一、血管内皮生长因子(VEGF)与妊娠（论文文献综述）
张冬雪,袁宁潞,贺倩,赵艳晖[1]（2021）在《血管内皮生长因子与妊娠相关疾病关系的研究进展》文中认为血管内皮生长因子（VEGF）作为一种糖蛋白,可诱导血管生长,在胎盘形成、着床前胚胎发育、维持正常妊娠方面具有重要作用。近年来,多项研究表明VEGF与妊娠期糖尿病、子痫前期、异位妊娠、稽留流产及胎儿生长受限密切相关,有望成为病理妊娠及妊娠期并发症早期诊断的新型标志物。通过干预其血清学水平来达到改善妊娠结局也成为了新的治疗思路。本文对VEGF与妊娠相关疾病的研究进展进行综述,以期为临床早期发现妊娠相关疾病提供思路。
魏爽[2]（2021）在《补肾活血方对肾虚血瘀型不明原因复发性流产未孕患者分泌晚期血清中VEGF、TGF-β1的影响》文中提出【目的】探讨补肾活血方对肾虚血瘀型不明原因复发性流产（URSA）未孕患者分泌晚期血清中转化生长因子β1（TGF-β1）与血管内皮生长因子（VEGF）的影响。【方法】收集80例未孕的肾虚血瘀型URSA患者,随机分为试验组和对照组,每组各40例;同时收集40例正常未孕妇女作为正常组。对照组给予阿司匹林肠溶片口服治疗,试验组给予补肾活血方口服治疗,疗程为4周。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定试验组与对照组患者治疗前后分泌晚期外周血中泌乳素（PRL）及胰岛素样生长因子结合蛋白1（IGFBP-1）、VEGF及TGF-β1水平,并与正常组比较。【结果】（1）治疗期间,试验组剔除2例,脱落3例;对照组剔除8例,脱落12例。最终试验组35例、对照组20例纳入研究。（2）治疗前,试验组与对照组的URSA未孕患者外周血中VEGF、TGF-β1水平及蜕膜化标志因子PRL、IGFBP-1水平均明显低于正常组（P<0.01）,治疗4周后,上述各项指标水平均较治疗前明显升高（P<0.05或P<0.01）,且试验组的升高作用均明显优于对照组（P<0.05或P<0.01）。（3）相关性分析结果显示:VEGF、TGF-β1与PRL、IGFBP-1均呈正相关,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。【结论】分泌晚期血清中VEGF、TGF-β1水平与URSA的发生有关,VEGF、TGF-β1含量过低可能影响子宫内膜蜕膜化过程,从而导致流产发生。补肾活血方可提高肾虚血瘀型URSA患者VEGF、TGF-β1水平,从而促进蜕膜化标志物PRL、IGFBP-1的表达,保证蜕膜化过程的正常进行,以维持正常妊娠,且效果优于西药阿司匹林。
梁嘉玲[3]（2021）在《二补助育汤改善RIF患者子宫内膜容受性的临床疗效及作用机制研究》文中研究表明目的1查阅目前国内外关于子宫内膜容受性的相关文献,整理、归纳子宫内膜容受性的现代医学与中医药研究进展,为临床诊治子宫内膜容受性低下提供思路与依据。2观察二补助育汤对反复胚胎种植失败（RIF）患者中医证候、黄体中期超声学指标、血清中血管生成相关因子水平、雌孕激素水平及妊娠结局的影响,探讨二补助育汤对RIF患者子宫内膜容受性的临床疗效。3基于PI3K/Akt/mTOR信号通路及LC3B、VEGF、Ang-1、Ang-2表达水平,观察二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠种植窗期子宫内膜细胞自噬与血管生成的影响,进一步探究其提高子宫内膜容受性的作用靶点与机制。方法1 临床研究采用治疗前、后自身对照的研究方法,收集符合肾虚血瘀证型的低子宫内膜容受性RIF患者32例,予二补助育汤连续服用1-3个疗程（1个月经周期为1个疗程）,观察对比患者治疗前后的一般情况、月经失血评分、中医证候评分,以及黄体中期的超声学指标、血清中血管生成相关因子水平、雌孕激素水平,并随访患者再行IVF-ET/ICSI的胚胎种植率与临床妊娠率。2 实验研究采用米非司酮建立胚胎着床障碍小鼠模型,将小鼠分为空白组、模型组、二补助育汤低、中、高剂量组、补佳乐组、阿司匹林组。药物干预及取材后,裸眼观察各组小鼠子宫形态、计数胚胎着床位点数;应用扫描电镜观察各组小鼠子宫内膜胞饮突形态;应用透射电镜观察子宫内膜细胞自噬体结构;应用Real-Time PCR法、Western blot法、免疫组化法检测 PI3K、Akt、mTOR、LC3B、VEGF、Ang-1、Ang-2 的 mRNA 表达量、蛋白表达量与蛋白定位,分析各组表达量与定位的差异。结果1二补助育汤对RIF患者子宫内膜容受性的临床疗效观察（1）月经情况与中医证候:二补助育汤可使RIF患者月经量明显增加（P<0.01）,经血颜色较治疗前鲜红,经行顺畅,血块减少,但差异无统计学意义（P>0.05）;二补助育汤可明显改善RIF患者肾虚血瘀证候（P<0.01）。（2）黄体中期超声学指标:二补助育汤治疗后,患者子宫内膜厚度与容积明显增加（P<0.01）;A型、B型子宫内膜例数较治疗前增多,但差异无统计学意义（P>0.05）;双侧子宫动脉PI、RI、S/D数值均较治疗前明显降低（P<0.01）;Salle评分较治疗前明显增加（P<0.01）。（3）黄体中期血管生成因子:二补助育汤治疗后,患者黄体中期血清中VEGF、Ang-1水平均较治疗前明显升高（P＜0.01）,Ang-2亦较治疗前升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。（4）黄体中期雌孕激素:二补助育汤治疗后,患者黄体中期血清E2较治疗前明显升高（P＜0.05）;P亦较治疗前升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。（5）妊娠结局:二补助育汤治疗后,患者下一周期的胚胎种植率为40.74%,临床妊娠率为37.50%。2二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜容受性作用机制的实验研究（1）子宫形态、妊娠率与平均胚胎着床位点数:模型组小鼠子宫色白、较细,平均胚胎着床位点数极少,妊娠率较空白组明显降低（P<0.01）;而中药中、高剂量组、补佳乐组与阿司匹林组小鼠子宫色泽红润,着床部位少量充血或膨大,平均胚胎着床位点数较模型组明显增多（P<0.05）,妊娠率较模型组明显升高（P＜0.01）,中药组中以中药高剂量组子宫形态与妊娠结局最佳,且与两西药组无显着差异（P>0.05）。（2）PI3K/Akt/mTOR信号通路、LC3B:①基因表达:各组小鼠子宫PI3K mRNA表达无显着差异（P>0.05）;模型组AktmRNA、mTOR mRNA表达水平较空白组明显升高（P<0.01）,LC3B mRNA表达水平较空白组显着降低（P<0.01）;中药中、高剂量组PI3K mRNA、AktmRNA、mTOR mRNA表达水平较模型组均呈下降趋势,LC3B mRNA表达水平较模型组均呈升高趋势,但差异均不显着（P>0.05）。②蛋白表达:模型组小鼠子宫PI3K、Akt、mTOR蛋白表达量较空白组明显升高（P<0.01）,LC3B蛋白表达量较空白组明显降低（P＜0.01）;中药中、高剂量组、阿司匹林组PI3K、Akt、mTOR蛋白表达量均较模型组明显降低（P<0.05）,LC3B蛋白表达量均较模型组显着升高（P<0.05）。③蛋白定位:模型组小鼠PI3K、Akt、mTOR蛋白在子宫内膜腔上皮细胞、腺上皮细胞均呈阳性表达,在间质细胞与血管内皮细胞亦有少量表达,LC3B蛋白在子宫内膜腔上皮细胞、腺上皮细胞极少量表达,在间质细胞及肌层细胞未见表达;而中药中、高剂量组、补佳乐组与阿司匹林组Akt、mTOR蛋白在子宫内膜腔上皮细胞、腺上皮细胞表达均较模型组减少,LC3B蛋白在子宫内膜腔上皮细胞、腺上皮细胞均呈阳性表达。（3）子宫内膜细胞自噬体:模型组小鼠子宫内膜细胞中未见明显自噬体与自噬溶酶体;而中药中、高剂量组、阿司匹林组小鼠子宫内膜细胞中可见相对较多的自噬溶酶体。（4）VEGF、Ang-1、Ang-2:①基因表达:模型组小鼠子宫 VEGF、Ang-1、Ang-2 mRNA表达水平均较空白组明显降低（P＜0.01）;各药物组以相应药物干预后,VEGF、Ang-1、Ang-2 mRNA表达水平均呈升高趋势,其中,VEGF mRNA表达水平以中药中剂量组、补佳乐组、阿司匹林组升高明显（P<0.05）;所有药物组Ang-1 mRNA表达水平均较模型组明显升高（P<0.05）;Ang-2mRNA表达水平以中药高剂量组、补佳乐组、阿司匹林组升高明显（P＜0.01）。②蛋白表达:模型组小鼠子宫VEGF、Ang-1、Ang-2蛋白表达量均较空白组明显降低（P＜0.01）;各药物组以相应药物干预后,VEGF、Ang-1、Ang-2蛋白表达量均呈升高趋势,其中,所有药物组VEGF蛋白表达量均较模型组明显升高（P<0.05）;Ang-1蛋白表达量以中药中、高剂量组、补佳乐组、阿司匹林组升高明显（P<0.01）;Ang-2蛋白表达量以中药高剂量组、补佳乐组、阿司匹林组升高明显（P<0.05）。③蛋白定位:模型组小鼠子宫VEGF、Ang-1、Ang-2蛋白在子宫内膜腔上皮细胞、腺上皮细胞呈阴性或弱阳性表达,在血管内皮细胞表达不明显;而中药高剂量组、补佳乐组与阿司匹林组VEGF、Ang-1、Ang-2蛋白在子宫内膜腔上皮细胞、腺上皮细胞、血管内皮细胞呈弱阳性至阳性表达,较模型组表达增多。结论1临床研究结果显示,二补助育汤可显着改善RIF患者肾虚血瘀证候,增加黄体中期子宫内膜厚度与容积、子宫动脉血流灌注、子宫内膜及内膜下血流灌注,提高黄体中期血管生成相关因子表达水平,并且在一定程度上改善黄体功能,从而提高子宫内膜容受性,改善妊娠结局。2实验研究结果显示,二补助育汤能够抑制胚胎着床障碍小鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路,上调LC3B的表达,且增加VEGF、Ang-1、Ang-2的表达,从而增强子宫内膜细胞自噬作用,促进子宫内膜血管生成,以提高子宫内膜容受性,有利于胚胎着床。
王晓寒[4]（2021）在《富血小板血浆（Platelet-rich Plasma,PRP）治疗薄型子宫内膜的研究》文中研究指明研究背景辅助生殖技术已成为解决不孕不育问题的重要技术手段,它的快速发展使得胚胎质量问题得到解决,但薄型子宫内膜所引起的子宫内膜容受性改变仍是辅助生殖技术中周期取消以及胚胎植入失败的主要因素之一[1]。目前加拿大的生殖和男科学会（CFAS）及《辅助生殖技术中异常子宫内膜诊疗的中国专家共识》中将薄型子宫内膜定义为子宫内膜在排卵日或新鲜体外受精（IVF）周期中注射人绒毛膜促性腺激素（Human chorionic gonadotropin,HCG）当天或冻融胚胎移植（Freeze-thaw embryo transfer,FET）周期中开始孕酮的当天未达到7mm[2-3]。但薄型子宫内膜并不仅限于内膜变薄,还包括内膜功能层血流异常、影响内膜容受性因子的改变等多种子宫内膜容受性改变。临床上对于薄型子宫内膜的治疗主要包括基础激素治疗、子宫内膜微创刺激术激发免疫应答、低剂量阿司匹林的应用及促基质、血管形成等,从而起到增加子宫内膜的厚度、改善血流等容受性作用。但由于上述治疗方法的临床效果不确切,且患者的个体差异也较大,因此治疗效果并不理想,急需探寻新的有效治疗方式。随着再生医学的兴起及研究,在其领域中具有独特优势的干细胞成为当今研究的热点,它具体自我更新及多向分化潜能等特性,迄今已广泛应用于多个医学领域。其中便有关于将干细胞应用于子宫内膜修复并成功妊娠的报道[4]。尽管有成功的报道,但其来源受限、创伤大及免疫原性等限制了干细胞应用。近些年随着干细胞领域研究的不断深入,优势明显的经血子宫内膜间充质干细胞（Endometrium mesenchymal stem cells,EnMSCs）的研究也有了重大突破。EnMSCs具有较高的增殖活性,同时还能够向骨、脂肪、肌细胞和软骨细胞等分化,具有极强的多向分化潜能。体外细胞实验研究表明:在雌激素的诱导下,EnMSCs可以向子宫内膜上皮细胞分化[5]。在动物模型中,EnMSCs可重建子宫内膜组织并增加子宫内膜厚度[6]。Tan[7]及Zheng[8]等将经血源性EnMSCs移植治疗重度阿什曼综合征也取得良好疗效。以上研究结果均提示,每个月经周期子宫内膜的生长及功能恢复必定离不开EnMSCs的重要作用。但体外干细胞应用的远行归巢及局部定植非常困难,且临床治疗所需干细胞数量大,复制扩增过程中添加的胎牛血清及异体源性生长因子的加入亦有悖于伦理学范畴。能否寻求一种安全有效的自体资源培养干细胞;更有趣的是,假想这种自体资源能唤醒在体干细胞的功能,便能达到事半功倍的治疗效果。富血小板血浆（Platelet-richplasma,PRP）为一种高浓度的血小板血浆,可由静脉血离心得到。血小板内含有α-颗粒,其激活破裂时可释放出多种生长因子,如转化生长因子（Transforming growth factor,TGF）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）、血小板源性生长因子（Platelet derived growth factor,PDGF）、表皮生长因子（Epidermal Growth Factor,EGF）和胰岛素样生长因子（Insulin like growth factor,IGF）等,这些生长因子能够促进细胞增殖、迁移等生物活性的改变,使损伤部位的生物微环境明显得到改善,从而促进组织和新生基质的形成,以达到组织修复和再生的功能,对于损伤后伤口愈合具有积极作用[9]。并且,PRP具有操作简单、安全经济、损伤小等自身特有的优点,故广泛应用于骨科、口腔、皮肤、美容整形等[10-12]。基于以上基础理论研究及相关应用,PRP的应用也逐步引入生殖领域,这为薄型子宫内膜的治疗引入了新的安全有效的自体生物材料。鉴于薄型子宫内膜需要得以治疗的迫切性,干细胞治疗有效但应用受限、难以推广及含有多种生长因子的自体PRP可影响多种细胞功能、应用安全等优良特性,我们设计了此课题,初步探讨PRP在治疗薄型子宫内膜方面的作用。研究目的首先探讨PRP对EnMSCs增殖、迁移和粘附的生物学功能影响;然后用95%乙醇宫腔灌注制作薄型子宫内膜小鼠模型,通过观察薄型子宫内膜小鼠宫腔灌注PRP后子宫内膜的形态学、容受性指标及在体EnMSCs标记物的变化,探讨PRP治疗薄型子宫内膜的效果及潜在机制;最后将自体PRP宫腔灌注应用到拟行FET的薄型子宫内膜患者中,观察宫腔灌注PRP治疗薄型子宫内膜的临床效果;以期寻找到一种治疗薄型子宫内膜的新的有效方法。研究方法1.采集5名健康志愿者静脉血,采用两步离心法分离制作并激活PRP。采用流式细胞仪检测EnMSCs表面标志物CD14、CD19、CD34、CD45、CD73、CD90、CD105、HLA-DR的表达;采用成脂、成骨及成软骨分化培养液培养EnMSCs,观察细胞形态以及脂滴、矿化结节及软骨形成情况完成鉴定。利用添加不同浓度PRP的培养液培养EnMSCs,采用CCK-8（Cell Counting Kit-8）法绘制各组细胞在24h、48h、72h、96h的增殖曲线;采用Transwell法和划痕实验检测不同浓度PRP对EnMSCs迁移及粘附能力的影响。2.95%乙醇宫腔灌注制作薄型子宫内膜小鼠模型,给予宫腔灌注PRP治疗后,通过HE染色观察子宫内膜厚度、面积及微血管的改变;通过免疫组化、ELISA和Western-blot检测子宫内膜功能及容受性指标:细胞角蛋白（Cytokeratin）、波形蛋白（Vimentin）、VEGF、白血病抑制因子（Leukemia inhibitory factor,LIF）和白介素-6（Interleukin-6,IL-6）;通过免疫荧光双染方法检测小鼠EnMSCs的表面标记物:CD90和CD105,观察EnMSCs的在体变化情况,探讨宫腔灌注PRP修复薄型子宫内膜的效果和机制。3.采集20名行FET治疗的薄型子宫内膜不孕患者自身静脉血,2步离心法分离制作PRP,同周期宫腔内无菌灌注,且继续人工周期替代治疗。当子宫内膜达到移植厚度（≥7mm）时,添加孕激素转换内膜行FET。提供适当的黄体期支持并测量血清β-HCG水平。计算并分析子宫内膜厚度、形态及血流情况,并进行阳性β-HCG和临床妊娠情况等随访。结果（1）将不同浓度PRP加入培养液对EnMSCs进行体外培养发现:不同浓度PRP对EnMSCs的增殖具有不同程度的影响,2%PRP组的EnMSCs的增殖活性最大;1%PRP组和4%PRP组EnMSCs的增殖活性略低于2%PRP组;5%PRP组和0.5%PRP组的EnMSCs的增殖活性最弱（p<0.01）。（2）PRP可以促进EnMSCs的迁移。其中,2%PRP培养液培养的EnMSCs的迁移率最大;1%PRP组和4%PRP组EnMSCs次之;5%PRP组和0.5%PRP组EnMSCs的迁移率最小。（3）不同浓度的PRP对EnMSCs的粘附能力影响也不同:2%PRP培养液培养的EnMSCs的粘附能力最强（p<0.01）,其余各组粘附能力无明显差异（p>0.05）。（4）通过制作小鼠薄型子宫内膜模型行宫腔灌注PRP治疗后发现:宫腔灌注PRP可以改善薄型子宫内膜小鼠的子宫内膜容受性,包括子宫内膜形态学改善（内膜厚度、面积及微小血管的增加）和子宫内膜容受性指标的提高（CK9、VIM、VEGF、LIF）;此外,PRP还能抑制炎性因子IL-6的释放。免疫荧光追踪到小鼠EnMSCs在子宫内膜的表达情况,发现PRP宫腔灌注后在体EnMSCs增多。（5）通过观察自体PRP宫腔灌注治疗行FET的薄型子宫内膜患者的临床效果发现:20名患者中,接受PRP治疗前,患者的子宫内膜平均厚度为5.55±0.71 mm,PRP治疗后子宫内膜平均厚度为7.82±1.04 mm（p<0.0001）,且其子宫内膜形态及内膜血流信号也明显得到改善（分别是1.95±0.40 vs 2.75±0.44、2.60±0.50vs 3.40±0.68）。PRP宫腔灌注后所有患者子宫内膜达到移植厚度,其中有12例患者获得临床妊娠,妊娠率达60%,种植率为39.4%,早期流产率为16.7%。结论1.本研究使用不同浓度PRP体外培养EnMSCs,发现在2%PRP浓度范围内,细胞的增殖能力、迁移能力和粘附能力随着PRP浓度的升高而增强,呈剂量依赖性,而采用更高浓度PRP作用后上述作用则表现出回落现象,提示不同浓度PRP对EnMSCs的作用效果不同。首次验证PRP对EnMSCs的增殖、迁移和粘附的影响及与其浓度的关系。2.PRP可替代FBS及单一生长因子培养EnMSCs,为EnMSCs治疗薄型子宫内膜及其它疾病的临床应用提供扩增支持。3.PRP宫腔灌注薄型子宫内膜小鼠,可促进受损子宫内膜增殖修复,改善子宫内膜的容受性,减轻子宫内膜炎症反应。这种作用可能跟PRP影响在体EnMSCs的生物学功能有关。4.PRP宫腔灌注治疗薄型子宫内膜不孕患者,能够增加其子宫内膜厚度、改善血流,避免了周期取消,有利于胚胎植入以获得临床妊娠,且并未增加孕产妇并发症及子代出生畸形的风险。
陈秀娟[5]（2021）在《早发型子痫前期与早产儿呼吸窘迫综合征的相关性研究》文中进行了进一步梳理目的:探讨早发型子痫前期（early-onset preeclampsia,EOPE）与早产儿呼吸窘迫综合征（respiratory distress syndrome,RDS）的关系。方法:选取2019年1月～2020年12月在福建省妇幼保健院产科分娩且生后在新生儿科住院,母亲合并EOPE的144例低出生体重早产儿为EOPE组,按1:4选取同期分娩且与EOPE组胎龄匹配,母亲血压正常的576例低出生体重早产儿为对照组,比较两组患儿RDS的发病情况、相关因素及转归。EOPE组新生儿按照子痫前期病情程度,进一步分为早发型重度子痫前期（early-onset severe preeclampsia,EOSP）组和早发型轻度子痫前期（early-onset mild preeclampsia,EOMP）组,比较不同程度EOPE对早产儿RDS发病情况及其他临床预后的影响。通过logistic回归分析方法探讨EOPE与早产儿RDS的相关性。结果:1.本研究共纳入720例低出生体重早产儿,EOPE组144例,对照组576例。EOPE组母亲平均年龄、高龄产妇、孕前肥胖、剖宫产、出生窒息、小于胎龄儿、胎儿窘迫的构成比均高于对照组,差异存在统计学意义（P<0.05）。EOPE组平均出生体重、男性构成比均低于对照组,差异存在统计学意义（P<0.05）。2.EOPE组RDS、应用肺表面活性物质、败血症、视网膜病变、新生儿坏死性小肠结肠炎、动脉导管未闭的构成比均高于对照组,差异存在统计学意义（P<0.05）。EOPE组胎膜早破构成比低于对照组,差异存在统计学意义（P<0.05）。3.通过多因素Logistic回归分析EOPE与早产儿RDS的相关性,以及EOPE与早产儿RDS病情程度的相关性,调整胎龄、体重等围产期混杂因素后,结果显示:EOPE是RDS的主要危险因素,差异存在统计学意义（P<0.01,OR=2.350,95%CI:1.240-4.452）;EOPE是重度RDS的主要危险因素,差异存在统计学意义（P<0.05,OR=7.199,95%CI:1.205-43.011）。4.将EOPE组分为EOSP组（103例）和EOMP组（41例）,两组发生RDS比例分别为32例（32/103,31.1%）和1例（1/41,2.4%）,存在显着性差异(c（17）=13.607,P<0.01);两组在重度RDS的构成比上差异无统计学意义（P>0.05）。通过多因素Logistic回归分析EOSP与早产儿RDS的相关性,结果显示:EOSP发生RDS的风险高于EOMP,差异存在统计学意义（P=0.033,OR=15.619,95%CI:1.250-195.210）。结论:1.EOPE增加母亲剖宫产和胎儿窘迫的风险,以及分娩的低出生体重早产儿出生窒息、小于胎龄儿、极低和超低出生体重儿、RDS、败血症、视网膜病变、新生儿坏死性小肠结肠炎、动脉导管未闭的风险,且以男婴发生几率更高。因此对EOPE除了加强孕产妇围生期管理外,还应高度重视早产儿围生期相关并发症的防治,以降低其发病率。2.EOPE是RDS和重度RDS的主要危险因素,并且EOSP发生RDS的风险高于EOMP。提示针对孕妇EOPE,尤其是EOSP,应在产前和出生早期采取预防早产儿RDS的相应措施,以降低生后发生重度RDS的风险。
王舒可[6]（2021）在《FSHR与VEGF在绒毛组织中的表达及其与复发性流产的相关性》文中提出目的:通过比较复发性流产（RSA）患者及早期正常妊娠孕妇的绒毛组织中卵泡刺激素受体（FSHR）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况,了解二者与RSA之间的相关性。方法:选取2020年1月-2020年9月就诊于山西医科大学第一医院的复发性流产患者（RSA组,20例）和正常怀孕行人工流产的孕妇（对照组,20例）作为本实验的研究对象。通过qRT-PCR来检测RSA组和对照组绒毛组织中FSHRm RNA、VEGFm RNA的含量水平。采用免疫组化法检测RSA组和对照组绒毛组织中FSHR、VEGF蛋白表达情况。通过统计学软件SPSS23.0软件分析和处理数据,所有实验的测定结果均采用（x士s）表示,根据正态分布数据两组间采用独立样本t检验进行比较,相关性分析采用Pearson相关系数,检验水准α=0.05。结果:1.通过免疫组化法检测发现,两组绒毛组织中FSHR和VEGF主要表达于合体滋养层细胞及血管内皮细胞胞质中,FSHR在对照组中表达的灰度值为195.95±8.30,而在RSA组中表达的灰度值为204.25±5.25,VEGF在对照组中表达的灰度值为191.35±11.52,而在RSA组中表达的灰度值为200.50±8.07,RSA组绒毛组织中二者的表达均明显低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.01）,Pearson相关性分析表明FSHR与VEGF表达水平成正相关（Cr=0.801,P<0.05）。2.qRT-PCR检测FSHR m RNA在RSA组中含量为:0.45±0.29,对照组中为:1.04±0.11;VEGF m RNA在RSA组中含量为:0.37±0.17,对照组中为:1.02±0.07。可见RSA组二者的m RNA水平上含量明显低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.绒毛组织中FSHR及VEGF表达主要存在于滋养层细胞及血管内皮细胞胞质中,在RSA妇女绒毛组织中的m RNA水平及表达量明显减少,与RSA的发生相关。2.FSHR与VEGF共同参与胚胎血管的形成过程,且二者的表达存在一定的正相关性。
沈真如[7]（2021）在《基于DLL4/Notch1通路探讨麦粒灸促进薄型子宫内膜大鼠血管生成的机制》文中研究表明目的:宫腔操作等因素的增多导致子宫内膜损伤增多,薄型子宫内膜也越发常见。但薄型子宫内膜的发病机制还尚不明确,越来越多的证据表明血管生成与子宫内膜修复密切相关。因此,本研究通过建立薄型子宫内膜大鼠模型,观察麦粒灸“关元”、“子宫”穴对薄型子宫内膜大鼠血管生成相关因子及Notch信号通路相关分子的影响,从血管生成的角度初步探讨麦粒灸治疗薄型子宫内膜的可能机制。方法:将30只SPF级健康成年雌性SD大鼠按随机数字表法分为3组:对照组、模型组、麦粒灸组,每组10只。除对照组外,其余2组大鼠均于动情期采用95%乙醇宫腔注射法建立薄型子宫内膜模型。对照组与模型组每日麻醉后固定,麦粒灸组造模次日予以麦粒灸“关元”、“子宫”穴,每穴7壮。3个动情周期后于大鼠动情期取材,HE染色观察子宫内膜厚度及组织形态变化;免疫组织化学法和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法分别检测子宫内膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）及血管生成素-2（Ang-2）的表达情况;Western blot法和RT-qPCR法分别检测子宫内膜组织中Notch信号通路受体（Notchl）及配体（DLL4）的蛋白和基因表达情况。结果:（1）子宫内膜厚度及腺体、血管数量:与对照组相比,模型组大鼠子宫内膜厚度明显变薄,子宫内膜腺体、血管数量显着减少（P<0.01）;而麦粒灸组较模型组比,大鼠子宫内膜厚度明显增厚,子宫内膜腺体、血管数量显着增多（P<0.05,P<0.01）。（2）血管生成相关调节因子VEGF、Ang-2的表达:模型组大鼠子宫内膜中VEGF、Ang-2的MOD值较对照组显着下降（P<0.01）;麦粒灸组的MOD值较模型组显着上升（P<0.01,P<0.05）。模型组大鼠子宫内膜中VEGF、Ang-2的mRNA表达较对照组显着降低（P<0.01）;而与模型组相比,麦粒灸组表达均显着升高（P<0.05）。（3）Notch信号通路Notchl及DLL4的表达:模型组大鼠子宫内膜中Notch1、DLL4蛋白表达水平与对照组相比明显下降（P<0.01）;与模型组比较,麦粒灸组蛋白表达水平明显上升（P<0.05）。模型组大鼠子宫内膜中Notch1、DLL4的mRNA表达水平与对照组相比明显降低（P<0.01）;而与模型组比较,麦粒灸组mRNA表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论:麦粒灸“关元”、“子宫”穴能够改善薄型子宫模型大鼠的内膜组织形态,修复损伤的子宫内膜;其机制可能是通过上调子宫内膜中Notch信号通路相关分子的表达,从而影响薄型子宫内膜大鼠子宫内膜血管生成相关因子VEGF、Ang-2的表达,促进子宫内膜的血管生成,改善子宫内膜厚度,达到修复作用。
常韦[8]（2021）在《补肾安胎冲剂对胎盘微血管内皮细胞VEGF/Ras/MAPK通路表达的影响》文中研究说明目的:观察补肾安胎冲剂含药血清在VEGFR2处于抑制状态下对胎盘微血管内皮细胞中VEGF、VEGFR2及其下游Ras/MAPK信号转导通路的影响,从血管生成调控角度探讨补肾安胎冲剂防治复发性流产的作用机理。方法:将SPF级大鼠20只随机分为含药血清组和空白组,含药血清组对应给予补肾安胎冲剂灌胃,空白组则换用等量的生理盐水进行,连续灌胃7天,每日2次,于末次给药1小时后取腹主动脉血,离心后分别用来制备补肾安胎冲剂含药血清和空白组血清,并用MTT法筛选出补肾安胎冲剂含药血清最佳作用浓度用于后续实验,同时体外培养胎盘微血管内皮细胞,并将VEGFR2 siRNA转染胎盘微血管内皮细胞,使VEGFR2处于抑制状态后进行后续实验。实验分组为:正常血清组、siRNA-NC正常血清组、药物血清组、siRNA正常血清组、siRNA药物血清组五组,分别予以相应干预。采用实时荧光定量PCR、Western blotting、免疫荧光法检测VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK mRNA及蛋白表达结果。结果:1、补肾安胎冲剂含药血清最佳作用浓度为20%,后浓度继续增加,作用效果不再增强。2、实时荧光定量PCR法显示正常血清组和siRNA-NC正常血清组VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK mRNA的表达无明显差异（P>0.05）;药物血清组细胞VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK mRNA的表达明显高于正常血清组（P<0.05）;siRNA1正常血清组较正常血清组相比VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK mRNA的表达明显下降（P<0.01）;siRNA1药物血清组与siRNA1正常血清组VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK mRNA的表达相比有显着差异（P<0.01）。3、Western blot结果显示,正常血清组和siRNA-NC正常血清组VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK、p-MAPK蛋白无明显差异（P>0.05）;药物血清组VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK、p-MAPK蛋白的表达明显高于正常血清组（P<0.05或P<0.01）;siRNA1正常血清组较正常血清组相比VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK、p-MAPK蛋白的表达明显下降（P<0.01）;siRNA1药物血清组与siRNA1正常血清组相比VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK、p-MAPK蛋白的表达有显着差异（P<0.01）。4、免疫荧光检测结果显示正常血清组和siRNA-NC正常血清组VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK蛋白无明显差异（P>0.05）;药物血清组细胞VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK蛋白的表达明显高于正常血清组（P<0.05）;siRNA1正常血清组较正常血清组VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK蛋白的表达明显下降（P<0.01）;siRNA1药物血清组与siRNA1正常血清组VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK相比有显着差异（P<0.01）。结论:补肾安胎冲剂可能是通过上调VEGF、VEGFR2、Ras和MAPK mRNA及蛋白的表达,调节VEGF/Ras/MAPK信号通路,从而改善母胎界面血管生成,治疗复发性流产。
陆莎莎[9]（2021）在《补肾安胎冲剂调控PI3K/Akt信号通路改善母胎界面血管重铸的机制研究》文中认为目的:基于前期补肾安胎冲剂治疗复发性流产的临床和实验观察,为进一步探究补肾安胎冲剂对复发性流产的调节机制,本实验通过研究补肾安胎冲剂含药血清作用于人体外胎盘微血管内皮细胞（PMVEC）,以PI3K/Akt信号通路为核心,通过观察补肾安胎冲剂对信号通路上VEGF、VEGFR-2、PI3K、Aktm RNA和蛋白及P-Akt蛋白含量表达的影响、观察补肾安胎冲剂对PMVEC增殖、迁移及成管的影响,从细胞分子学机制方面揭示补肾安胎冲剂防治复发性流产的内涵。为补肾安胎冲剂治疗复发性流产提供科学依据的同时也有助于推进其现代化研究发展。方法:收集健康孕妇孕6-8周于安徽中医药大学第一附属医院妇科行人工流产术后的绒毛组织,培养PMVEC。采用SPF级SD雄性大鼠灌胃方法,实验组按照补肾安胎冲剂折算等效给药剂量为11.7g/kg灌胃,制备含药血清,对照组同时去离子水灌胃,制备SD雄性大鼠血清。设计三对VEGFR-2 si RNA,利用脂质体介导的si RNA转染PMVEC,RT-PCR法筛选活性;将稳定培养传代后的PMVEC,随机分为正常血清组、si RNAnc正常血清组、药物血清组、si RNA正常血清组、si RNA药物血清组。利用MTT法检测各组PMVEC增殖,Transwell实验测定各组PMVEC迁移,Tube Formation检测各组PMVEC成管;RT-PCR技术检测补肾安胎冲剂对各组PMVEC中VEGF、VEGF-R2、PI3K、Aktm RNA表达的影响;蛋白印迹法（Western blot）技术检测补肾安胎冲剂对各组PMVEC中VEGF、VEGF-R2、PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达的影响;免疫荧光法检测补肾安胎冲剂对各组PMVEC中VEGF、VEGF-R2、PI3K、Akt蛋白表达的影响。结果:1.MTT法检测补肾安胎冲剂对各组PMVEC增殖的影响各组PMVEC的MTT在不同的时间点结果显示,与正常血清组相比,si RNAnc正常血清组PMVEC增殖无明显区别（P>0.05）,药物血清组对PMVEC增殖的作用明显增高（P<0.05）,si RNA正常血清组PMVEC增殖明显下降（P<0.05）;与si RNA正常血清组相比,si RNA药物血清组PMVEC增殖作用升高（24h时P<0.05,48h时P<0.01）。2.Transwell实验检测补肾安胎冲剂对各组PMVEC迁移的影响与正常血清组相比,si RNAnc正常血清组PMVEC迁移无明显区别（P>0.05）,药物血清组PMVEC迁移增多（P<0.05）,si RNA正常血清组对PMVEC迁移具有明显抑制作用（P<0.01）;与si RNA正常血清组相比,si RNA药物血清对PMVEC迁移作用明显升高（P<0.01）;3.Tube Formation检测补肾安胎冲剂对各组PMVEC成管的影响与正常血清组相比,si RNAnc正常血清组PMVEC成管数无明显差异（P>0.05）,药物血清组PMVEC成管数增加（P<0.05）,si RNA正常血清组对PMVEC成管具有明显抑制作用（P<0.01）;与si RNA正常血清组相比,si RNA药物血清对PMVEC成管作用明显升高（P<0.01）。4.RT-PCR法检测补肾安胎冲剂对各组PMVEC中VEGF、VEGFR-2、PI3K、Aktm RNA蛋白表达的影响在各组内参β-actin m RNA的表达水平一致时,与正常血清组相比,si RNAnc正常血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Aktm RNA的表达无明显区别（P>0.05）,药物血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Aktm RNA的表达增高（P<0.05）,si RNA正常血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Aktm RNA的表达明显下降（P<0.01）;与si RNA正常血清组相比,si RNA药物血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Aktm RNA的表达升高（P<0.05）;5.Western blot法检测补肾安胎冲剂对各组PMVEC中VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt蛋白及P-Akt蛋白表达的影响在各组内参β-actin蛋白的表达水平一致时,与正常血清组相比,si RNAnc正常血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt、P-Akt蛋白无明显区别（P>0.05）,药物血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt、P-Akt蛋白的表达增高（P<0.05）,si RNA正常血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt、P-Akt蛋白的表达明显下降（P<0.01）;与si RNA正常血清组相比,si RNA药物血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt、P-Akt明显升高（P<0.01）;6.免疫荧光法检测补肾安胎冲剂对各组PMVEC中VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt蛋白表达的影响与正常血清组相比,si RNAnc正常血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt蛋白无明显差异（P>0.05）,药物血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt蛋白的表达增高（P<0.05）,si RNA正常血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt蛋白的表达下降（P<0.05）;与si RNA正常血清组相比,si RNA药物血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt蛋白升高（P<0.05）。结论:补肾安胎冲剂可以上调RSA患者PMVEC中VEGF、VEGFR2m RNA和蛋白含量的表达,激活PI3K/Akt信号通路,提升PI3K/Akt信号通路PI3K、Aktm RNA和蛋白含量及P-Akt蛋白含量的表达,进而磷酸化下游一系列调节蛋白,调节内皮细胞的生物学功能,促进PMVEC的增殖、迁移和管腔形成,促进胎盘血管网的形成,保证母胎间血运正常、营养物质的供应及气体的交换功能正常,达到维持妊娠的目的。
杨春荣[10]（2021）在《补肾安胎冲剂对大鼠骨髓来源EPCs细胞增殖、迁移和分化的影响及其治疗肾虚型早期先兆流产的临床观察》文中研究指明第一部分实验研究目的观察不同浓度补肾安胎冲剂药物血清对大鼠骨髓内皮祖细胞（EPCs）增殖活性、迁移能力及向VECs（血管内皮细胞）分化的影响。从细胞分化层面探讨中药对血管生成的影响,揭示“肾主生殖”、”肾主骨生髓”中医理论的科学内涵。方法鉴定分离培养的细胞为大鼠骨髓来源EPCs:首先取3-4周龄SD大鼠（雌性）5只,采用密度梯度离心法分离单个核细胞,然后收集培养7d的细胞,通过免疫荧光法测定对EPCs特异性表面抗原人白细胞分化抗原34（CD34）、血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2,又称KDR+）、人白细胞分化抗原133（CD133）予流式细胞仪进行检测,行Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-AC-LDC）和异硫氰酸荧光素荆豆凝集素-1（FITC-UEA-1）双摄取实验,鉴定EPCs。按照23.4g/kg.d的中药剂量制备补肾安胎冲剂中药药物血清。运用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）检测不同浓度（5%、10%、15%、20%）以及在不同时间（24h、48h、72h）干预下EPCs的细胞增殖活性。通过细胞迁移侵袭实验技术（Transwell法）检测EPCs的迁移能力、定时定量PCR（Real-time PCR）检测 EPCs 向 VECs 分化情况。结果1.EPCs的鉴定1.1细胞免疫荧光检测DAPI染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色,细胞特异性表面抗原CD34、VEGFR-2、CD133阳性表达为相应荧光素标记的红光或绿色。可见绝大多数培养的EPCs特异性表面抗原CD34、VEGFR-2、CD133均可见阳性表达,7天时阳性率均显着增高,差异有统计学意义（P<0.05）1.2流式细胞仪鉴定EPCs培养7d时,应用流式细胞仪分析培养第7天的细胞表面标志物CD34、CD133、VEGFR的表达情况,见图2。检测结果显示,CD34阳性细胞占94.7%及CD133阳性细胞占93.8%;VEGFR阳性细胞数量98.8%,差异有统计学意义（P<0.05）。结果提示,该细胞为EPCs。2.EPCs的增殖活性检测运用MTT法检测,结果显示空白对照组在24h、48h、72h的吸光度值分别为（0.034±0.003）、（0.026±0.002）、（0.029±0.005）,阴性对照组在24h、48h、72h 的吸光度值分别为（0.404±0.017）、（0.569±0.033）、（0.546±0.025）,5%含药血清实验组在24h、48h、72h 的 D（490）值分别为（0.526±0.018）、（0.768±0.015）、（0.675±0.051）,10%含药血清实验组在24h、48h、72h的吸光度值分别为（0.532±0.014）、（0.843±0.023）、（0.770±0.034）。15%含药血清实验组在24h、48h、72h的吸光度值分别为（0.482 ±0.039）、（0.073±0.025）、（0.705±0.013）。20%含药血清实验组在 24h、48h、72h 的吸光度值分别为（0.381±0.025）、（0.458 ±0.034）、（0.454±0.095）。阴性对照组及各浓度含药血清组吸光度值明显高于空白组,差异具有统计学意义（P<0.01）。不同浓度的补肾安胎冲剂体外干预下大鼠骨髓来源内皮祖细胞的增殖活性之间差异具有统计学意义。3.EPCs的迁移能力检测采用Transwell法检测,每高倍镜视野下空白对照组及药物血清组平均迁移细胞数分别为（51.0±7.94）、（105.5±15.22）,与空白对照组相比,药物血清组EPCs的迁移能力明显增高（P<0.01）。4.EPCs向VECs分化情况提取内皮祖细胞RNA,设计Real-time PCR引物,通过Real-time PCR检测,相对于空白血清处理,药物血清组血管内皮生长因子（VEGF）及血管假性血友病因子（vWF）的相对表达量（2-ΔΔCT）均显着上升,含药血清处理可以显着诱导血管新生标记分子VEGF和vWF的表达。（P<0.01,具有明显统计学差异。）药物血清组vWF的相对表达量更高,差异更显着（P<0.01）。结论1.采用免疫荧光法及流式细胞学检测鉴定培养的细胞为大鼠骨髓内皮祖细胞;2.补肾安胎冲剂可增强内皮祖细胞的增殖活性及迁移能力,影响程度可能与浓度有关,10%浓度含药血清在48h增殖率达到最高值;3.补肾安胎冲剂剂能够显着促进EPC向VECs分化的功能,并通过刺激VEGF及vWF表达发挥作用。第二部分临床研究目的:通过口服补肾安胎冲剂联合地屈孕酮和单独口服地屈孕酮治疗肾虚型早期先兆流产的随机对照临床研究,评价补肾安胎冲剂在改善肾虚型早期先兆流产患者中医证候、血清孕酮（P）、雌二醇（E2）值、VEGF表达水平等方面的临床疗效,为中医药保胎的优势提供数据支持。方法:收集2019年03月至2020年03月就诊于安徽中医药大学第一附属医院妇科门诊的肾虚型早期先兆流产的60例患者,按照1:1的比例随机分成对照组（30例）、观察组（30例）两组。对照组予口服地屈孕酮,观察组予口服补肾安胎冲剂+地屈孕酮联合治疗,治疗疗程为两周（14天）。运用软件IBMSPSS25.0对数据进行处理分析,通过比较两组患者用药前后中医证候积分及血清P、E2值、VEGF表达水平的变化情况,评估补肾安胎冲剂联合地屈孕酮治疗肾虚型早期先兆流产的临床疗效。结果:1.临床综合疗效比较:观察组（补肾安胎冲剂联合地屈孕酮）与对照组（地屈孕酮）的总有效率分别为96.67%、90%,P＜0.05,说明两组均有较好的治疗效果,且观察组的总疗效优于对照组。2.中医证候积分:与治疗前比较,观察组和对照组治疗后中医证候积分均明显下降,P<0.01,差异具有显着统计学意义;两组治疗后的中医证候积分比较,p<0.01,差异具有统计学意义,说明观察组（补肾安胎冲剂联合地屈孕酮）及对照组（地屈孕酮）治疗先兆流产均能有效改善临床证候,且观察组优于对照组。3.中医证候疗效:两组患者治疗后中医证候疗效比较,P=0.035,P<0.05,差异有统计学意义,观察组总有效率93.33%,对照组总有效率为86.67%,说明观察组中医证候疗效优于对照组。4.血清P、E2水平:观察组及对照组治疗后的血清P、E2水平均明显升高,与治疗前比较,P<0.05,差异有显着统计学意义;两组患者治疗后比较,p小于0.01,差异具有统计学意义,说明两组都能有效提高血清P、E2水平,且观察组优于对照组。5.外周血VEGF水平:观察组及对照组治疗后的外周血VEGF水平均明显升高,与治疗前比较,p<0.05,差异具有统计学意义;两组患者治疗后比较p小于0.01,差异具有统计学意义,说明两组都能有效提高外周血VEGF水平,且观察组优于对照组。结论:1.补肾安胎冲剂联合地屈孕酮治疗早期先兆流产的临床综合疗效明确,且优于单纯使用地屈孕酮治疗。2.补肾安胎冲剂联合地屈孕酮能够明显改善患者的肾虚证证候。3.补肾安胎冲剂联合地屈孕酮可提高患者血清P、E2水平,明显优于单纯使用地屈孕酮治疗,值得推广使用。4.补肾安胎冲剂联合地屈孕酮可上调VEGF水平,有助于血管的新生,从而纠正母胎界面血管生成障碍,改变妊娠结局。
二、血管内皮生长因子(VEGF)与妊娠（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、血管内皮生长因子(VEGF)与妊娠（论文提纲范文）
（1）血管内皮生长因子与妊娠相关疾病关系的研究进展（论文提纲范文）
| 1 VEGF与妊娠期并发症 |
| 1.1 VEGF与GDM |
| 1.2 VEGF与子痫前期 |
| 2 VEGF与病理妊娠 |
| 2.1 VEGF与稽留流产 |
| 2.2 VEGF与异位妊娠 |
| 2.3 VEGF与胎儿生长受限(FGR) |
| 3 总结与展望 |
（2）补肾活血方对肾虚血瘀型不明原因复发性流产未孕患者分泌晚期血清中VEGF、TGF-β1的影响（论文提纲范文）
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究对象及分组 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.3.1 病例纳入标准 |
| 1.3.2 正常组纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 治疗方法 |
| 1.5.1 对照组 |
| 1.5.2 试验组 |
| 1.6 观察指标及检测方法 |
| 1.6.1 观察指标 |
| 1.6.2 标本采集及血清制备 |
| 1.6.3 试剂与仪器 |
| 1.6.4 实验方法 |
| 1.6.5 结果判断 |
| 1.7 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 2组患者脱落剔除情况 |
| 2.2 2组患者治疗前后血清VEGF水平比较 |
| 2.3 2组患者治疗前后血清TGF-β1水平比较 |
| 2.4 2组患者治疗前后血清PRL水平比较 |
| 2.5 2组患者治疗前后血清IGFBP-1水平比较 |
| 2.6 相关性分析 |
| 2.7 随访结果 |
| 3 讨论 |
（3）二补助育汤改善RIF患者子宫内膜容受性的临床疗效及作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 综述一 反复胚胎种植失败低子宫内膜容受性的现代医学研究进展 |
| 1 RIF定义的演变 |
| 2 RIF子宫内膜容受性的影响因素 |
| 3 RIF低子宫内膜容受性的治疗现状 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 子宫内膜容受性的中医药研究进展 |
| 1 病名溯源 |
| 2 病因病机认识 |
| 3 中医药在提高子宫内膜容受性中的应用 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 二补助育汤改善反复胚胎种植失败患者子宫内膜容受性的临床疗效观察 |
| 前言 |
| 1 研究材料 |
| 2 研究方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜容受性作用机制的实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜细胞自噬的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 实验二 二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜血管生成的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 1 研究总结 |
| 2 创新点 |
| 3 不足与展望 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（4）富血小板血浆（Platelet-rich Plasma,PRP）治疗薄型子宫内膜的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 第一章 前言 |
| 1.薄型子宫内膜的研究现状 |
| 1.1 薄型子宫内膜的临床诊断及危害 |
| 1.2 薄型子宫内膜的病因 |
| 1.3 薄型子宫内膜的治疗 |
| 2.子宫内膜间充质干细胞(EnMSCs)的研究概况及应用 |
| 2.1 干细胞概况及应用 |
| 2.2 EnMSCs的研究历程及应用 |
| 3.富血小板血浆(PRP)的研究进展 |
| 3.1 PRP的来源及成分 |
| 3.2 PRP的作用及临床应用 |
| 4.本课题的研究思路及意义 |
| 第二章 PRP对人子宫内膜间充质干细胞(EnMSCs)增殖、迁移及粘附功能的影响 |
| 1.材料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 主要实验试剂及耗材 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 1.4 主要实验试剂配制 |
| 2.方法 |
| 2.1 PRP的制备 |
| 2.2 EnMSCs的培养 |
| 2.3 流式细胞仪的鉴定 |
| 2.4 体外EnMSCs的诱导分化 |
| 2.5 实验分组 |
| 2.6 CCK-8法测量不同浓度PRP对EnMSCs增殖活性的影响 |
| 2.7 Transwell实验和划痕实验检测不同浓度PRP对EnMSCs迁移活性的影响 |
| 2.8 粘附实验测定不同浓度PRP对EnMSCs粘附能力的影响 |
| 2.9 统计分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 EnMSCs的形态 |
| 3.2 EnMSCs的细胞表面标记物表达 |
| 3.3 EnMSCs多系分化检测 |
| 3.4 PRP对EnMSCs增殖的影响 |
| 3.5 PRP对EnMSCs迁移的影响 |
| 3.6 PRP对EnMSCs粘附的影响 |
| 4.讨论 |
| 第三章 PRP修复薄型子宫内膜模型小鼠子宫内膜的研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 PRP来源 |
| 1.3 主要实验试剂及耗材 |
| 1.4 主要实验仪器 |
| 2.方法 |
| 2.1 薄型子宫内膜小鼠模型制作 |
| 2.2 子宫内膜石蜡包埋切片及HE染色 |
| 2.3 免疫组织化学染色 |
| 2.4 蛋白免疫印迹(Western-blot)实验 |
| 2.5 酶联免疫吸附测定(ELISA) |
| 2.6 免疫荧光 |
| 2.7 统计分析 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 HE染色结果 |
| 3.2 免疫组织化学结果 |
| 3.3 Western-blot结果 |
| 3.4 ELISA结果 |
| 3.5 免疫荧光结果 |
| 4.讨论 |
| 第四章 PRP宫腔灌注治疗薄型子宫内膜的临床观察 |
| 1.材料 |
| 1.1 患者收集 |
| 1.2 PRP来源 |
| 1.3 伦理审核及知情同意 |
| 1.4 主要实验试剂及仪器 |
| 2.方法 |
| 2.1 治疗前准备 |
| 2.2 子宫内膜的测量 |
| 2.3 内膜准备 |
| 2.4 PRP的制备 |
| 2.5 PRP宫腔灌注 |
| 2.6 胚胎移植 |
| 2.7 随访 |
| 2.8 统计学分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 一般资料统计 |
| 3.2 超声检查结果 |
| 3.3 妊娠结局 |
| 3.4 随访结果 |
| 4.讨论 |
| 全文总结 |
| 综述 PRP在女性生殖领域中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 附件 |
（5）早发型子痫前期与早产儿呼吸窘迫综合征的相关性研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 2 资料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 临床资料收集 |
| 2.3 诊断标准及定义 |
| 2.4 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 一般资料分析 |
| 3.2 EOPE围产期母婴临床资料分析 |
| 3.3 EOPE的早产儿RDS及其他并发症分析 |
| 3.4 EOPE与RDS、重度RDS的相关性分析 |
| 3.5 EOSP与RDS、重度RDS的相关性分析 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 子痫前期对新生儿呼吸窘迫综合征的影响 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）FSHR与VEGF在绒毛组织中的表达及其与复发性流产的相关性（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 常用缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.2.1 免疫组化法主要试剂 |
| 1.2.2 实时荧光定量PCR主要试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.3.1 免疫组化法主要实验仪器设备 |
| 1.3.2 实时荧光定量PCR主要实验仪器设备 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.4.1 免疫组化法 |
| 1.4.2 实时荧光定量PCR |
| 1.4.2.1 引物设计和合成 |
| 1.4.2.2 总RNA的提取 |
| 1.4.2.3 反转录 |
| 1.4.2.4 实时荧光定量PCR检测 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 两组一般临床资料比较 |
| 2.2 qRT-PCR检测两组FSHR、VEGF mRNA含量情况比较 |
| 2.2.1 分别可见FSHR、VEGF的qRT-PCR基因扩增产物溶解曲线呈特异性单峰,说明实验的扩增为单一产物,特异性较高 |
| 2.2.2 qRT-PCR检测FSHR、VEGFmRNA在两组中的含量 |
| 2.3 免疫组化法结果 |
| 2.3.1 FSHR 与 VEGF 蛋白在两组绒毛组织中的相对表达情况 |
| 2.3.2 对免疫组化法结果进行 Pearson 相关分析 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 卵泡刺激素受体在胎盘血管形成及维持妊娠中的作用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（7）基于DLL4/Notch1通路探讨麦粒灸促进薄型子宫内膜大鼠血管生成的机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1. 薄型子宫内膜的古今研究 |
| 1.1 祖国医学对薄型子宫内膜的认识 |
| 1.2 薄型子宫内膜的现代研究 |
| 2. 针灸治疗薄型子宫内膜的研究进展 |
| 2.1 针刺疗法 |
| 2.2 艾灸疗法 |
| 2.3 温针灸疗法 |
| 2.4 针药结合疗法 |
| 2.5 其他针灸疗法 |
| 3. 血管生成与薄型子宫内膜 |
| 3.1 人子宫内膜的组成与功能 |
| 3.2 血管生成在子宫内膜生理性修复中的作用 |
| 3.3 血管生成对薄型子宫内膜的影响 |
| 3.4 血管生成相关调节因子与薄型子宫内膜 |
| 3.5 DLL4/Notch1信号通路与薄型子宫内膜 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1. 实验动物与材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂与耗材 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 模型制备 |
| 2.2 分组方法 |
| 2.3 干预方法 |
| 2.4 组织取材 |
| 2.5 HE染色 |
| 2.6 免疫组织化学法 |
| 2.7 Western blot法 |
| 2.8 RT-qPCR法 |
| 3. 统计学方法 |
| 4. 实验结果 |
| 4.1 子宫内膜组织厚度、腺体及血管数 |
| 4.2 子宫内膜组织中VEGF及Ang-2表达量 |
| 4.3 子宫内膜组织中Notch1及DLL4表达量 |
| 第三部分 讨论 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（8）补肾安胎冲剂对胎盘微血管内皮细胞VEGF/Ras/MAPK通路表达的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文词缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 研究内容 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 胎盘微血管内皮细胞 |
| 2.2 实验动物 |
| 2.3 实验药物 |
| 2.4 试剂与仪器 |
| 3 观测指标 |
| 4 实验方法 |
| 4.1 培养构建胎盘微血管内皮细胞 |
| 4.2 含药血清制备及筛选 |
| 4.3 siRNA筛选及转染 |
| 4.4 实验分组及干预 |
| 4.5 实时荧光定量PCR技术检测胎盘微血管内皮细胞VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK mRNA的表达量 |
| 4.6 Western blot技术检测胎盘微血管内皮细胞VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK、p-MAPK蛋白的表达 |
| 4.7 免疫荧光技术检测胎盘微血管内皮细胞中VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK蛋白的表达 |
| 5 统计学方法 |
| 第二部分 实验结果 |
| 1 含药血清最佳作用浓度筛选情况 |
| 2 细胞转染siRNA筛选结果 |
| 3 实时荧光定量PCR技术检测补肾安胎冲剂含药血清对VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK mRNA表达水平的影响 |
| 4 Western blot技术检测补肾安胎冲剂含药血清对VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK、p-MAPK蛋白表达水平的影响 |
| 5 免疫荧光技术检测补肾安胎冲剂含药血清对VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK蛋白表达水平的影响 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 中医对RSA病因病机的认识 |
| 2 中医对RSA治疗方面的认识 |
| 3 中医对母胎界面的认识 |
| 4 补肾健脾法与RSA |
| 5 西医对RSA病因方面的认识 |
| 6 西医对RSA治疗方面的认识 |
| 7 VEGF/Ras/MAPK信号通路与RSA |
| 7.1 VEGF信号通路 |
| 7.2 VEGF与 RSA |
| 7.3 VEGFR2与RSA |
| 7.4 Ras与 RSA |
| 7.5 MAPK与 RSA |
| 8 补肾安胎冲剂的主要组方分析 |
| 9 结果讨论分析 |
| 9.1 补肾安胎冲剂最佳含药血清浓度筛选结果的分析 |
| 9.2 细胞转染siRNA筛选结果的分析 |
| 9.3 补肾安胎冲剂含药血清对VEGF、VEGFR2、Ras、MAPK表达水平的分析 |
| 第四部分 结论 |
| 第五部分 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 复发性流产的中西医治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
（9）补肾安胎冲剂调控PI3K/Akt信号通路改善母胎界面血管重铸的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词对比表 |
| 前言 |
| 一 研究内容 |
| 1 材料与仪器 |
| 2 实验方法与分组 |
| 3 指标监测 |
| 4.统计学方法 |
| 二 研究结果 |
| 1 siRNA 抑制 PMVEC 中 VEGFR-2mRNA 表达的情况 |
| 2 补肾安胎冲剂对各组 PMVEC 增殖的影响 |
| 3 补肾安胎冲剂对各组 PMVEC 迁移的影响 |
| 4 补肾安胎冲剂对各组 PMVEC 成管的影响 |
| 5 RT-PCR 技术检测补肾安胎冲剂对各组 PMVEC 中 VEGF?VEGF-R2?PI3K?Aktm RNA 表达的影响 |
| 6 WB 技术检测补肾安胎冲剂对各组 PMVEC 中 VEGF?VEGFR-2?PI3K?Akt?P-Akt 蛋白表达的影响 |
| 7 免疫荧光技术检测补肾安胎冲剂对各组 PMVEC中 VEGF?VEGFR-2?PI3K?Akt 蛋白表达的影响 |
| 三 讨论 |
| 四 结论 |
| 五 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 复发性流产相关信号通路的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
（10）补肾安胎冲剂对大鼠骨髓来源EPCs细胞增殖、迁移和分化的影响及其治疗肾虚型早期先兆流产的临床观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 常用缩略中英文词表 |
| 第一部分 实验研究 补肾安胎冲剂对大鼠骨髓EPCs细胞增殖、迁移和分化的影响 |
| 前言 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验主要试剂及仪器设备 |
| 2.2.1 主要试剂 |
| 2.2.2 主要仪器 |
| 2.3 实验药物 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 大鼠骨髓来源EPCs的鉴定 |
| 3.1.1 双荧光染色法鉴定 |
| 3.1.2 免疫荧光染色 |
| 3.1.3 流式细胞仪动态检测EPC表面标志 |
| 3.2 制备补肾安胎冲剂中药药物血清 |
| 3.3 不同浓度的补肾安胎冲剂干预对EPCs增殖活性的影响 |
| 3.4 采用补肾安胎冲剂的不同干预时间对EPCs增殖的影响 |
| 3.5 Transwell法检测EPCs的迁移能力 |
| 3.6 RT-qPCR检测补肾安胎冲剂干预下EPCs向VECs分化的情况 |
| 3.6.1 Total RNA抽提 |
| 3.6.2 Total RNA质检 |
| 3.6.3 反转录(First Strand cDNA Synthesis) |
| 3.6.4 荧光定量PCR检测 |
| 3.6.5 计算相对表达量 |
| 4 大鼠骨髓来源EPCs的鉴定 |
| 4.1 双荧光染色法鉴定 |
| 4.2 免疫荧光法检测 |
| 4.3 流式细胞仪检测 |
| 5 补肾安胎冲对EPCs增殖活性的影响 |
| 5.1 不同浓度补肾安胎冲剂干预对EPCs增殖活性的影响 |
| 5.2 补肾安胎冲剂的不同干预时间对EPCs增殖活性的影响 |
| 5.3 各组EPCs增殖率结果 |
| 6 补肾安胎冲剂对EPCs迁移能力的影响 |
| 7 补肾安胎冲剂对EPCs分化的影响 |
| 8 讨论 |
| 8.1 大鼠骨髓来源EPCs的分离培养与鉴定 |
| 8.2 补肾安胎冲剂通过促进EPCs增殖和迁移参与母胎界面血管重铸 |
| 8.3 补肾安胎冲剂通过促进EPCs分化为VECs参与血管新生 |
| 9 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 补肾安胎冲剂联合地屈孕酮治疗肾虚型早期先兆流产的临床观察 |
| 前言 |
| 1 临床资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.2.1 西医诊断标准 |
| 1.2.2 中医肾虚证证候诊断标准 |
| 1.2.3 纳入标准 |
| 1.2.4 排除标准 |
| 1.2.5 病例剔除及脱落标准 |
| 2 研究方案 |
| 2.1 治疗方案 |
| 2.1.1 对照组(地屈孕酮) |
| 2.1.2 观察组(补肾安胎冲剂+地屈孕酮片) |
| 2.1.3 给药疗程 |
| 2.2 标本的处理 |
| 2.3 观察指标 |
| 2.3.1 疗效性指标 |
| 2.3.2 安全性指标 |
| 2.4 疗效评定标准 |
| 2.4.1 中医证候分级量化标准 |
| 2.4.2 中医证候疗效判定标准 |
| 2.4.3 临床综合疗效判定标准 |
| 2.5 统计方法 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 一般资料 |
| 3.1.1 两组年龄、孕周、不良妊娠史比较 |
| 3.1.2 两组治疗前病情程度比较 |
| 3.2 两组患者治疗前后中医证候积分比较 |
| 3.3 两组治疗后中医证候疗效比较 |
| 3.4 两组治疗后临床综合疗效比较 |
| 3.5 治疗前后两组患者血清P、E_2水平比较 |
| 3.5.1 两组患者治疗前后血清P水平比较 |
| 3.5.2 两组患者治疗前后血清E_2水平比较 |
| 3.6 两组患者治疗前后外周血VEGF表达水平比较 |
| 3.7 安全性观察 |
| 4 讨论 |
| 4.1 早期先兆流产与肾虚的关系 |
| 4.2 补肾安胎冲剂的方药分析 |
| 4.3 血清孕酮、雌二醇在先兆流产中的检测意义 |
| 4.4 VEGF表达水平在先兆流产中的检测意义 |
| 4.5 结果分析 |
| 5 结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 早期先兆流产的中西医研究现状 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
四、血管内皮生长因子(VEGF)与妊娠（论文参考文献）
- [1]血管内皮生长因子与妊娠相关疾病关系的研究进展[J]. 张冬雪,袁宁潞,贺倩,赵艳晖. 中国医药, 2021(11)
- [2]补肾活血方对肾虚血瘀型不明原因复发性流产未孕患者分泌晚期血清中VEGF、TGF-β1的影响[J]. 魏爽. 广州中医药大学学报, 2021(09)
- [3]二补助育汤改善RIF患者子宫内膜容受性的临床疗效及作用机制研究[D]. 梁嘉玲. 北京中医药大学, 2021(01)
- [4]富血小板血浆（Platelet-rich Plasma,PRP）治疗薄型子宫内膜的研究[D]. 王晓寒. 山东大学, 2021(11)
- [5]早发型子痫前期与早产儿呼吸窘迫综合征的相关性研究[D]. 陈秀娟. 福建医科大学, 2021(02)
- [6]FSHR与VEGF在绒毛组织中的表达及其与复发性流产的相关性[D]. 王舒可. 山西医科大学, 2021(01)
- [7]基于DLL4/Notch1通路探讨麦粒灸促进薄型子宫内膜大鼠血管生成的机制[D]. 沈真如. 南京中医药大学, 2021(01)
- [8]补肾安胎冲剂对胎盘微血管内皮细胞VEGF/Ras/MAPK通路表达的影响[D]. 常韦. 安徽中医药大学, 2021(01)
- [9]补肾安胎冲剂调控PI3K/Akt信号通路改善母胎界面血管重铸的机制研究[D]. 陆莎莎. 安徽中医药大学, 2021(01)
- [10]补肾安胎冲剂对大鼠骨髓来源EPCs细胞增殖、迁移和分化的影响及其治疗肾虚型早期先兆流产的临床观察[D]. 杨春荣. 安徽中医药大学, 2021(01)
标签：子宫内膜论文; 对照组论文; 血管内皮生长因子论文; 细胞生长因子论文; 怀孕论文;