型组无显着差异（P>0.05）。MCP各组组间比较,艾烟组升高NO显着优于艾叶精油组,滤过艾烟组、艾绒挥发组ET-1显着低于艾叶精油组,艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组升高NO/ET-1显着优于艾叶精油组,艾烟组升高PGI2显着优于滤过艾烟组、艾绒挥发组,艾烟组T/P 比值显着低于艾绒挥发组,TXA2、VEGF、vWF组间比较均无显着性差异。4.eNOS活化相关信号通路模型组的主动脉p-AKT蛋白、p-AKT/AKT 比值均显着高于正常组（P<0.01）,主动脉p-eNOS-Ser1177 蛋白、p-eNOS-Ser1177/eNOS 比值、p-AMPK 蛋白、p-AMPK/AMPK比值、p-PI3K 蛋白、p-PI3K/PI3K 比值、Ampk-mRNA、PI3K-mRNA、eNos-mRNA均显着低于正常组（P<0.01或P<0.05）。艾烟组的主动脉p-eNOS-Thr1177 蛋白、p-eNOS-Thr1177/eNOS 比值、p-AMPK 蛋白、p-AMPK/AMPK比值、Ampk-mRNA、eNos-mRNA均显着高于模型组（P<0.01）,主动脉p-eNOS-Thr495 蛋白、p-eNOS-Thr495/eNOS 比值、p-AKT 蛋白、p-AKT/AKT 比值均显着低于模型组（P<0.01）。滤过艾烟组的主动脉p-eNOS-Thr1177 蛋白、p-eNOS-Thr1177/eNOS 比值、p-AMPK蛋白、p-AMPK/AMPK比值、Ampk-mRNA、eNos-mRNA均显着高于模型组（P<0.01或P<0.05）,主动脉 p-eNOS-Thr495 蛋白、p-eNOS-Thr495/eNOS 比值、p-AKT 蛋白、p-AKT/AKT比值均显着低于模型组（P<0.01）。艾绒挥发组的主动脉Ampk-mRNA、eNos-mRNA均显着高于模型组（P<0.05）,主动脉主动脉 p-eNOS-Thr495 蛋白、p-eNOS-Thr495/eNOS 比值、p-eNOS-Thr1177 蛋白、p-eNOS-Thr1177/eNOS 比值、p-AKT蛋白、p-AKT/AKT 比值均显着低于模型组（P<0.01 或P<0.05）。艾叶精油组的主动脉 p-eNOS-Thr495 蛋白、p-eNOS-Thr495/eNOS 比值、p-eNOS-Thr1177蛋白、p-AKT蛋白、p-AKT/AKT比值均显着低于模型组（P<0.01或P<0.05）。结论:1.艾烟、滤过艾烟可以良性调节脂质代谢、改善内皮细胞功能,从而减缓AS的进展,且二者疗效相当;即艾烟中的颗粒物在此过程中无显着作用,可能并不是艾灸起效的关键成分。2.与艾烟比较,一定浓度的艾绒挥发物、艾叶精油对于调节脂质代谢、减轻主动脉病变、改善内皮功能疗效欠佳;即艾绒的燃烧可能是艾灸起效的关键环节。3.艾烟、滤过艾烟通过激活AMPK蛋白的磷酸化,促进eNOS蛋白的Ser1177位点磷酸化及Thr495位点去磷酸化,提升NO水平以调节血管活性,可能是艾烟及滤过艾烟改善内皮功能的机制之一。
哈略[4]（2020）在《艾灸及艾烟改善动脉粥样硬化的细胞自噬机制研究》文中研究表明背景:动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）是多种心脑血管疾病的主要病理基础,是一种以粥样斑块为显着特征的慢性病理过程,在中医理论上属于“痰”、“瘀”的范畴,属于艾灸疗法的适应症范围。艾灸疗法改善AS的临床及机制研究已有大量报道,为艾灸抗AS的安全性和有效性提供了一定的科学依据。现代研究证明,艾灸可以通过改善AS过程中的脂质代谢、炎症反应、氧化应激、血小板活化以及内皮细胞功能多个方面,起到多靶点治疗AS的作用。艾烟是艾灸起效的重要因素之一,课题组前期研究也证明了艾烟在抗AS中不可替代的作用。细胞自噬是机体中的一项重要促存活机制,与AS各种发病机制均有深入的联系,也是近年来抗AS治疗中新的靶点和焦点。学者们认为自噬不足及过度自噬都会对AS的病理进程产生不利影响,这一现象反映了中医理论中阴阳平衡、对立统一的理念,同时自噬在微观层面上改善能量代谢、清除病理产物的作用与气的“气化”和“驱邪外出”等功能具有高度一致性。因此,已有不少学者着手研究中医药疗法调控自噬,改善心血管疾病的机制,并且取得了一定的成果。针刺、艾灸调控自噬防治心血管疾病的研究已有报道,但直接观察艾灸调控自噬对AS的研究还亟待开展。文献报道及课题组前期研究发现,艾灸对自噬通路及相关自噬蛋白展现出确切的调控作用,课题组预实验结果也体现了艾灸对AS过程中自噬的确切调控作用。基于上述基础,我们提出假说,艾灸及艾烟可以通过调控AS过程中的自噬功能,来实现防治AS的作用。目的:观察艾灸及艾烟两种干预手段对AS动物模型的影响,从病理改变、脂质代谢、斑块稳定性等方面探讨艾灸及艾烟防治AS的效应,然后通过对自噬特异性、自噬信号通路及凋亡水平等方面指标观察,从自噬角度探讨艾灸防治AS的作用机制。方法:54只8周龄ApoE载脂蛋白基因敲除小鼠按照随机数字表方法随机分为三组:模型组、艾灸组和艾烟组。18只同龄C57BL/6小鼠作为空白对照。艾灸组小鼠每日抓取,固定,予以艾灸膻中穴治疗,每次20 min,每日1次,每周6次,共干预12周。艾烟组小鼠每日接受固定浓度的艾烟暴露。模型组和空白组每日抓取固定,但不予任何干预。采用血液生化方法检测血脂四项（TC、TG、HDL、LDL）,采用Elisa法检测VLDL、ApoA1及ox-LDL,分别使用油红“O”和HE染色法观察主动脉病理切片。采用Masson染色法处理主动脉切片,计算ELA、CA、CD68、FCT、Ⅵ等斑块稳定性指标。采用免疫组化法检测主动脉内TNF-α、P38MAPK、NF-κB蛋白表达,采用Elisa法检测主动脉内MMP-2、MMP-9、TIMP-1。使用透射电镜观察血管内皮自噬小体数目,使用 Western blot 法检测小鼠主动脉 P62、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Atg5、Atg12 蛋白表达,使用免疫荧光法检测小鼠主动脉及肝脏P62、Beclin-1、LC3-Ⅱ表达。使用Western blot法及RT-PCR方法观察自噬信号通路p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR、PI3K在蛋白及mRNA水平上的的表达,使用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3表达。结果:1.AS病理进程及血脂水平模型组小鼠经过12周高脂喂养,体内存在较为明显的AS病变（血脂紊乱,AS斑块形成）;与空白组相比,小鼠血清TC（P<0.01）、TG（P<0.01）、LDL（P<0.01）、VLDL（P<0.01）显着升高,载脂蛋白ApoA1（P<0.05）及HDL（P<0.01）含量显着下降。以上AS常规指标结果提示本次研究AS模型建立成功。相比于模型组,经过12周的干预治疗,艾灸组小鼠体内AS病理改变减轻（血脂紊乱减轻、主动脉斑块缩小、内皮损伤改善）;艾灸组小鼠血清TC（P<0.01）、TG（P<0.01）、LDL（P<0.05）、VLDL（P<0.01）显着下降,载脂蛋白ApoA1及HDL含量有升高趋势,但无显着差异（P>0.05）。艾烟组小鼠体内AS病理改变减轻（血脂紊乱减轻、主动脉斑块缩小、内皮损伤改善）;艾烟组小鼠血清 TC（P<0.05）、TG（P<0.05）、VLDL（P<0.05）显着下降,LDL含量有下降趋势,但无显着差异（P>0.05）。载脂蛋白ApoA1及HDL含量有升高趋势,但无显着差异（P>0.05）。2.斑块稳定性相比于模型组,经过12周的干预治疗,艾灸组小鼠体内CA（P<0.01）、FCT（P<0.01）水平显着升高,ELA（P<0.01）水平显着下降,斑块易损指数Ⅵ（P<0.05）显着降低;炎症因子 TNF-α（P<0.05）、NF-κB（P<0.05）、MMP-9（P<0.05）、MMP-2（P<0.05）水平显着下降,TIMP-1（P<0.05）水平显着升高。艾烟组小鼠体内CA（P<0.01）、FCT（P<0.01）水平显着升高,ELA（P<0.01）水平显着下降,易损斑块指数Ⅵ（P<0.05）显着降低;炎症因子TNF-α（P<0.05）、MMP-9（P<0.05）、MMP-2（P<0.05）水平显着下降,TIMP-1水平升高但无统计学差异（P>0.05）。3.自噬特异性相比于模型组,经过12周的干预治疗,电镜下艾灸组小鼠主动脉内皮自噬小体及自噬溶酶体显着增多。Western blot显示艾灸组小鼠主动脉促自噬蛋白Beclin-1（P<0.01）、LC3-Ⅱ/LC-Ⅰ比值（P<0.01）、Atg12（P<0.05）显着升高,Atg5表现出升高趋势,但无统计学差异（P>0.05）;自噬抑制蛋白P62（P<0.01）显着降低。免疫荧光显示艾灸组小鼠主动脉Beclin-1（P<0.05）、LC3-Ⅱ（P<0.05）表达显着增强。艾灸组小鼠肝脏内Beclin-1（P<0.05）、LC3-Ⅱ（P<0.05）显着升高,P62 表达无显着差异（P>0.05）。相比于模型组,经过12周的干预治疗,电镜下艾烟组小鼠主动脉内皮细胞自噬小体及自噬溶酶体显着增多。Western blot显示艾烟组小鼠主动脉促自噬蛋白Beclin-1（P<0.01）、LC3-Ⅱ/LC-Ⅰ 比值（P<0.05）、Atg12（P<0.05）显着升高,Atg5 表现出升高趋势,但无统计学差异（P>0.05）;自噬抑制蛋白P62（P<0.01）显着降低。免疫荧光显示艾烟组小鼠主动脉Beclin-1（P<0.05）、LC3-Ⅱ（P<0.05）表达显着增强。艾烟组小鼠肝脏内Beclin-1、LC3-Ⅱ、P62表达与模型组无显着差异（P>0.05）。4.PI3K/Akt/mTOR 信号通路结果显示,相比于模型组,经过12周的干预治疗,艾灸组小鼠主动脉内p-Akt/Akt比值（P<0.01）、p-mTOR/mTOR/比值（P<0.01）显着下降,PI3K相对表达量无显着差异（P>0.05）。相比于模型组,经过12周的干预治疗,艾烟组小鼠主动脉内p-mTOR/mTOR/比值（P<0.01）显着下降、p-Akt/Akt比值有下降趋势,但无显着差异（P>0.05）,PI3K相对表达量无显着差异（P>0.05）。RT-PCR结果显示,相比于模型组,艾灸组小鼠mTOR mRNA及AktmRNA含量显着下降（P<0.05）。相比于模型组,艾烟组小鼠mTOR mRNA含量显着下降（P<0.05）,AktmRNA有下降趋势,但无统计学差异（P>0.05）。5.细胞凋亡蛋白相比于模型组,经过12周的干预治疗,艾灸组小鼠主动脉内Bcl-2蛋白含量显着升高（P<0.05）,Caspase-3蛋白含量显着下降（P<0.05）。相比于模型组,经过12周的干预治疗,艾烟组小鼠主动脉内Caspase-3蛋白含量显着下降（P<0.05）,Bcl-2蛋白含量有升高趋势,但无统计学差异（P>0.05）。结论:1.艾灸和艾烟都可以改善AS小鼠体内病理进展,减轻炎症反应,纠正血脂紊乱,增强斑块稳定性。2.艾灸和艾烟都可以上调AS小鼠体内自噬水平,艾灸改善自噬是艾灸防治AS的全新靶点。3.艾灸及艾烟可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路中的相关活性分子,从而提升细胞内自噬水平,起到延缓AS病理进程,改善斑块稳定性的作用。4.艾灸及艾烟通过上调Bcl-2、下调Caspase-3蛋白表达,抑制细胞凋亡,展现出一定的调控自噬/凋亡平衡的作用。5.艾灸和艾烟的调节作用基本一致,在调控血脂方面艾灸干预的效果优于艾烟干预。
张艳秋[5]（2020）在《体外制备血栓经介入术建立犬急性冠状动脉闭塞动物模型》文中研究指明目的:探讨经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的应用,旨在研究体外模拟制作的犬冠状动脉混合血栓,建立犬急性冠状动脉闭塞的实验模型的实验研究。方法:随机选择14只年龄在10-13个月的健康比格犬。根据闭塞时间的长短,将犬随机分为两个术后2h组（第1组）和术后4h组（第2组）,每组7只。术前抽取静脉血（VB）,体外制备混合血栓,通过PCI置入冠状动脉内,建立犬急性冠状动脉闭塞的动物模型。术后第1组和第2组均接受常规心电图（ECG）和肌钙蛋白T（cTnT）检查;收集超声心动图LVESV,LVEDV,LVEF和FS的数据;心肌造影超声心动图（MCE）:使用Q-lab确定心肌灌注参数（A,β和MBF（A×β））的值;处死后心肌用HE染色。结果:犬的VB体外成功制备以血纤蛋白网和活化血小板为主的混合血栓。混合血栓置入冠状动脉后,DSA显示TIMI 0级,心电图显示所有犬的ST段抬高。第1组与术前比cTnT没有增加,第2组与术前比cTnT增加（P<0.05）。超声心动图和MCE显示,第1组和第2组LVEF,FS和MBF值均低于术前（P<0.05）。与术前相比,手术后的LVEDV和LVESV值升高。术后1、2组HE染色显示,心肌细胞排列整齐。结论:犬的静脉血在体外成功模拟制备混合血栓,应用PCI术将混合血栓置入冠状动脉内成功建立犬急性冠状动脉闭塞的实验模型。
马素豪[6]（2019）在《辽藁本对动脉粥样硬化家兔的疗效及Th1/Th2免疫平衡轴的作用机制探究》文中研究表明目的:本研究运用辽藁本对于AS家兔进行动物实验干预,通过检测动脉粥样硬化家兔血清中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10水平含量,研究辽藁本是否通过调节细胞因子水平干预影响Th1/Th2的免疫平衡,以探究其在动脉粥样硬化治疗中的作用机制。材料与方法:雄性日本大耳白兔50只随机分为两组,即:空白组10只、模型组40只。适应性喂养7天后,空白组继续给予正常饮食,任何干预均不进行。模型组进行高脂喂养,4周后进行颈动脉球囊损伤术。术后四周在模型组中随机选择8只确定造模是否成功,造模成功后将模型组随机分为模型组和辽藁本组两个亚组。辽藁本组每日灌胃一次,给药量为辽藁本提取物0.38g/kg;模型组每日蒸馏水灌胃。治疗4周后,耳缘静脉取血,麻醉处死后取颈动脉组织,使用HE染色法检测各组家兔颈动脉粥样硬化斑块组织学变化,使用酶联吸附（ELISA）法测定血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10的含量;采用全自动生化仪检测血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）含量。结果:1.与空白组比较,模型组家兔的TG、TC、HDL、LDL均显着升高（P<0.05）;经辽藁本干预后,辽藁本组TG、TC、HDL、LDL均较模型组降低,结果具有统计学意义（P<0.05）。2.显微镜下HE染色图片中观察到的组织形态学变化,（1）空白组:颈动脉厚度均匀,内膜光滑,结构完整,内皮细胞无损伤。（2）模型组:动脉壁厚度不同,且不均匀。形成了明显的动脉粥样硬化斑块。内皮细胞受损、脱落、内膜增生,内膜下可见大量泡沫细胞和少量细胞碎片。（3）辽藁本组:观察到纤维斑块增生速度降低,膜下泡沫细胞积累减少。3.辽藁本对AS家兔血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10的影响,血清ELISA结果显示:与空白组比较,模型组的TNF-α、IL-6、IL-8明显升高（P<0.05）,IL-10明显降低（P<0.05）;经过辽藁本干预后,辽藁本组的较模型组TNF-α、IL-6、IL-8明显降低（P<0.05）,IL-10明显升高（P<0.05）。结论:1.辽藁本可以有效改善AS家兔颈动脉斑块组织形态学表现。2.辽藁本可以有效改善AS家兔血脂异常情况。3.辽藁本可以调节AS家兔血清中的细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10的表达,干预Th1/Th2平衡轴,达到治疗AS的作用。4.辽藁本可以通过调节免疫系统来干预家兔的动脉粥样硬化。
张晔青[7]（2019）在《白藜芦醇通过miR-138对内皮祖细胞迁移及成血管功能的影响和调控机制的实验研究》文中研究指明深静脉血栓（Deep vein thrombosis,DVT）是指血液在深静脉内异常凝集。促使深静脉血栓形成的发生因素包括内皮受损、血流动力学改变和高凝状态等,是目前临床上的常见疾病之一。深静脉血栓形成的14天之内为急性期,病程在15-30天的为亚急性期DVT,而病程超过30天为慢性期DVT。通常急性期深静脉血栓形成可能进展为股青肿,如下肢血栓脱落,则有引起肺动脉栓塞（pulmonary embolism,PE）的风险。血栓机化后则可能形成血栓形成后综合征（post-thrombotic syndrome,PTS）,表现为下肢肿胀、色素沉着、下肢皮肤溃疡等临床表现,严重影响患者生活质量。内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells,EPCs）可转化为成熟内皮细胞,其可参与新生血管和受损内皮修复过程,在血栓机化及血管新生的过程中发挥重要作用。前期已有的实验研究已经发现,骨髓来源内皮祖细胞（Bone marrow-derived endothelial progenitor cells,BMEPCs）可以分化为成熟血管内皮细胞,外源性内皮祖细胞可以改善静脉血栓内的微环境,有利于急性期血栓及慢性期机化血栓的溶解。与此同时,由于移植到体内的内皮祖细胞在增殖和迁移能力上尚存在一定欠缺,限制了其对深静脉血栓的治疗作用。因此,调控内皮祖细胞的生物学功能,促进其在体内发挥作用,是目前相关研究的热点。白藜芦醇最初来源于植物中的多酚类化合物,可从葡萄、浆果、花生等植物中提取出。已有的研究证实白藜芦醇具有抗细菌、抗真菌、抗肿瘤和抗炎等功效。在法国,由于人们日常饮用葡萄酒引起其心血管疾病的发病率较其他的欧洲国家明显降低,这种现象被称作“法国悖论”（French Paradox）。后续的研究结果表明了白藜芦醇具有心血管系统保护,血脂调节、血小板抑制聚集等多种作用。此外,有报道显示白藜芦醇在抑制肿瘤活性方面也发挥着一定的作用。但白藜芦醇对内皮祖细胞的生物学功能变化影响及其可能的作用机制较少报道。微小RNA（microRNA,miRNA）是近年来研究的热点之一,微小RNA是长度约为22-24个核苷酸序列。已有的研究证明miRNA在多种生物学功能调节中均发挥着重要的作用。本实验中将分析白藜芦醇通过调控miRNA-138对内皮祖细胞参与血管形成等生物学功能的作用及移植后对血栓的机化再通作用。该研究进一步揭示内皮祖细胞移植治疗血栓作用的机制,并为缺血性疾病的细胞治疗研究提供重要的理论依据。第一部分人外周血来源内皮祖细胞的分离、培养和鉴定目的:分离、培养和鉴定人外周血来源的内皮祖细胞（Peripheral blood-derived endothelial progenitor cells,PBEPCs）,所获细胞用于后续实验。方法:采用密度梯度离心法获得人外周血来源的单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMCs）,所获细胞在EGM-2MV培养基中培养,利用差速贴壁法将所获得单个核细胞定向诱导分化为内皮祖细胞,记录细胞形态学特征,运用CCK-8增殖试验检测细胞增殖能力,检测鉴定细胞表面标志物,Dil-Ac-LDL与FITC-UEA-1双荧光染色检测细胞特性。结果:PBMCs培养24小时后,可见贴壁细胞形态呈椭圆形、棒状,形态不一;继续培养一周以后,可见细胞形成集落,细胞形态呈现长梭形或纺锤形、鹅卵石形;培养两周后,细胞数量增加,集落消失,细胞形态呈典型鹅卵石样外观。双荧光染色显示细胞可以吞噬Dil-Ac-LDL与FITC-UEA-1。流式细胞学检测显示细胞可表达CD34、CD31、VEGFR2等表面标志物。结论:密度梯度离心法与差速贴壁法相结合可以得到人外周血来源的内皮祖细胞,所获细胞纯度较高,可用于细胞及动物实验。第二部分白藜芦醇对内皮祖细胞生物学功能的影响和相关机制研究目的:探讨白藜芦醇对人外周血来源的内皮祖细胞生物学功能的影响。方法:1.使用不同浓度的白藜芦醇对EPCs进行处理,在光镜下观察细胞形态学特点、使用流式细胞检测表面标志物变化,细胞增殖实验检测不同浓度下白藜芦醇对EPCs增殖能力影响。2.选定特定浓度下的白藜芦醇,通过划痕试验评估白藜芦醇对内皮祖细胞迁移功能的影响。3.通过成血管试验评估白藜芦醇对内皮祖细胞成血管功能的影响。4.PCR检测白藜芦醇处理后EPCs中miR-138的表达含量,评估白藜芦醇调控EPCs生物学功能的作用机制:共分为以下四组:A:NC mimics、B.miR-138mimics、C.NC inhibitor、D.miR-138 inhibitor,检测四组中EPCs的成血管以及迁移能力改变。5.先运用生物信息网站预测miR-138的靶基因,而后在所获得的靶基因中运用荧光素酶报告基因实验、q RT-PCR和Westernblots等实验证实miR-138的靶基因。6.改变EPCs中靶基因的表达含量,观察对EPCs生物学功能的影响。结果:1.白藜芦醇对EPCs的增殖起着促进作用,并随着浓度的增加对EPCs的增殖能力呈现先增加后降低的作用,其中当白藜芦醇在50μM时对EPCs的增殖促进作用最佳;2.与正常组相比,白藜芦醇组可以促进EPCs的迁移能力,划痕试验提示在24及48小时白藜芦醇组的EPCs迁移能力均高于对照组。3.与正常组相比,白藜芦醇组可以促进EPCs的成血管能力,成血管实验显示白藜芦醇组的EPCs成血管数量以及血管长度均高于对照组。4.白藜芦醇可以降低EPCs中miR-138的表达含量,且这种抑制作用在白藜芦醇加入6小时差异显着。5.在白藜芦醇预处理的EPCs改变miR-138的表达,可以调控EPCs的生物学功能,上调miR-138的表达水平,EPCs成血管以及迁移能力受到抑制,下调miR-138的表达水平,EPCs成血管以及迁移能力得到提高。6.生物信息学预测点状黏附激酶（focal adhesion kinase,FAK）可能是靶基因,白藜芦醇通过miR-138/FAK通路调控EPCs的生物学功能。结论:1.白藜芦醇可以促进EPCs的增殖,50μM浓度的白藜芦醇对EPCs的增殖促进作用最佳。2.白藜芦醇促进EPCs的成血管以及迁移能力。3.白藜芦醇可以改变EPCs中miR-138的表达含量,并通过调控miR-138来改变EPCs的生物学功能。4.FAK是miR-138的靶基因,白藜芦醇通过miR-138/FAK通路调控内皮祖细胞的生物学功能。第三部分白藜芦醇调控内皮祖细胞对静脉血栓溶解再通的影响目的:研究白藜芦醇调控内皮祖细胞后对静脉血栓溶解再通的作用。方法:1.建立裸大鼠深静脉血栓模型,将所建立模型分为三组:A组（10只）,空白对照组,移植1ml PBS;B组（10只）,EPCs组,移植1ml含有1×106EPCs的PBS细胞悬液;C组（10只）,EPCs/RSV组,经尾静脉注入1ml含有1×106经白藜芦醇预处理的EPCs的PBS细胞悬液。术后7天收集血栓标本,通过血栓称重、HE染色、数字减影血管造影等方法检测血栓溶解再通。结果:1.收集各实验组中血栓标本,经过血栓称重显示:C组中血栓重量最轻,B组和C组血栓重量较空白对照组均有明显减轻。2.HE染色比较各实验组中血栓溶解再通情况,结果显示C组中新生血管含量最多,溶解再通情况最好。3.数字减影血管造影比较各实验组下腔静脉血流情况,显示相较于空白对照组（A组）,B组及C组均有明显血流恢复,且C组血流恢复情况最好。结论:白藜芦醇能够调控EPCs的归巢能力,参与到血栓的溶解再通过程中,且经过白藜芦醇处理的EPCs表现出较强的血栓溶解能力。
栾海燕[8]（2019）在《针刺对“痰瘀毒”致动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞脂质沉积的影响》文中研究指明目的:通过观察针刺对动脉粥样硬化家兔血脂、血液流变学、炎症因子水平、氧化应激标志物、腹腔巨噬细胞脂质沉积情况的影响,探究针刺治疗动脉粥样硬化的作用机理,为针刺治疗动脉粥样硬化提供实验依据。材料与方法:26只雄性新西兰兔（2-3月龄,2-2.5kg/只）适应性喂养1周后,随机分为空白组和造模组,其中空白组7只,造模组19只。空白组以标准兔饲料喂养,造模组高脂喂养4周后,行颈动脉球囊损伤术,术后继续高脂喂养。4周后,随机从空白组和造模组中各取一只家兔,采用HE染色观察家兔颈动脉病理形态学变化,确认造模成功。然后将造模组余下的18只兔随机分为模型对照组、电针治疗组（AS模型+电针）、阳性对照组（AS模型+阿托伐他汀钙片）,每组6只。空白组不施加干预因素,以标准兔饲料喂养;模型组不予任何治疗,继续高脂喂养;电针组给予电针内关、足三里、关元穴处理,药物组给予含阿托伐他汀钙片的混悬液灌胃,治疗结束取材后,采用化学法检测血液中血脂含量;使用全自动血液流变仪检测血流变指标;应用酶联免疫吸附法测定血清CRP、TNF-α、IL-6、ox-LDL含量;硫代巴比妥酸法测定MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力;采用免疫组化法检测腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的蛋白表达,油红O染色观察腹腔巨噬细胞内脂质沉积情况。结果:1.HE染色结果模型评价:显微镜下观察颈动脉,可见空白组颈动脉结构正常,内皮完整,未见炎性细胞浸润及泡沫细胞形成;造模组动脉内膜明显增厚,内膜下可见大量泡沫细胞聚集,提示AS造模成功。治疗结果:与空白组比较,模型对照组动脉内膜明显增厚、结构受损,可见炎症细胞浸润,泡沫细胞聚集,粥样斑块形成;与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组粥样斑块面积明显减小。2.血脂水平与空白组比较,模型对照组TG、CHO、LDL-C均明显升高（P<0.01）;HDL-C明显降低（P<0.01）,与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组CHO、TG、LDL-C含量降低（P<0.01）,HDL-C明显升高（P<0.01）。3.血液流变学指标与空白组比较,模型对照组全血黏度（高切、中切、低切）,毛细管血浆粘度,全血还原粘度（高切、中切、低切）,红细胞聚集指数,红细胞压积均明显增高（P<0.01）。与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组全血黏度（高切、中切、低切）,毛细管血浆粘度,全血还原粘度（高切、中切、低切）,红细胞聚集指数,红细胞压积均明显降低（P<0.01）。4.炎症因子水平与空白组比较,模型对照组CRP、TNF-α、IL-6均明显升高（P<0.01）;与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组CRP、TNF-α、IL-6含量降低（P<0.05或P<0.01）。5.氧化应激标志物水平与空白组比较,模型对照组SOD含量明显降低（P<0.01）,ox-LDL、MDA含量升高（P<0.01）;与模型组对照比较,电针治疗组、阳性对照组的SOD含量升高（P<0.01）,ox-LDL、MDA含量降低（P<0.01）。6.腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的蛋白表达水平与空白组比较,模型对照组的腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1蛋白的表达均明显升高（P<0.05）;与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组的腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1蛋白的表达均明显降低（P<0.05）。7.腹腔巨噬细胞脂质沉积情况与空白组比较,模型对照组巨噬细胞内脂滴明显增多;与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组巨噬细胞内脂滴明显减少。结论:1.针刺能有效调节动脉粥样硬化家兔血脂水平和血液流变学指标,有改善血脂代谢和血液流变学的作用。2.针刺能有效调节动脉粥样硬化家兔炎症因子水平和氧化应激标志物,有一定的抗炎、抗氧化作用。3.针刺能减少动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的蛋白表达,减少巨噬细胞内脂质蓄积,抑制泡沫细胞形成,从而治疗动脉粥样硬化。
张昭华[9]（2019）在《辽藁本抗动脉粥样硬化的实验研究》文中进行了进一步梳理目的:评价辽藁本对动脉粥样硬化模型兔血脂、C反应蛋白、血流变等指标的调节能力,观察辽藁本对兔颈总动脉的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的可能作用机制。材料与方法:将雄性日本大耳白兔适应性饲养1周后,随机分为空白组（10只）和模型组。空白组除外,模型组采用免疫损伤法、球囊手术法、高脂饲料饲养法完成动脉粥样硬化动物模型。随后将造模白兔随机分为模型组、辽藁本4倍临床等效剂量组（1.88g生药/kg）、辽藁本2倍临床等效剂量组（0.94g生药/kg）、中药阳性对照血脂康组,加上空白组白兔,共5组,每组10只。造模手术结束并肌注3天青霉素后开始灌胃给药,空白组、模型组给等量蒸馏水,每日1次,连续4周;其余各组分别给与相应剂量药物灌胃治疗,辽藁本4倍临床等效剂量组给与白兔1.88g生药/kg,辽藁本2倍临床等效剂量组给与白兔0.94g生药/kg,中阳组:在模型组基础上血脂康灌胃。每日1次,连续4周。治疗结束后,雄性白兔麻醉进行腹主动脉取血,收集血液检测甘油三酯（TG）测定、总胆固醇（TC）测定、高密度脂蛋白（HDL）测定、低密度脂蛋白（LDL）测定、高密度脂蛋白-2（HDL-2）、前β1高密度脂蛋白（preβ1-HDL）、C反应蛋白;收集全血与血浆做血液流变学检测;HE染色观察颈总动脉血管内皮组织病理形态学变化。结果:1.模型组白兔与空白组相比,TG、TC、LDL均有升高,具有显着性差异（P<0.05）,结合HE染色后模型组白兔病理学形态结果,表明成功建立了高脂血症及动脉粥样模型。但preβ1-HDL未见明显变化,说明该造模方式对preβ1-HDL影响不显着。2.辽藁本2倍临床等效剂量组（0.94g生药/kg）与模型组比较,能够显着降低LDL水平（P<0.05）,对TC、TG水平具有降低趋势（P>0.05）,但无显着性差异;辽藁本临床4倍等效剂量组（1.88g生药/kg）与模型组比较,能够显着降低TC、LDL水平（P<0.05）,对TG水平具有降低趋势（P>0.05）,但无显着性差异;辽藁本2倍临床等效剂量组、辽藁本临床4倍等效剂量组、血脂康组与空白组相比,HDL、HDL2显着升高,具有显着差异性（P<0.05）;辽藁本2倍临床等效剂量组、辽藁本临床4倍等效剂量组与模型组相比,HDL2含量有升高趋势,但无显着差异性（P>0.05）,HDL含量无明显变化。3.造模后模型组白兔与空白组比较,血清中C反应蛋白均显着性增高,具有显着性差异（P<0.05）;辽藁本2倍临床等效剂量组、辽藁本4倍临床等效剂量组与模型组比较,C反应蛋白含量显着性降低（P<0.05）。4.造模之后模型组与空白组相比较,全血的高切、中切、低切以及血浆粘度、红细胞聚集指数均显着升高（P<0.05）;辽藁本2倍临床等效剂量组、辽藁本4倍临床等效剂量组与模型组比较,全血高切、中切、低切、血浆粘度、红细胞聚集指数、显着降低,（P<0.05）。5.空白组颈总动脉动脉管壁厚度均匀,内膜光滑,结构完整,内皮细胞无损伤,未见明显病变;模型组动脉管壁厚度不一,凹凸不平,可见明显的粥样斑块形成,内皮细胞损伤、脱落,内膜增生,内膜下可见大量泡沫细胞和少量细胞碎片;血脂康组可见大量纤维斑块增生,内皮细胞脱落;辽藁本2倍临床等效剂量组可见大量纤维斑块不规则增生,泡沫细胞出现变性;辽藁本4倍临床等效剂量组可见少量纤维斑块增生,内膜下泡沫样细胞堆积程度明显减轻。结论:辽藁本具有明确调节白兔血脂的作用;辽藁本对AS白兔具有明确降低C反应蛋白作用;辽藁本对AS白兔具有明确改善血液流变学的作用;辽藁本对AS白兔具有改善病理形态学变化作用。
彭东华[10]（2019）在《益气活血复方干预家兔动脉粥样硬化的抗炎稳斑作用机理研究》文中研究指明目的:本实验研究通过建立新西兰白兔AS动物模型,观察益气活血复方对AS白兔抗炎稳斑的作用机理,检测和动脉粥样硬化相关指标血脂、NF-κB、VCAM-1、MCP-1、内皮因子及纤溶系统等。通过实验探究益气活血复方对AS所产生抗炎稳斑干预效果以及机理,对临床应用中医药进行防治AS提供实验依据和理论基础。材料与方法:1.取健康体重2.5±0.5kg的雄性新西兰大白兔40只,通过进行适应性的喂养1周,再从中随机抽取出8只作为正常组,以普通的基础兔饲料进行实验喂饲。其余32只白兔进行颈总动脉球囊损伤术,在手术之后以高脂饲料进行喂饲四周时间,在术中和术后其家兔的死亡数量共是8只。剩余的24只新西兰兔随机进行分成有模型组（n=8）、辛伐他汀组（n=8）与益气活血复方组（n=8）。实验给药组于每日早晨,仅进行喂饲药物饲料,待饲用完毕,给予充足的高脂饲料（每日每只120g）进行喂饲;模型组喂以高脂饲料;正常组仅以普通饲料喂养。实验组白兔于每周进行称体重1次,按照白兔体重再进行调整各组白兔的用药量,实验研究共给药时间为4周。分别于该实验的第0周、4周、8周末进行实验采血,并与第8周末处死实验动物之后,进行取材,切片等操作。2.使用全自动生化分析仪经行检测每组动物其在第0、4、8周末血浆的TG、TC、HDL-C及LDL-C水平;3.观察每组实验于第8周末的受损血管经过苏木素-伊红（HE）染色的组织病理变化情况以及对球囊损伤兔颈总AS模型的建立、益气活血法对受损血管内膜增殖的作用进行评价;4.使用RT-PCR法检测各组颈动脉NF-κB、VCAM-1、MCP-1 mRNA表达;5.使用免疫组化法进行测定每组内颈动脉NF-κB、VCAM-1、MCP-1蛋白的表达;6.使用分光光度法进行测定实验在第8周末血浆的一氧化氮（NO）水平;7.使用ELISA法进行测定实验在第8周末血浆的内皮素-1（ET-1）含量;8.使用ELISA法进行检测每组白兔其第0周、4周、8周末血浆的t-PA、PAI-1、TF含量。结果:1入选时每组动物血脂水平、体重没有差异且符合正态分布（以0周表示）。第4周末,高脂喂养兔血浆中TC、TG、LDL-C水平,经计算TC/HDL-C和LDL-C/HDL-C比率均高于空白对照组,且此种差异性显着（P<0.01）,4者中LDL-C、TC变化的幅度更为明显;HDL-C低于空白对照组（P<0.05）;益气活血复方具有很好的降脂效果显着,在实验的第8周末,通过运用益气活血复方可降低TC、TG、LDL-C分别为38.3%、31.6%和50.1%,明显升高HDL-C 160.9%,降低TC/HDL-C和LDL-C/HDL-C比值达62%和89%,辛伐他汀在降低TC、LDL-C水平上比益气活血复方明显（P<0.05）。益气活血复方在升高HDL-C上则有明显优势（P>0.05）。两组间于TG作用无明显差别（P>0.05）。2主动脉球囊损伤加高脂喂养的方法证实成功复制AS模型,且益气活血复方对内膜增生存在显着的抑制作用。3益气活血复方对于炎症因子的水平存在着显着阻碍效果:于实验的第8周末,每组动物颈动脉的组织内NF-κB、VCAM-1、MCP-1 mRNA于对照组的水平下降,其中模型组的含量最高,比辛伐他汀组及益气活血复方组存在着明显统计学意义（P<0.05）,益气活血复方组及辛伐他汀组之间NF-κB、VCAM-1、MCP-1 mRNA水平的差别没有统计学的意义;和模型组进行比较可知,益气活血复方实验组内的NF-κB、VCAM-1、MCP-1蛋白呈现显着降低,差异存在统计学意义（P<0.O5）,而益气活血复方组和辛伐他汀组之间相比血管壁内NF-κB、VCAM-1、MCP-1蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。4.益气活血复方在使NO的分泌与合成的同时,还能够减少ET-1的显现,对于体内NO/ET-1平衡存在促进效果,可保护EC的能力:在实验进行的第8周末,模型组内动物血浆的NO水平较之正常组能够显着下降,差异存在显着性（P<0.01）;辛伐他汀组与益气活血复方组内动物血浆的NO水平与模型组相比结果上升显着（P<0.01）;益气活血复方组内白兔的血浆内NO水平上升程度能够比辛伐他汀组效果显着（P<0.01）;在经过球囊损伤后的第8周末,使用ELISA法进行测定模型组内白兔血浆内的ET-1含量和正常组相比能够显着增多;通过和模型组进行比较,能够得出益气活血复方组、辛伐他汀组的白兔血浆ET-1水平减低明显（P<0.05）,但二组间无显着性差异（P>0.05）。5球囊受损不仅可以影响纤溶系统在体内的稳定状态,并且可以有利于组织因子的表达,引起血栓在体内产生,益气活血复方能够稳定纤溶系统,并且起到抗凝、抗血栓的效果:在实验的第8周末,模型组内PAI-1含量继续上升,反之使用益气活血复方与辛伐他汀的实验组血浆PAI-1的含量分别能够比模型组减少48%与44.7%,差异存在显着性（P<0.01）,而辛伐他汀与益气活血复方二组的PAI-1含量没有明显差异。在实验的第8周末,正常对照组内的t-PA含量和4周末相比没有显着差异性改变,模型组t-PA含量比4周末时减少显着（P<0.05）,同时其明显的能够较正常对照组含量减低（P<0.05）,辛伐他汀组、益气活血复方组中血浆内t-PA含量比模型组有明显增多趋势,并且其差异存在显着性（P<0.05）,这两组相比,血浆内t-PA含量前者比后者增加更加明显（P<0.05）。测定各时期内TF含量,在实验的第8周末,辛伐他汀组、益气活血复方组中TF含量比模型组减少明显（P<0.01）,二者对比TF含量没有明显差异（P>0.05）。结论:1.益气活血复方能够降低高脂血症新西兰兔血浆内TG、TC及LDL-C的含量,同时能升高血浆内HDL-C水平。2.益气活血复方可抑制AS内膜增生。3.益气活血复方能够抑制NF-κB、VCAM-1、MCP-1进行活化,使炎症因子水平降低,稳定斑块,防止动脉硬化形成。4.益气活血复方可促进血浆内NO的分泌及合成能力并能抑制ET-1的表达,有利于恢复NO/ET-1平衡,对内皮细胞有良好的保护作用,以减轻炎症损伤。5.益气活血复方可平衡体内纤溶系统,抑制组织因子释放,具有抗凝抗血栓形成的作用,以减少斑块的形成。
二、血小板血栓形成过程中脂蛋白(a)作用的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、血小板血栓形成过程中脂蛋白(a)作用的实验研究（论文提纲范文）
（1）艾灸及艾烟调节Rho/ROCK信号通路干预ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 动脉粥样硬化与Rho/ROCK信号通路 |
| 1. Rho/ROCK信号通路的构成 |
| 2. Rho/ROCK信号通路与AS的关系 |
| 3. 以Rho/ROCK信号通路为靶点的药物 |
| 4. ROCK抑制剂的应用 |
| 参考文献 |
| 综述二 艾灸及艾烟抗动脉粥样硬化作用的研究进展 |
| 1. 艾灸疗法治疗AS的机制研究 |
| 2. 艾烟治疗AS的机制研究 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一章 艾灸及艾烟对ApoE~(-/-)小鼠脂质代谢及一般状况的影响 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二章 艾灸及艾烟对ApoE~(-/-)小鼠主动脉病理结构的影响 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三章 艾灸及艾烟对ApoE~(-/-)小鼠Rho/ROCK信号通路的影响 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第四章 艾灸及艾烟对ApoE~(-/-)小鼠胆固醇逆向转运途径和炎症因子的影响 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 1. 动物模型的选择 |
| 2. 穴位的选择 |
| 3. 干预时间的选择 |
| 4. 其他干预组的设置 |
| 结语 |
| 创新与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（2）单纯收缩期高血压并脑梗死的中医证候特征及其lncRNA差异表达谱研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 理论探讨 |
| 一、中医学视角下单纯收缩期高血压并脑梗死的理论探讨 |
| (一)单纯收缩期高血压的中医理论探究 |
| (二)脑梗死的中医理论探究 |
| (三)单纯收缩期高血压并脑梗死的相关中医理论探究 |
| (四)血脉理论与单纯收缩期高血压并脑梗死探究 |
| 二、现代医学宏观视角下单纯收缩期高血压并脑梗死的理论研究 |
| (一)单纯收缩期高血压的流行病学研究 |
| (二)单纯收缩期高血压与脑梗死的相关性研究 |
| (三)脉压与脑梗死的相关性研究 |
| 三、LncRNA在高血压相关疾病的研究现状 |
| (一)LncRNA的定义、分类、功能机制 |
| (二)LncRNA与高血压的相关性研究 |
| (三)LncRNA与脑梗死的相关性研究 |
| (四)LncRNA与中医证型的相关性研究 |
| 第二部分 临床研究 |
| 一、研究目的 |
| 二、研究对象 |
| 三、诊断标准 |
| (一)单纯收缩期高血压诊断标准 |
| (二)脑梗死的诊断标准 |
| (三)中医辨证标准 |
| 四、纳入与排除标准 |
| (一)纳入标准 |
| (二)排除标准 |
| 五、研究方法 |
| (一)调查问卷的选择 |
| (二)中医证候的判定 |
| 六、数据处理及统计分析 |
| 七、研究结果 |
| (一)一般资料分析 |
| (二)受教育程度 |
| (三)慢性病相关病史 |
| (四)吸烟饮酒史 |
| (五)主要临床症状频率统计 |
| (六)证候分布聚类分析 |
| (七)中医证候在不同性别间的分布 |
| (八)中医证候在不同年龄段的分布 |
| (九)中医证侯与慢性病相关病史的分布 |
| (十)中医证候与理化指标的相关性分布 |
| 八、讨论 |
| (一)单纯收缩期高血压并脑梗死的中医病机演变规律 |
| (二)导师观点 |
| (三)聚类分析在中医证候中的应用 |
| (四)统计结果分析 |
| 十、结论 |
| 十一、局限性 |
| 第三部分 实验研究 |
| 第一节 单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者转录组测序分析 |
| 一、研究材料 |
| (一)研究对象 |
| (二)研究材料采集 |
| 二、研究方法 |
| (一)主要试剂与仪器 |
| (二)血浆总RNA的纯化 |
| (三)转录组测序(RNA-seq) |
| (四)转录组测序数据分析 |
| 三、研究结果 |
| (一)血浆总RNA浓度及纯度质控结果 |
| (二)转录组测序质控结果 |
| (三)转录组测序数据统计结果 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 第二节 单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者差异表达mRNA的生物信息学研究 |
| 一、研究材料 |
| 二、研究方法 |
| (一)差异表达mRNA的 GO分析 |
| (二)差异表达mRNA的 KEGG分析 |
| 三、结果 |
| (一)差异表达mRNA的 GO分析结果 |
| (二)差异表达mRNA的 KEGG分析结果 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 第三节 差异表达lncRNA的生物信息学研究 |
| 一、研究材料 |
| 二、研究方法 |
| (一)单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者差异表达lncRNA靶基因预测 |
| (二)lncRNA-mRNA共表达网络构建 |
| (三)差异表达lncRNA靶基因与mRNA取交集后的基因GO和 KEGG富集分析 |
| 三、结果 |
| (一)lncRNA靶基因预测结果 |
| (二)lncRNA-mRNA共表达网络 |
| (三)差异lncRNA预测的靶基因和差异mRNA交集并对交集后的mRNA做GO分析和KEEG分析结果 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 第四节 差异特定lncRNA与单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者相关性分析 |
| 一、研究对象 |
| 二、研究方法 |
| (一)主要试剂与仪器 |
| (二)扩大样本的qT-PCR验证特定lncRNA和 mRNA的表达 |
| (三)特定lncRNA、mRNA和血液相关指标回归分析 |
| (四)单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者和对照组间血液相关指标显着差异分析 |
| 三、结果 |
| (一)实时荧光定量PCR(qT-PCR)验证差异表达lncRNA、mRNA结果 |
| (二)特定lncRNA、mRNA和血液相关指标回归分析 |
| (三)单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者和对照组间血液相关指标显着性分析结果 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 发表论文 |
| 科研课题 |
（3）不同处理方式艾燃烧生成物调控ApoE-/-小鼠的血管内皮功能和机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 艾燃烧生成物的研究概况 |
| 综述二 艾灸及艾燃烧生成物治疗高脂血症并动脉粥样硬化的研究进展 |
| 综述三 血管内皮功能障碍与动脉粥样硬化的研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一章 不同处理方式艾燃烧生成物对ApoE~(-/-)小鼠脂质代谢影响的研究 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二章 不同处理方式艾燃烧生成物对ApoE~(-/-)小鼠主动脉病理影响的研究 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三章 不同处理方式艾燃烧生成物调控ApoE~(-/-)小鼠血管内皮功能影响的研究 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第四章 不同处理方式艾燃烧生成物对eNOS活化相关信号通路影响的研究 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 1. 关于本研究方案设计依据的讨论 |
| 1.1 关于实验动物的选择 |
| 1.2 艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组、艾叶精油组及相关参数的设置 |
| 2. 艾烟、滤过艾烟、艾绒挥发物及艾叶精油对AS疗效比较及分析 |
| 2.1 艾烟与滤过艾烟比较 |
| 2.2 艾烟与艾叶精油比较 |
| 2.3 艾烟与艾绒挥发物比较 |
| 结语 |
| 创新与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（4）艾灸及艾烟改善动脉粥样硬化的细胞自噬机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 细胞自噬在动脉粥样硬化发病机制中的作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 艾灸疗法防治高脂血症并动脉粥样硬化症的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述三 中医药疗法调控自噬机制防治心血管疾病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一章 艾灸及艾烟对APOE~(-/-)小鼠AS斑块、血脂及一般状况的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二章 艾灸及艾烟对APOE~(-/-)小鼠AS斑块稳定性的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三章 艾灸及艾烟对APOE~(-/-)小鼠自噬特异性的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第四章 艾灸及艾烟调控APOE~(-/-)小鼠自噬信号通路及细胞凋亡的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 1. 动物模型的选择 |
| 2. 艾灸疗法改善AS过程中自噬水平的作用机制 |
| 3. 艾灸改善自噬调控AS斑块稳定性的作用机制 |
| 4. 艾燃烧生成物的生物效应 |
| 结语 |
| 创新与展望 |
| 创新点 |
| 研究不足与未来研究方向 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（5）体外制备血栓经介入术建立犬急性冠状动脉闭塞动物模型（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1.动物伦理声明 |
| 2.动物分组 |
| 3.急性冠状动脉闭塞模型 |
| 4.统计分析 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 导师评阅表 |
（6）辽藁本对动脉粥样硬化家兔的疗效及Th1/Th2免疫平衡轴的作用机制探究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 实验一 辽藁本对于AS家兔疗效应用研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 小结 |
| 实验二 辽藁本对AS家兔血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10 的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 中西医学对动脉粥样硬化的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（7）白藜芦醇通过miR-138对内皮祖细胞迁移及成血管功能的影响和调控机制的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 人源性内皮祖细胞的分离培养和鉴定 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 白藜芦醇对内皮祖细胞生物学功能的影响和相关机制研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 白藜芦醇调控内皮祖细胞对静脉血栓溶解再通的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 研究创新与不足 |
| 综述 深静脉血栓形成的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间学术成果 |
| 英文缩略词表 |
| 致谢 |
（8）针刺对“痰瘀毒”致动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞脂质沉积的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 针刺对动脉粥样硬化家兔颈动脉组织形态学的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 针刺对动脉粥样硬化家兔血脂及血液流变学的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 针刺对动脉粥样硬化家兔炎症因子及氧化应激标志物的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文四 针刺对动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞脂质沉积的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述一 现代医学对动脉粥样硬化的认识及治疗 |
| 综述二 祖国医学对动脉粥样硬化的认识 |
| 综述三 针灸治疗动脉粥样硬化的实验研究 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（9）辽藁本抗动脉粥样硬化的实验研究（论文提纲范文）
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 动脉粥样硬化的发病机制及治疗进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（10）益气活血复方干预家兔动脉粥样硬化的抗炎稳斑作用机理研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 实验一 :益气活血复方治疗动脉粥样硬化疗效分析 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二 :益气活血复方抗AS的抗炎稳斑机理研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三 :益气活血复方对AS家兔血管内皮功能的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验四 :益气活血复方对AS家兔纤溶系统的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
四、血小板血栓形成过程中脂蛋白(a)作用的实验研究（论文参考文献）
- [1]艾灸及艾烟调节Rho/ROCK信号通路干预ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的机制研究[D]. 张瑞. 北京中医药大学, 2020(04)
- [2]单纯收缩期高血压并脑梗死的中医证候特征及其lncRNA差异表达谱研究[D]. 杨洁. 山东中医药大学, 2020(01)
- [3]不同处理方式艾燃烧生成物调控ApoE-/-小鼠的血管内皮功能和机制研究[D]. 姚琴. 北京中医药大学, 2020(04)
- [4]艾灸及艾烟改善动脉粥样硬化的细胞自噬机制研究[D]. 哈略. 北京中医药大学, 2020(04)
- [5]体外制备血栓经介入术建立犬急性冠状动脉闭塞动物模型[D]. 张艳秋. 新疆医科大学, 2020(07)
- [6]辽藁本对动脉粥样硬化家兔的疗效及Th1/Th2免疫平衡轴的作用机制探究[D]. 马素豪. 辽宁中医药大学, 2019(02)
- [7]白藜芦醇通过miR-138对内皮祖细胞迁移及成血管功能的影响和调控机制的实验研究[D]. 张晔青. 苏州大学, 2019(06)
- [8]针刺对“痰瘀毒”致动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞脂质沉积的影响[D]. 栾海燕. 辽宁中医药大学, 2019(01)
- [9]辽藁本抗动脉粥样硬化的实验研究[D]. 张昭华. 辽宁中医药大学, 2019(02)
- [10]益气活血复方干预家兔动脉粥样硬化的抗炎稳斑作用机理研究[D]. 彭东华. 辽宁中医药大学, 2019(01)