一、奶牛结核病检疫中的几点注意事项（论文文献综述）
陈永忠,张成图,甄森萍,王淑琴,孟茹[1]（2014）在《西宁地区奶牛结核病感染情况调查》文中指出结核病为危害严重的人畜共患传染病,被世界动物卫生组织（OIE）列为B类动物疫病[1],我国也将其列为二类动物疫病,其传播流行严重影响畜牧业的持续发展和人类的健康。对于结核病,奶牛最易感,其次为水牛、黄牛、牦牛,人也可被感染。结核病病牛是本病的主要传染源。人类感染途径主要是食入未经检疫的畜产品,尤其是饮用未经巴氏消毒或煮沸的患有结核病牛的奶而经消化道感染[2]。为了了解西宁地区奶牛结核病
金大春,王跃川,胡一飞,金俊杰,王振宇[2]（2011）在《奶牛结核病感染情况的调查及流行趋势分析》文中认为本研究于2003-2010年在浙江省瑞安市采用牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验,连续8年累计对12245头（次）奶牛进行结核病感染情况的调查,期间共检出阳性奶牛893头,年均阳性率为7.29%。通过每年对阳性奶牛采取严格的处置和净化措施,使该市奶牛结核病的阳性率从2003年的14.99%（176/1174）逐年降低至2010年的1.40%（21/1496）,年递减率为25.65%,流行趋势呈明显下降。同时,将2007-2010年间4个年度不同饲养规模奶牛场（户）的检测数据进行统计分析,结果发现,奶牛结核病阳性率以开放式小规模奶牛场（存栏≤20头、场均10.3头）最高,平均7.28%（104/1429）,但随着饲养规模的适度增加,阳性率有呈现出稳定下降的趋势,并以较大规模奶牛场（存栏>150头、场均169头）最低,平均2.25%（19/845）,两者相差2.24倍。
黄爱芳,王学明,祁小红,冯志华[3]（2011）在《武威市奶牛结核病免疫学诊断的调查研究》文中研究表明随着奶牛养殖业的发展,为了保障消费者食乳安全,武威市畜牧兽医局每年对奶牛养殖场（户）奶牛结核病进行定期检疫,及时淘汰阳性牛,使三县一区的规模养殖场（户）奶牛结核病逐步被净化。免疫学检疫结果表明:自1996年～2006年11年间,武威市奶牛养殖量呈上升趋势,而结核病的阳性率则呈下降趋势。
董先敏[4]（2008）在《奶牛结核病检疫技术措施》文中提出本文介绍了应用型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应方法对牧场奶牛进行检疫的具体操作方法以及防控处理措施和注意事项。
王云霞[5]（2007）在《汉中地区奶牛结核病流行病学调查分析》文中提出牛结核病被世界动物卫生组织（OIE）列为B类动物疫病,是一种呈世界分布的人兽共患传染病,其传播流行影响着畜牧业的持续发展和人类的健康。为了保障人们的饮奶安全和人们的健康,本研究采用结核菌素（PPD）皮内变态反应方法,对从1996-2006年汉中地区奶牛结核病进行检疫检测,PPD皮内变态反应结果显示:汉中地区奶牛存栏数近年来基本上呈上升趋势,结核病阳性数和阳性率除1996-1998年有所下降外,从总的趋势讲亦均有所上升。另外采用全国第4次结核病流行病学调查方案对汉中地区的人结核病进行了调查,调查结果显示:从2002-2006年,结核病阳性率和结核病人数均呈上升趋势,而且该病没有季节性,并且在2006年全年各月的结核病人数也呈上升趋势。该研究为汉中地区制定结核病的防治措施提供了重要依据。
谢正,李肖梁,方维焕,应小飞,汤丽萍[6]（2007）在《杭州市奶牛结核病流行情况调查》文中研究表明结核病是由结核杆菌引起的人畜共患慢性传染病。采用牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验,2003—2006年对杭州市奶牛结核病感染情况进行调查,4年间共检牛52 160头,检出阳性牛590头,平均阳性率为1.13%。2004—2005年杭州市奶牛结核病发生主要集中在临安市和建德市。从奶牛结核病流行趋势分析,2004—2006年奶牛结核病平均阳性率（1.42%）,高于2000—2003年的水平（0.28%）。存栏20头奶牛以下的养殖户结核病发生率（33.33%）,明显高于养殖规模场（22.41%）。
王云霞,于三科,翟军军[7]（2007）在《汉中地区奶牛结核病的调查研究》文中研究指明按国标方法和全国第4次结核病流行病学调查方案,对汉中市近几年奶牛和奶牛饲养户进行了结核病检疫和调查,结果表明,奶牛结核病阳性率总体上都呈上升趋势,而且交叉感染比较严重。
沈文,张再清,焦忠新,周林,张登海[8]（2006）在《石河子地区某奶牛场结核病的检疫调查》文中研究指明按国标方法,采用牛型结核菌素（PPD）皮内变态反应试验对石河子地区某奶牛场荷斯坦奶牛进行结核病检疫,被检奶牛2 700头,检出结核病阳性奶牛72头,阳性率2.67%。本次调查为该牛场结核病防治工作提供了科学依据,确保了乳品质量,维护了消费者利益。
钦博[9]（2006）在《牛结核病胶乳凝集方法的建立以及临床的初步应用》文中进行了进一步梳理结核病是一种严重危害人类健康的慢性呼吸道传染病，其病原是结核分枝杆菌。据WHO估计全球约有20亿人感染，其中5％-10％会发展成活动性肺结核，每年新病例达800-1，000万，约300万人死亡。牛结核病（Bovine Tuberculosis，bTB）是由牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis）引起的包括人和家畜以及野生动物发病的一种慢性消耗性人兽共患传染病，被国际动物卫生组织（OIE）定为B类动物传染病。结核病是一数千年历史的古老疾病，曾经是引起人畜死亡最多的疾病之一。虽然一度被控制，但近年来随着世界贸易和畜牧业的飞速发展、人口流动、与HIV共感染和大量多重耐药性菌株出现，结核病又有抬头之势。 奶牛结核病，与布鲁氏菌病并称奶牛的“两病”，历来是严重威胁奶业的健康发展的重大传染病。其病原为牛分枝杆菌，可感染奶牛及其他包括人在内的几十种温血动物，尤以奶牛最易感染。据我国卫生部最近发布的卫生公报统计，结核病已超过狂犬病成为死亡人数和感染人数最多的疾病。我国是世界上仅次于印度的结核病高负担国家，世界卫生组织曾表示，除非消灭牛结核病，否则人类结核病的控制不会取得成功。我国对奶牛结核执行检疫-捕杀政策，灵敏快速特异的检测方法是有效执行该防疫政策的重要前提。牛结核病的防制主要是采用牛提纯结核菌素进行变态反应检疫，对检出的阳性牛进行隔离或扑杀，从源头上杜绝疾病传播。但是由于牛提纯结核菌素成分复杂，其特异性受其他分枝杆菌影响而出现假阳性，同时敏感性也较低，其诊断结果可信度不高，使“检疫-扑杀”政策的实施效果大打折扣。 1．牛型结核分枝杆菌基因mpb70的克隆和表达 克隆了牛分枝杆菌特异性抗原MPB70的编码基因，构建原核表达载体，诱导表达蛋白，提纯出MPB70蛋白质，并对其在牛结核病血清学诊断中的价值进行了初步评估。 2．牛结核病胶乳凝集方法的建立 以羧化的聚苯乙烯乳胶为载体，采用了共价偶联的技术经双功能试剂将表达产物和羧基化的乳胶共价偶联起来，建立了牛结核分枝杆菌MPB70蛋白乳胶凝集方法（LAT），该方法能够灵敏特异地检测牛血清中特异性MPB70抗体。由于采用了共价偶联的技术，克服了蛋白致敏普通乳胶时，致敏抗原量少、不稳定、致敏后的蛋白容易脱落等缺点。同时，采用MPB70蛋白作为抗原，使该方法具有更高的生物安全性。 3．牛结核病胶乳凝集方法的临床应用 使用建立的牛结核分枝杆菌MPB70蛋白乳胶凝集方法，对来自武汉市A、B两
胡杰[10]（2005）在《水牛结核病检疫的几个问题探讨》文中认为
二、奶牛结核病检疫中的几点注意事项（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、奶牛结核病检疫中的几点注意事项（论文提纲范文）
（1）西宁地区奶牛结核病感染情况调查（论文提纲范文）
| 1 基本情况 |
| 2 材料 |
| 2.1 检测样品 |
| 2.2 试剂 |
| 2.3 器材 |
| 3 方法 |
| 4 结果 |
| 5 分析与讨论 |
（2）奶牛结核病感染情况的调查及流行趋势分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 普查范围和检测时间 |
| 1.2 待检牛与统计分类 |
| 1.3 检测方法与结果判断 |
| 1.3.1 检测方法 |
| 1.3.2 判定结果 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 调查范围及数量和检测结果 |
| 2.2 不同年度奶牛结核病的感染情况及流行趋势 |
| 2.3 不同规模奶牛场结核病的检测结果分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 奶牛结核病的流行趋势 |
| 3.2 选择适合的养殖规模 |
| 3.3 强化综合防控措施 |
（3）武威市奶牛结核病免疫学诊断的调查研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 待检牛只 |
| 1.1.2 仪器设备 |
| 1.1.3 试剂 |
| 1.2 方 法 |
| 1.2.1 检疫准备 |
| 1.2.2 注射剂量 |
| 1.2.3 注射方法 |
| 1.2.4 观察反应 |
| 1.2.5 判定标准 |
| 1.2.5.1 阳性反应 |
| 1.2.5.2 疑似反应 |
| 1.2.5.3 阴性反应 |
| 1.2.6 注意事项 |
| 2 结 果 |
| 2.1 武威市奶牛结核病调查结果 |
| 2.2 武威市1996年～2006年奶牛存栏数和奶牛结核检疫数 (见图1) 。 |
| 2.3 武威市1996年～2006年奶牛结核病检疫率 (见图2) 。 |
| 2.4 武威市1996年～2006年奶牛结核阳性数与阳性率 (见图3) 。 |
| 3 小 结 |
（4）奶牛结核病检疫技术措施（论文提纲范文）
| 1 操作方法 |
| 1.1 注射部位及术前处理。 |
| 1.2 注射剂量。 |
| 1.3 注射方法。 |
| 1.4 观察方法。 |
| 2 判定结果 |
| 2.1 阳性反应。 |
| 2.2 疑似反应。 |
| 2.3 阴性反应。 |
| 3 防控及处理措施 |
| 4 注意事项 |
（5）汉中地区奶牛结核病流行病学调查分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 牛结核病的现状及诊断研究进展 |
| 1.1 牛结核病的现状 |
| 1.2 牛结核病的地区分布和流行情况 |
| 1.2.1 美洲 |
| 1.2.2 欧洲 |
| 1.2.3 大洋州 |
| 1.2.4 非洲 |
| 1.2.5 亚洲 |
| 1.2.6 拉丁美洲和加勒比海 |
| 1.3 病原学的研究 |
| 1.4 流行病学的研究 |
| 1.5 诊断方法的研究 |
| 1.5.1 细菌学方法 |
| 1.5.2 分子生物学诊断技术 |
| 1.5.3 免疫学诊断技术 |
| 1.6 防制技术进展 |
| 1.7 小结 |
| 第二章 汉中地区奶牛结核病流行病学调查分析 |
| 2.1 分支杆菌 PPD 皮内变态反应实验 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 仪器设备 |
| 2.1.3 试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 牛结核病检疫 |
| 2.2.2 人结核病的调查 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 奶牛结核检疫结果 |
| 2.3.2 汉中地区人结核病调查 |
| 2.3.3 临床症状调查 |
| 2.3.4 饲养环境调查 |
| 2.4 讨论与分析 |
| 2.5 建议 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）杭州市奶牛结核病流行情况调查（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 普查范围和时间 |
| 1.2 检测方法 |
| 1.3 结果判定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 2003—2006年奶牛结核病检测结果 |
| 2.2 奶牛结核病地区分布 |
| 2.3 奶牛结核病流行趋势 |
| 2.4 牛场规模与结核病发生率的关系 |
| 2.5 奶牛结核病防控对策 |
| 2.5.1 加强调入管理 |
| 2.5.2 定期开展奶牛结核病监测 |
| 2.5.3 人员监测 |
| 2.5.4 做好环境隔离 |
| 2.5.5 加强消毒 |
| 3 讨论 |
（9）牛结核病胶乳凝集方法的建立以及临床的初步应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 病原及基因组 |
| 1.2 流行病学 |
| 1.3 临床症状 |
| 1.3.1 肺结核 |
| 1.3.2 乳房结核 |
| 1.3.3 生殖结核 |
| 1.3.4 肠结核 |
| 1.4 牛结核病的诊断 |
| 1.4.1 结核菌素皮内试验(tuberculin skin test,TST) |
| 1.4.2 血清学诊断 |
| 1.4.3 对菌体成分的检测 |
| 1.4.4 淋巴细胞增生实验 |
| 1.4.5 细胞因子及细胞因子受体检测法 |
| 1.4.5.1 γ-干扰素(IFN-γ) |
| 1.4.5.2 白细胞介素-2(IL-2) |
| 1.4.5.3 白细胞介素-2受体α肽链(IL-2R-α) |
| 1.4.6 聚合酶链反应(PCR技术) |
| 1.4.7 核酸探针技术 |
| 1.5 结核杆菌特异性诊断抗原的研究 |
| 1.6 结核病疫苗研究 |
| 1.6.1 传统BCG疫苗 |
| 1.6.2 蛋白质亚单位疫苗 |
| 1.6.3 DNA疫苗 |
| 1.6.4 重组BCG和新型减毒活疫苗 |
| 1.6.5 以非致病性分枝杆菌为载体的重组疫苗 |
| 1.7 结核病的耐药机理 |
| 1.8免疫预防 |
| 1.9 结核病潜在的公共卫生意义 |
| 1.10 小结 |
| 第2章 研究目的意义 |
| 第3章 材料与方法 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 质粒及菌株 |
| 3.1.2 主要药品及试剂 |
| 3.1.3 抗生素的配制 |
| 3.1.4 细菌培养基的配制 |
| 3.1.5 质粒抽提与鉴定试剂的配制 |
| 3.1.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)缓冲液的配制 |
| 3.1.7 Western blot缓冲液的配制 |
| 3.1.8 其它试剂的配制 |
| 3.1.9 本研究中所用的寡核苷酸引物 |
| 3.1.10 乳胶试剂 |
| 3.1.11 实验血清 |
| 3.1.12 乳胶凝集(LAT)缓冲液的配制 |
| 3.2 mpb70基因克隆表达方法 |
| 3.2.1 PCR扩增目的基因片断 |
| 3.2.2 PCR产物的回收与纯化 |
| 3.2.3 PCR产物连接到pMD18-T载体 |
| 3.2.4 感受态细胞的制备(氯化钙法) |
| 3.2.5 质粒的转化 |
| 3.2.6 质粒的小量制备(碱裂解法) |
| 3.2.7 质粒的大量制备(碱裂解法) |
| 3.2.8 mpb70-pMD18-T的酶切处理和纯化 |
| 3.2.9 pET-28a载体制备(质粒DNA的小量制备) |
| 3.2.10 构建重组表达载体 |
| 3.2.11 转化子的鉴定 |
| 3.2.11.1 PCR鉴定 |
| 3.2.11.2 限制性内切酶鉴定 |
| 3.2.11.3 序列测定 |
| 3.2.12 pET28a-mpb70质粒的制备 |
| 3.2.13 把pET28a-mpb70质粒转化入大肠杆菌BL21 |
| 3.2.14 大肠杆菌BL21(DE3)的诱导表达 |
| 3.2.14.1 最佳的诱导表达条件的确定 |
| 3.2.14.2 小量诱导 |
| 3.2.15 表达蛋白的鉴定 |
| 3.2.15.1 包涵体的提取 |
| 3.2.15.2 SDS-PAGE |
| 3.2.15.3 Western-blot |
| 3.3 乳胶凝集诊断方法的建立 |
| 3.3.1 乳胶类型的选择 |
| 3.3.2 最佳偶联MPB70蛋白量的确定 |
| 3.3.3 最佳偶联时间的选择 |
| 3.3.4 最佳胶乳浓度的确定 |
| 3.3.5 偶联反应终止剂的选择 |
| 3.3.6 封闭剂的选择 |
| 3.3.7 检测方法及结果判定 |
| 3.3.8 LAT的特异性和敏感性试验 |
| 3.3.8.1 特异性试验 |
| 3.3.8.2 敏感性试验 |
| 3.3.9 重复性试验 |
| 3.3.9.1 批内重复 |
| 3.3.9.2 批间重复 |
| 第四章 结果与分析 |
| 4.1 基因克隆表达结果 |
| 4.1.1 牛型结核分枝杆菌mpb70基因扩增结果 |
| 4.1.2 重组载体的构建 |
| 4.1.3 重组质粒的PCR鉴定 |
| 4.1.4 pET28a-mpb70酶切鉴定 |
| 4.1.5 序列测定与分析 |
| 4.1.6 重组菌菌体裂解物的SDS-PAGE电泳结果 |
| 4.1.7 Western blot结果 |
| 4.2 临床实验结果 |
| 4.2.1 武汉奶牛场A的70头奶牛跟踪检测结果 |
| 4.2.2 武汉市奶牛场B的61头奶牛检测结果 |
| 4.3 临床实验结果分析 |
| 4.3.1 武汉市奶牛场A检测结果统计分析 |
| 4.3.1 武汉市奶牛场B检测结果统计分析 |
| 第5章 讨论 |
| 5.1 细菌裂解和包涵体的提取 |
| 5.2 包涵体的溶解及复性 |
| 5.3 MPB70蛋白 |
| 5.4 羧化乳胶的优点 |
| 5.5 乳胶凝集方法的条件优化 |
| 5.6 临床实验结果的分析 |
| 5.7 本方法的应用前景 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表文章 |
| 致谢 |
| 缩略词(Abbreviation) |
四、奶牛结核病检疫中的几点注意事项（论文参考文献）
- [1]西宁地区奶牛结核病感染情况调查[J]. 陈永忠,张成图,甄森萍,王淑琴,孟茹. 黑龙江畜牧兽医, 2014(10)
- [2]奶牛结核病感染情况的调查及流行趋势分析[J]. 金大春,王跃川,胡一飞,金俊杰,王振宇. 中国畜牧兽医, 2011(12)
- [3]武威市奶牛结核病免疫学诊断的调查研究[J]. 黄爱芳,王学明,祁小红,冯志华. 畜牧兽医杂志, 2011(05)
- [4]奶牛结核病检疫技术措施[J]. 董先敏. 安徽农学通报, 2008(16)
- [5]汉中地区奶牛结核病流行病学调查分析[D]. 王云霞. 西北农林科技大学, 2007(07)
- [6]杭州市奶牛结核病流行情况调查[J]. 谢正,李肖梁,方维焕,应小飞,汤丽萍. 浙江农业学报, 2007(04)
- [7]汉中地区奶牛结核病的调查研究[J]. 王云霞,于三科,翟军军. 动物医学进展, 2007(07)
- [8]石河子地区某奶牛场结核病的检疫调查[J]. 沈文,张再清,焦忠新,周林,张登海. 青海畜牧兽医杂志, 2006(05)
- [9]牛结核病胶乳凝集方法的建立以及临床的初步应用[D]. 钦博. 华中农业大学, 2006(02)
- [10]水牛结核病检疫的几个问题探讨[J]. 胡杰. 中国动物检疫, 2005(09)