一、从猪和牛检出类乙肝病毒抗原和抗体（论文文献综述）
赵月[1]（2014）在《人源HBV人工感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病理学研究》文中进行了进一步梳理乙型肝炎（HB）是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一种以肝脏损伤为主要特征的严重危害人类健康的传染病之一。由于HBV具有严格的宿主特异性,因而缺乏理想的细胞模型或动物模型,从而阻碍了HBV的研究。本研究采用人源HBV对沙鼠和C57BL/6小鼠进行感染试验,目的在于探讨人源HBV能否引起小鼠感染,并探讨小鼠作为研究HBV传播和致病机制的动物模型的可能性。本研究选取沙鼠和C57BL/6小鼠用作人源HBV阳性血清的人工感染试验动物,采用ELISA、PCR、Real-time PCR、免疫组织化学和Western blot等方法对人源HBV感染后沙鼠和C57BL/6小鼠的血清、粪便和肝脏等组织进行HBV相关病原和抗体的检测,来探讨HBV在沙鼠和C57BL/6小鼠体内的感染情况,并通过沙鼠和C57BL/6小鼠体内细胞凋亡和内质网应激相关蛋白的定位和表达,初步揭示HBV感染致肝细胞损伤的机制。研究结果如下：1、人源HBV感染沙鼠后1d,在肝脏和肾脏组织中可检测到HBV DNA;感染后2d和4w,只在肝脏中检测到HBV DNA。感染C57BL/6小鼠后1d,肝脏中可检测到HBV DNA。在血清、粪便、脑组织和唾液腺中,未能检测到HBV DNA。血清ELISA检测结果表明,在感染后1w内,HBsAg和HBeAg在小鼠血清中呈一过性出现；感染后1w,在沙鼠和C57BL/6小鼠的血清中均可检测到HBsAb和HBcAb,而且HBsAb能够在整个试验过程中持续性在血清中被检测到。肝脏组织中HBV相关抗原免疫组化染色结果表明沙鼠和C57小鼠感染人源HBV后肝脏中可检测到抗原阳性信号,且强度随感染时间的延长而增强。Western blot检测发现在感染后7d沙鼠肝脏中HBV抗原PreS1蛋白有明显的表达。2、沙鼠和C57BL/6小鼠感染人源HBV后均出现明显的组织病理学变化,呈现典型的病毒性肝炎的病理学变化。主要表现为肝窦扩张、淤血,肝细胞胞浆疏松、颗粒变性,汇管区淋巴细胞浸润和胆管增生等,病变程度随感染时间的延长而显严重。电镜观察发现,试验组小鼠肝细胞结构松散,内质网扩张,线粒体出现严重肿胀、空化。肾小管.上皮细胞胞质疏松,线粒体肿胀、嵴消失,内质网囊泡化,可见髓鞘样小体,胞浆内可见病毒包涵体,胞核内可见病毒样粒子。3、肝脏组织中增殖与修复相关蛋白免疫组化染色结果表明HBV感染后,沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织中PCNA和HSP70蛋白在体内表达出现先升高后下降的趋势,攻毒后蛋白表达显着高于对照组（P<0.05）,表明HBV感染后机体出现了相应的抗损伤机制来减少损害。4、细胞凋亡相关分子的免疫组化染色结果表明感染后沙鼠和C57BL/6小鼠体内Bax、Bcl-2、 Caspase-3和Fas/FasL的表达量均有不同程度的升高,显着高于对照组（P<0.05）,表明HBV感染后细胞凋亡的线粒体途径被激活,细胞凋亡在HBV感染导致肝细胞损伤的机制中发挥了重要作用。5、内质网应激（ERS）相关分子免疫组化染色结果表明感染后沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织中GRP78、CHOP、JNK及Caspase-12的表达均显着高于对照组（P<0.05）。Western blot结果也证实感染后肝脏ERS相关分子的表达量较对照组均有所升高。ERS相关蛋白表达量的升高表明HBV感染后启动了内质网应激反应,促进了肝细胞的凋亡。6、对沙鼠肝脏线粒体DNA不同区域基因序列扩增,观察、分析比较了人源HBV感染8w后,沙鼠肝脏线粒体DNA水平的变化,发现人源HBV感染后在沙鼠肝脏线粒体DNA的D-loop、 CytB和CytC三个区域均出现了一个碱基位点的改变,这些改变可能与线粒体结构或功能的变化相关。上述研究结果表明,人源HBV感染可引起沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织发生明显的病理损伤和炎症反应,采用PCR、血清ELISA和肝脏免疫组织化学检测在感染鼠体内检到HBV DNA及其相关抗原的存在,HBV可在小鼠体内进行短期的复制表达,表明沙鼠和C57BL/6小鼠具有作为HBV感染动物模型的潜质。通过对HBV感染后沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏的细胞损伤、细胞凋亡和内质网应激等相关因子表达量的变化初步观察研究发现,HBV感染后可通过激活线粒体途径和内质网应激途径促进肝细胞的凋亡,这可能是HBV感染引起肝细胞损伤的重要机制。
刘利强,杜娟,刘迎,佘锐萍,李文贵[2]（2012）在《屠宰猪肝脏中乙型肝炎病毒的检测》文中认为为了解屠宰猪体内乙型肝炎病毒感染情况,从河南、河北、北京和山东四个地区采集肝脏样品291例,应用免疫组化和PCR等方法对人乙型肝炎病毒相关抗原进行检测。结果表明,屠宰猪的肝脏中检测到乙型肝炎病毒的相关抗原,并且感染情况比较严重,为进一步研究猪肝脏中HBV致病性提供依据。
刘利强,杜娟,佘锐萍,李文贵[3]（2010）在《屠宰猪肝脏中乙型肝炎病毒的PCR检测与电镜观察》文中指出为探讨屠宰猪体内乙型肝炎病毒（HBV）流行情况,从北京某屠宰场采集肝脏样品,应用1对乙型肝炎病毒（HBV）S基因保守区的引物,采用PCR方法从屠宰猪肝脏中检测到HBV,序列分析表明,扩增片段与人HBV S基因的同源性高达99.05%;利用透射电镜观察到了样品中的病毒样离子。
夏抗抗,田纪景,佘锐萍,王建德,丁叶,陈明勇,李文贵,尹君[4]（2010）在《屠宰鸡血清和肝中乙型肝炎病毒的检测》文中提出采集了129份屠宰鸡血清样品,采用酶联免疫吸附试验检测了鸡血清样品中HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb、HBeAb等乙型肝炎诊断指标;用免疫电镜方法观察了血清样品中乙型肝炎病毒样粒子。采用免疫组织化学技术检测了肝中乙型肝炎病毒相关抗原的分布,并对鸡肝的S基因进行了PCR检测及同源性比对。结果显示,HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb、HBeAb的血清阳性率分别为28.68%、53.49%、17.05%、4.65%和9.3%,其中3份血清同时呈HBsAg、HBeAg阳性,阳性率为2.33%。电镜负染色样品观察可见大量密集排列的病毒样粒子,形态和大小类似于人乙型肝炎病毒Dane颗粒和小球状颗粒。鸡肝中HBsAg、HBcAg免疫组织化学检测结果显示,阳性率为39.06%～62.07%。应用PCR技术扩增出的2株乙型肝炎病毒的核酸序列片段与人乙型肝炎病毒的同源性分别高达92.2%和97.9%。以上结果说明,部分屠宰鸡可能存在乙型肝炎病毒感染。
丁叶,普天春,佘锐萍,张成林,闫鹤,尹君,田纪景,张金国,李睿文,李文贵[5]（2010）在《9例大熊猫肝脏和肾脏的器官病理学观察》文中进行了进一步梳理为了解发病死亡的大熊猫肝脏、肾脏的器官病理学变化特点,本研究采用组织病理学、组织化学和免疫组织化学等方法,对9例发病死亡的大熊猫肝脏和肾脏的组织病理形态学变化进行了系统观察。同时检测观察HBV和HEV抗原在大熊猫肝脏、肾脏组织内的分布定位。组织病理学观察发现,9只大熊猫的肝脏和肾脏均表现出不同程度的病变。肝脏主要表现为淤血、水肿,严重的有出血变化。肝细胞普遍变性,散在单个性坏死或多发性局灶性坏死,个别出现大片坏死、淋巴细胞等炎性细胞浸润、汇管区胆管增生、肝细胞萎缩、纤维结缔组织增生、含铁血黄素沉着等变化。肾脏主要表现为肾球囊扩张,肾小管上皮细胞出现不同程度的变性坏死,肾小管内出现蛋白管型,间质程度不同的纤维化和程度不同的炎性细胞浸润。免疫组织化学观察结果发现,9只大熊猫HBV和HEV的阳性检出率比较高,但各例肝肾组织内免疫组织化学阳性反应信号的强弱不尽相同。Mallory三色染色结果显示,9只大熊猫的肝脏和肾脏均出现不同程度的纤维组织增生。上述结果表明,大熊猫的肝脏和肾脏普遍存在炎症病变,而且大多都有不同程度的纤维组织增生性病变。这些病变的发生可能与肝炎病毒的感染有一定的关系。
田纪景,夏抗抗,佘锐萍,王建德,李文贵,丁叶,尹君[6]（2009）在《屠宰鸡血清和肝脏中乙肝病毒的检测》文中研究说明目的:为了解屠宰鸡乙型肝炎病毒的感染情况,为今后有效预防和控制禽类乙型肝炎的发生,并制定有效的防控措施提供依据。方法:采用酶联免疫吸附实验（ELISA）的方法,检测屠宰鸡血清中HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBchb、HBehb等乙肝五项指标;用免疫电镜方法观察血清中乙肝病毒样粒子;并用免疫组化技术检测肝脏中HBV相关抗原分布。结果:HBsAg阳性血清占28.68%,HBsAb阳性血清占53.49%;HBcAb阳性血清占17.05%;HBeAg阳性血清占4.65%;HBeAb阳性血清占9.3%,其中3份血清同时呈HBsAg、HBehg阳性,阳性率为2.33%。电镜负染色样品观察可见大量的密集排列的病毒样粒子,形态和大小类似于人HBV Dane颗粒和小球状颗粒。肝脏中HBshg、HBchg免疫组化检测结果显示,阳性率均在39.06%～62.07%不等。结论:部分屠宰鸡可能存在HBV感染。
姜中毅[7]（2010）在《猪传染性肝炎病毒的基因克隆及分子特征研究》文中认为猪乙型肝炎病毒（Hepatitis B liked Virus of swine,swHBV）和猪戊型肝炎病毒（Swine Hepatitis E Virus, sw HEV）是当今影响人和动物健康的两种重大人畜共患传染病,两病的广泛流行和蔓延已给人类和动物的健康造成了严重威胁。在现代化规模养猪场中,HBV与HEV往往混合感染,发病率呈上升趋势。为了了解这两种病原在猪群中的感染状况及病原特征,本实验以HBV和HEV当地流行毒株为研究材料,进行了流行病学调查、基因克隆、基因图谱绘制、分子结构特征分析、分子诊断及免疫研究,主要研究成果如下:1.应用ELISA技术,对兰州及周边地区的屠宰场、养殖场和散养猪采集血样976份,进行流行病学调查,并对猪HBV进行检测。结果如下:（1）猪类乙肝的各项检测结果显示,猪群中类乙肝阳性率较高,其中大三阳和小三阳率总体占到1.5%,病毒发现复制（e抗原）的猪占5.9%;产生抗体（表面抗体）的猪达16%。（2）在甘肃的靖远和景泰地区猪类乙肝的阳性率比较高,分别达到25.7﹪和20.5﹪。（3）八月龄以上的猪与八月龄以下的猪相比,类乙肝阳性率偏高,分别为14.6﹪和4.5﹪。（4）泔水猪比集约化猪场猪乙类肝阳性率高,分别为23.2﹪和5.9﹪。2.分段克隆了swHBV的S、C、P基因片段,绘制基因图谱和系统进化树,结果表明,扩增的swHBV-S基因长251bp,与国内外参考毒株CHN-QH5、Tibet127等12个毒株核苷酸序列的同源性分别为99.0%～99.6% ,其中与CHN-QH38株遗传距离较近;扩增的swHBV-C基因长550bp,与国内外参考毒株SK300、NSS-2等12个毒株核苷酸序列的同源性分别为99.0%～99.8%,其中与CHN-L45株遗传距离关系较近;扩增的swHBV-P基因长1414bp,与国内外参考毒株G683-1、S245-A2等10个毒株核苷酸序列的同源性分别为94.8%～95.8%,其中与S245-A2株遗传距离较近;3.采集甘肃、青海部分地区养殖场的猪粪便和胆汁556头份,进行了猪戊型肝炎病毒（swHEV）的RT-PCR检测,粪便和胆汁中猪戊型肝炎阳性率高达4.2%和10.7%。4.设计7对巢氏PCR引物,利用RT-RCR技术,分段克隆了涵盖swCH146株基因组的cDNA片段,并对swHEV146株全基因特征进行了分析,绘制了swCH146株全基因图谱和系统进化树,结果表明,该毒株全基因组长7284bp,与HEVG-4（AJ272108.1）和swCH25（AY594199.1）两株病毒亲缘关系最近,同属于HEV基因IV型,其中与新疆swCH25株同源性最高,达到89.5%。对swCH146株各基因的核苷酸同源性进行分析显示,swCH146株包含3个阅读框（ORF1、ORF2、ORF3）,swHEV146株ORF1与己报道的HEVⅠ型株（D11093 ）、Ⅱ型mexican strain株（ M74506.1）和Ⅲ型SWKOR-2株（FJ426404）的ORF1核苷酸同源性分别为87.5%、83.2%和91.0%,而与Ⅳ型KNIH-hHEV4株（FJ763142.1）的同源性高达97.2%;swHEV146株ORF2与以上I～III型毒株的核苷酸同源性分别为92.6%、92.4%和94.9%,与IV型KNIH-hHEV4株同源性为98.9%;swHEV146株ORF3与以上I～III型毒株的核苷酸同源性分别为87.5 %、90.0%和90.6%,与IV型KNIH-hHEV4株同源性为98.4%。5.构建了HEV swCH146株ORF2的重组腺病毒质粒,转染AD-293细胞,经荧光检测表明获得了AD-E复制缺陷型腺病毒。该项研究为swHEV重组腺病毒疫苗的研制奠定了良好的基础。
李文贵,佘锐萍,韦海涛,赵景义,刘利强,李秀敏,王英华,王德成[8]（2007）在《屠宰猪肝和血清中乙型肝炎病毒及戊型肝炎病毒的检测》文中进行了进一步梳理应用1对乙型肝炎病毒（HBV）S基因保守区的引物,采用PCR方法从屠宰猪肝、血清中检测到了HBV,序列分析表明,扩增片段与已发表的HBV S基因的同源性高达98%100%。电镜负染色样品观察结果表明,在HBV表面抗原ELISA检测强阳性反应的血清样品中存在有形态、大小与人HBV Dane颗粒和小球状颗粒相似的病毒粒子。针对戊型肝炎病毒（HEV）ORF2/ORF3重叠区设计了简并引物,采用巢式RT-PCR对屠宰猪肝和血清样品进行了检测。结果表明,部分屠宰猪肝中存在HEV。
杜念兴,黄吉凤[9]（2002）在《从猪和牛检出类乙肝病毒抗原和抗体》文中研究表明从屠宰场随机采取健康猪和牛血清和肝脏进行人乙肝两对半检测。结果从肝脏均检出S抗原和e抗原 ;血清中则检出S抗体和C抗体。S抗原、e抗原和S抗体阳性率都很高 ,并有一部份为强阳性 ,从而确切地证实牛和猪的肝脏中存在着类乙肝病毒
二、从猪和牛检出类乙肝病毒抗原和抗体（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、从猪和牛检出类乙肝病毒抗原和抗体（论文提纲范文）
（1）人源HBV人工感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病理学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 乙型肝炎病毒与乙肝流行病学研究进展 |
| 1.1 乙型肝炎概述 |
| 1.2 HBV的发现 |
| 1.3 HBV分类 |
| 1.4 HBV的形态特点 |
| 1.5 HBV的复制周期 |
| 1.6 HBV的发病机理 |
| 1.7 HBV的基因型和分布 |
| 1.8 HBV在动物中的流行 |
| 1.9 HBV受体研究进展 |
| 2 HBV感染模型和动物模型研究进展 |
| 2.1 HBV感染的细胞模型 |
| 2.2 HBV感染的动物模型 |
| 3 HBV与细胞凋亡 |
| 4 HBV与内质网应激(ERS) |
| 5 本研究的目的和意义 |
| 第二章 人源HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病原学研究 |
| 试验一 人源HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠的PCR和血清学检测 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 人源HBV阳性血清DNA含量测定结果 |
| 3.2 沙鼠和C57BL/6小鼠血清、组织和粪便中HBV DNA的PCR检测 |
| 3.3 感染鼠肝脏中HBV DNA含量Real-time PCR测定结果 |
| 3.4 感染沙鼠和C57BL/6小鼠血清ELISA检测结果 |
| 4 讨论与小结 |
| 试验二 人源HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠后HBV相关抗原的检测 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏中HBV相关抗原免疫组化检测结果 |
| 3.2 Western blot检测肝脏中HBV抗原 |
| 4 讨论与小结 |
| 试验三 人源HBV体外与沙鼠和C57BL/6小鼠血液共培养试验 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 沙鼠和C57BL/6小鼠血液体外与HBV混合培养后DNA的PCR检测 |
| 3.2 PCR扩增序列比对 |
| 4 讨论和小结 |
| 第三章 人源HBV感染致沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏损伤机制的研究 |
| 试验一 人源HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病理学变化观察 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 HBV感染对肝脏脏器指数及血清AST、ALT的影响 |
| 3.2 HBV感染沙鼠的病理学变化观察 |
| 3.3 HBV感染C57BL/6小鼠的病理学变化观察 |
| 4 讨论与小结 |
| 试验二 HBV感染对沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织PCNA及HSP70表达的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织中PCNA的表达情况 |
| 3.2 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织中HSP70的表达情况 |
| 4 讨论与小结 |
| 试验三 HBV感染对沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏细胞凋亡相关蛋白表达的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织中Bax和Bcl-2的表达情况 |
| 3.2 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织中Fas和FasL的表达情况 |
| 3.3 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织中Caspase 3的表达情况 |
| 4 讨论与小结 |
| 试验四 HBV感染对沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏组织ERS相关分子表达的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 HBV感染沙鼠和C57BL/6小鼠肝脏中内质网应激相关分子的蛋白量变化 |
| 3.2 Western blot检测HBV感染后肝脏中内质网应激相关分子蛋白量变化 |
| 4 讨论与小结 |
| 试验五 人源HBV感染沙鼠线粒体DNA基因变化的观察 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 沙鼠线粒体D-loop基因的扩增结果 |
| 3.2 沙鼠线粒体CytC基因的扩增结果 |
| 3.3 沙鼠线粒体CytB基因的扩增结果 |
| 4 讨论与小结 |
| 结论 |
| 本研究创新点 |
| 参考文献 |
| 图版与说明 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）屠宰猪肝脏中乙型肝炎病毒的检测（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 样品 |
| 1.1.2 试剂 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 样品处理 |
| 1.2.2 免疫组化染色 |
| 1.2.3 PCR检测猪肝脏HBV-DNA |
| 2 结果 |
| 2.1 免疫组化观察结果 |
| 2.1.1 不同地区屠宰猪肝脏中HBcAg和HBsAg免疫组化检测 |
| 2.1.2 HBcAg免疫组化观察结果 |
| 2.1.3 HBsAg免疫组化观察结果 |
| 2.2 PCR检测结果 |
| 3 讨论 |
（3）屠宰猪肝脏中乙型肝炎病毒的PCR检测与电镜观察（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 酶与试剂 |
| 1.3 HBV PCR检测 |
| 1.3.1 核酸提取 |
| 1.3.2 PCR扩增 |
| 1.3.3 PCR产物的克隆和测序 |
| 1.4 电镜样品的制备 |
| 2 结果 |
| 2.1 PCR检测结果 |
| 2.2 PCR产物的测序结果 |
| 2.3 电镜观察 |
| 3 讨论 |
（4）屠宰鸡血清和肝中乙型肝炎病毒的检测（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品来源 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 屠宰鸡血清中乙型肝炎五项指标的检测 |
| 2.2 屠宰鸡血清中乙型肝炎病毒样粒子的透射电镜观察 |
| 2.3 屠宰鸡肝HBsAg和HBcAg的免疫组织化学检测 |
| 2.4 屠宰鸡肝中乙型肝炎病毒的PCR检测 |
| 3 分析与讨论 |
（7）猪传染性肝炎病毒的基因克隆及分子特征研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| SUMMARY |
| 缩写词英汉对照表 |
| 第一篇 猪传染性肝炎病毒研究文献综述 |
| 第一章 猪类乙型肝炎病毒研究进展 |
| 前言 |
| 1 HBV 的形态结构特征 |
| 2 HBV 分子生物学研究 |
| 2.1 HBV 基因构成 |
| 2.2 HBV 的基因型 |
| 3 流行病学 |
| 3.1 地域分布和流行 |
| 3.2 传播途径 |
| 4 临床症状 |
| 5 病理变化和发病机制 |
| 6 动物HBV 的报道 |
| 6.1 猪 |
| 6.2 奶牛 |
| 6.3 禽类 |
| 6.4 羊 |
| 7 诊断策略 |
| 7.1 乙肝病毒的血清免疫检测 |
| 7.2 HBV 的分子生物学检测 |
| 8 预防与治疗 |
| 8.1 基因工程乙肝疫苗研制现状 |
| 8.2 活载体疫苗 |
| 8.3 治疗 |
| 9 展望 |
| 9.1 研究意义 |
| 9.2 前景 |
| 第二章 猪戊型肝炎病毒的研究进展 |
| 前言 |
| 1 结构特征 |
| 2 猪HEV 分子生物学研究 |
| 2.1 猪HEV 基因构成 |
| 2.2 猪HEV 的基因型 |
| 3 流行病学 |
| 3.1 地域分布和流行 |
| 3.2 传播途径 |
| 3.3 交叉感染 |
| 4 临床症状 |
| 5 病理变化和发病机制 |
| 6 猪HEV 与人HEV 的关系 |
| 6.1 与猪HEV 接触感染 |
| 6.2 食用猪肉感染 |
| 6.3 同源性 |
| 7 国内外研究进展 |
| 7.1 猪HEV 的检测 |
| 7.2 猪HEV 疫苗的研制 |
| 8 诊断及防制策略 |
| 8.1 免疫电镜 |
| 8.2 免疫荧光试验 |
| 8.3 酶联免疫吸附试验 |
| 8.4 免疫印迹法 |
| 8.5 RT-PCR 法 |
| 8.6 限制性内切酶消化法 |
| 8.7 免疫荧光阻断法[166] |
| 8.8 核酸序列非依赖性基因放大法(SISPA ) [167] |
| 8.9 预防 |
| 9 展望 |
| 9.1 研究意义 |
| 9.2 前景 |
| 第二篇 猪类乙型肝炎病毒感染的流行病学调查及基因克隆与分析 |
| 引言 |
| 第三章 猪类乙型肝炎病毒感染的流行病学调查 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 血清样本 |
| 1.2 试剂与仪器 |
| 1.3 检测方法与结果判定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 乙肝五项指标检测结果 |
| 2.2 不同地区猪的类乙肝阳性率 |
| 2.3 不同年龄段猪的类乙肝感染情况 |
| 2.4 喂养方式对猪HBV 的影响 |
| 3 讨论 |
| 第四章 猪类乙型肝炎病毒S 基因的克隆与分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 S 基因的PCR 扩增产物 |
| 2.2 阳性质粒的鉴定 |
| 2.3 S 基因序列分析 |
| 3 讨论 |
| 第五章 猪类乙型肝炎病毒C 基因的克隆与分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 C 基因的PCR 扩增产物 |
| 2.2 阳性质粒的鉴定 |
| 2.3 C 基因序列分析 |
| 3 讨论 |
| 第六章 猪类乙型肝炎病毒P 基因的克隆与分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 P 基因的PCR 扩增产物 |
| 2.2 阳性质粒的鉴定 |
| 2.3 P 基因序列分析 |
| 3 讨论 |
| 猪类乙型肝炎病毒感染研究结论 |
| 第三篇 猪戊型肝炎病毒全基因组的克隆及ORF2 表达载体的构建 |
| 引言 |
| 第七章 猪戊型肝炎病毒感染的PCR 检测 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 目的基因片段的PCR 扩增 |
| 2.2 PCR 检测结果 |
| 3 讨论 |
| 第八章 猪戊型肝炎病毒全基因序列的扩增与分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 5'RACE 和3'RACE 产物 |
| 2.2 HEV2、HEV3、HEV4、HEV5、HEV6 DNA 片段扩增产物 |
| 2.3 HEV 基因组序列的比较分析 |
| 3 讨论 |
| 第九章 猪戊型肝炎病毒ORF2 腺病毒载体的构建 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 HEV ORF2 的扩增 |
| 2.2 重组腺病毒穿梭载体的构建 |
| 2.3 获得复制缺陷型腺病毒质粒 |
| 2.4 荧光显微镜检测报告基因EGFP 的表达 |
| 2.5 重组腺病毒质粒转染293 细胞 |
| 3 讨论 |
| 猪戊型肝炎病毒基因组结构研究结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（8）屠宰猪肝和血清中乙型肝炎病毒及戊型肝炎病毒的检测（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品 |
| 1.2 酶与试剂 |
| 1.3 SHBV的PCR检测 |
| 1.3.1 DNA提取 |
| 1.3.2 PCR扩增 |
| 1.3.3 PCR产物的克隆和测序 |
| 1.4 免疫电镜负染色样品的制备 |
| 1.5 HEV RNA的巢式PCR检测 |
| 2 结果 |
| 2.1 SHBV检测 |
| 2.1.1 PCR检测 |
| 2.1.2 PCR产物的测序结果 |
| 2.1.3 电镜观察 |
| 2.2 HEV的RT-PCR扩增 |
| 3 讨论 |
| 3.1 关于猪乙肝病毒 |
| 3.2 关于戊肝病毒 |
四、从猪和牛检出类乙肝病毒抗原和抗体（论文参考文献）
- [1]人源HBV人工感染沙鼠和C57BL/6小鼠的病理学研究[D]. 赵月. 中国农业大学, 2014(03)
- [2]屠宰猪肝脏中乙型肝炎病毒的检测[J]. 刘利强,杜娟,刘迎,佘锐萍,李文贵. 动物医学进展, 2012(06)
- [3]屠宰猪肝脏中乙型肝炎病毒的PCR检测与电镜观察[J]. 刘利强,杜娟,佘锐萍,李文贵. 中国兽医杂志, 2010(11)
- [4]屠宰鸡血清和肝中乙型肝炎病毒的检测[J]. 夏抗抗,田纪景,佘锐萍,王建德,丁叶,陈明勇,李文贵,尹君. 中国兽医科学, 2010(11)
- [5]9例大熊猫肝脏和肾脏的器官病理学观察[J]. 丁叶,普天春,佘锐萍,张成林,闫鹤,尹君,田纪景,张金国,李睿文,李文贵. 科技导报, 2010(04)
- [6]屠宰鸡血清和肝脏中乙肝病毒的检测[A]. 田纪景,夏抗抗,佘锐萍,王建德,李文贵,丁叶,尹君. 中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集（上册）, 2009
- [7]猪传染性肝炎病毒的基因克隆及分子特征研究[D]. 姜中毅. 甘肃农业大学, 2010(12)
- [8]屠宰猪肝和血清中乙型肝炎病毒及戊型肝炎病毒的检测[J]. 李文贵,佘锐萍,韦海涛,赵景义,刘利强,李秀敏,王英华,王德成. 中国兽医科学, 2007(11)
- [9]从猪和牛检出类乙肝病毒抗原和抗体[J]. 杜念兴,黄吉凤. 畜牧与兽医, 2002(01)
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